Wasserstoff-Wasser-Aufnahme über Sondenernährung für Patienten mit Dekubitus und seine rekonstruktiven Wirkungen

 

Hintergrund

Dekubitus (Dekubitus, Dekubitus) ist bei unbeweglichen älteren Patienten häufig, und es gibt einige Forschungsarbeiten, um eine vorbeugende und kurative Methode zu untersuchen, aber keine ausreichende Wirksamkeit zu finden. Das Ziel dieser Studie ist es, die klinische Wirksamkeit auf die Wundheilung bei Patienten mit PU durch Aufnahme von in Wasserstoff gelöstem Wasser / wasserstoffwasser  (HW) über die Sondenernährung (TF) zu klären. Darüber hinaus wurden normale humane dermale Fibroblasten OUMS-36 und normale humane HaCaT-Keratinozyten der Epidermis-Zelllinie in vitro untersucht, um die Mechanismen zu untersuchen, die bestimmen, ob Wasserstoff eine Rolle bei der Wundheilung auf zellulärer Ebene spielt.

Methoden

In der vorliegenden Studie wurden 22 schwer hospitalisierte ältere japanische Patienten mit PU rekrutiert. Ihr Alter reichte von 71,0 bis 101,0 (86,7 ± 8,2) Jahre, 12 männliche und 10 weibliche Patienten, die alle an einer Essstörung und einem bettlägerigen Syndrom litten sekundäre Ergebnisse verschiedener Grunderkrankungen. Alle Patienten erhielten routinemäßige Pflegebehandlungen für PU in Kombination mit einer HW-Aufnahme über TF für 600 ml pro Tag anstelle einer teilweisen Feuchtigkeitsnachfüllung. Andererseits wurde wasserstoffwasser HW mit einer Wasserstoffperlenapparatur hergestellt, die  wasserstoffwasser HW mit 0,8-1,3 ppm gelöster Wasserstoffkonzentration (DH) und -602 mV bis -583 mV Oxidations-Reduktionspotential (ORP) im Gegensatz zu umgekehrt erzeugt osmotisches Reinstwasser (RW) als Referenz mit einem DH von <0,018 ppm und einem Redoxpotential von +184 mV zur Verwendung in der experimentellen In-vitro- Forschung. In In-vitro- Experimenten wurden OUMS-36-Fibroblasten und HaCaT-Keratinozyten jeweils in mit wasserstoffwasser HW und / oder RW hergestelltem Medium kultiviert. Die Immunfärbung wurde zum Nachweis der Typ-I-Kollagenrekonstruktion in OUMS-36-Zellen verwendet. Die intrazellulären reaktiven Sauerstoffspezies (ROS) wurden mittels NBT-Assay quantifiziert und die Lebensfähigkeit der HaCaT-Zellen mittels WST-1-Assay untersucht.

Ergebnisse

Zweiundzwanzig Patienten wurden nachträglich in eine wirksame Gruppe (EG, n = 12) und eine weniger wirksame Gruppe (LG, n = 10) gemäß den Ergebnissen der Endpunktbewertung und den Heilungskriterien unterteilt. PU-Krankenhausaufenthalte waren in EG signifikant kürzer als in LG (113,3 Tage gegenüber 155,4 Tagen, p <0,05), und die Verkürzungsrate betrug ungefähr 28,1%. Die reduzierenden Veränderungen (EG: 91,4%; LG: 48,6%) der Wundgröße stellten entweder in EG oder in LG einen statistisch signifikanten Unterschied gegenüber der wasserstoffwasser HW-Aufnahme dar ( p <0,05, p <0,001). Die In-vitro- Daten zeigen, dass die durch NBT-Assay quantifizierte intrazelluläre ROS durch HW, jedoch nicht durch RW, in mit Ultraviolett-A (UVA) bestrahlten HaCaT-Zellen verringert wurde. Bei mit UVA bestrahlten HaCaT-Zellen in RW war eine Kernkondensation und -fragmentierung aufgetreten, in wasserstoffwasser HW jedoch kaum, wie durch Färbung mit Hoechst 33342 gezeigt. Außerdem verschlechterte sich unter UVA-Bestrahlung entweder die mitochondriale Reduktionsfähigkeit von HaCaT-Zellen oder die Typ-I-Kollagenkonstruktion in OUMS-36-Zellen in RW-hergestelltem Kulturmedium, wurde jedoch in HW-hergestelltem Kulturmedium beibehalten, wie durch WST-1 gezeigt Assay bzw. Immunfärbung.

Schlussfolgerungen

Es wurde gezeigt, dass die HW-Aufnahme über TF bei schwer hospitalisierten älteren Patienten mit PU eine Verringerung der Wundgröße und eine frühzeitige Erholung bewirkt, was entweder auf die Typ-I-Kollagenkonstruktion bei dermalen Fibroblasten oder auf die gesteigerte mitochondriale Reduktionsfähigkeit und ROS-Repression bei epidermalen Keratinozyten zurückzuführen ist gezeigt durch Immunfärbung oder NBT- bzw. WST-1-Assays.

Einführung

PU tritt häufig bei unbeweglichen älteren oder anderen unbeweglichen Patienten auf, die an Krankheiten wie Rückenmarksverletzung, Amyotropher Lateralsklerose, Multipler Sklerose und Muskeldystrophie usw. leiden. Darüber hinaus gehören ältere und schwache bettlägerige Patienten zu einer Hochrisikopopulation für PU [ 1 ]. Schätzungen zufolge gibt es in den USA über eine Million ältere Menschen, die an der Hautspezialität leiden und den Risikofaktoren von PU ausgesetzt sind [ 2 ]. Grundsätzlich wird in der Regel darauf hingewiesen, dass die sozialen, psychologischen und finanziellen Aufwendungen für PU unermesslich sind, Patienten und ihre Familien sowie Leistungserbringer immer psychisch belastet sind [ 3 ].

Für PU ist es eine vorrangige Forschungsaufgabe, eine kostengünstige, aber wirksame präventive und kurative Methode zu erforschen. Obwohl verschiedene Methoden zur Vorbeugung und Behandlung entwickelt wurden, sind sie bei weitem nicht erfolgreich genug. Grundlegende Studien verlaufen, wenn auch etwas verzögert, stetig wie die klinische Studie. Als grundlegende Studien zur Wundheilung konzentrieren sich viele Forscher auf hautbildende Proteine ​​wie Kollagen, Elastin, Laminin und Fibronektin sowie auf die Stoffwechselaktivität und die Proliferationsfähigkeit dermaler Fibroblasten [ 4 , 5 ].

In Bezug auf diese Angelegenheit hatten wir die Tatsache bestätigt, dass wasserstoffwasser HW als äußerliche Anwendung für die Haut den Aufbau des Typ-I-Kollagens in fibroblastischen Zellen der Dermis fördern kann [ 6 – 8 ]. Wir stellten wasserstoffwasser HW mit einer Wasserstoffperlenapparatur her, wiesen einen DH von 1,13 ppm und einen Redox-Wert von –741 mV auf, im Gegensatz zu einem DH von <0,01 ppm und einem Redox-Wert von +150 mV für normales Wasser [ 6 ]. Gleichzeitig wurden normale humane dermale Fibroblasten OUMS-36 und normale humane von der Epidermis abgeleitete Keratinozyten HaCaT unter Verwendung einer Immunfärbung kultiviert, zusätzlich wurden WST-8- und DAPI-Färbungen durchgeführt, um die zytoprotektiven Wirkungen von HW wasserstoffwasser gegen UVA-Bestrahlung zu untersuchen. Sechs japanische Probanden wurden 3 Monate lang täglich in eine Studie zum HW-Baden (DH, 0,2-0,4 ppm) eingeschlossen. Die erhaltenen Ergebnisse zeigten, dass das HW-Baden bei vier Probanden am 90. Tag im Vergleich zu Tag 0 die Falten im Nacken signifikant verbesserte. Somit wurde die Schlussfolgerung gezogen, dass wasserstoffwasser HW als tägliche Hautpflegeroutine zur Unterdrückung von UVA-Strahlen dienen kann. induzierte Hautschäden durch ROS-Scavenging und Förderung der Typ-I-Kollagensynthese in der Dermis. Andererseits haben viele Grundlagenforschungsstudien gezeigt, dass wasserstoffwasser HW als orale Zufuhr zur Absorption über den Magen-Darm-Trakt bei verschiedenen Krankheiten weit verbreitet ist [ 9 – 14 ]. Die Forschungen legen nahe, dass wasserstoffwasser HW nach wie vor eine wirksame Methode ist, um die Haut zu reparieren und die ROS zu entfernen, unabhängig davon, ob es sich um eine badende oder eine orale Behandlung handelt [ 15 – 17 ].

Wir haben die Theorie aufgestellt, dass eine routinemäßige Behandlung in Kombination mit einer HW-Zufuhr über TF bei Patienten mit PU die Wundheilung verbessern und einen besseren Gesundheitszustand als zuvor aufrechterhalten kann. Ziel dieser Studie ist es, die klinische Wirksamkeit der Wundheilung bei PU-Patienten durch die Einnahme von wasserstoffwasser HW über TF zu klären. Darüber hinaus wurden OUMS-36-Zellen und HaCaT-Zellen untersucht, um die Mechanismen zu analysieren, die sich darauf beziehen, ob Wasserstoff in vitro eine Rolle bei der Wundheilung auf zellulärer Ebene spielt.

Methoden

Klinische Materialien

Patienten

Die für diese Studie analysierten medizinischen Akten wurden von 22 älteren japanischen Patienten mit PU erhalten, die im Kobayashi-Krankenhaus, Fukuyama City, Präfektur Hiroshima, Japan, stationär behandelt wurden. Dies ist ein allgemeines Krankenhaus, das an eine gemischte Langzeitpflege angeschlossen ist Einrichtung. Diese Studie wurde von der Ethikkommission des Kobayashi-Krankenhauses genehmigt.

Das Alter der PU-Patienten, die wir in dieser Studie behandelten, lag zwischen 71,0 und 101,0 (86,7 ± 8,2) Jahre, und zehn Patienten waren Frauen. Zum Zeitpunkt der Aufnahme hatten sie an einer oder mehreren Krankheiten und Komplikationen gelitten, und fast alle waren bettlägerige ältere Menschen mit einem hohen Risiko der PU-Entwicklung, und alle konnten ohne die Hilfe anderer Menschen nicht essen. Zum Zeitpunkt der Aufnahme oder während des Krankenhausaufenthalts traten bei allen Patienten nach und nach Symptome von PU auf.

Die Arten von Krankheiten und Komplikationen bei diesen Patienten umfassten nicht nur Essstörungen, sondern 90% zeigten auch, dass sie häufiger im Alter waren und 100% hatten eine eingeschränkte Mobilität. Es muss jedoch betont werden, dass die PU-Inzidenz für Neuerkrankungen im Kobayashi-Krankenhaus in den Jahren 2010–2011 weiterhin bei etwa 2,10% lag und auf niedrigem Niveau blieb. In einer landesweiten Umfrage der japanischen Gesellschaft für Dekubitus wurde eine durchschnittliche PU-Inzidenz von 2,43% angegeben [ 18 ].

Zweiundzwanzig Patienten wurden nachträglich in EG (effektive Gruppe, n = 12) und LG (weniger effektive Gruppe, n = 10) gemäß den Ergebnissen der Endpunktbewertung und den Heilungskriterien eingeteilt. Einzelheiten zur Entlassung aus dem Krankenhaus wurden analysiert und die Ausgangsdaten zusammengefasst (Tabelle 1 ). In der Datenverarbeitung wurden die Ergebnisse aller Patienten gemäß der Richtlinie von EPUAP (European Pressure Ulcer Advisory Panel) und NPUAP (National Pressure Ulcer Advisory Panel), die zur Beurteilung des Schweregrads von PU herangezogen werden, im Jahr 2009 als Stadium I-IV eingestuft. Zufälligerweise gehörten alle Patienten in dieser Studie zum Stadium II oder III.

Tabelle 1 Eigenschaften der Basisdaten von PU-Patienten in zwei Gruppen

Klinische Pflegebehandlungen

Krankenhaus routinemäßige Behandlung

Die Behandlung konzentrierte sich auf die Verhinderung einer Verschlechterung von PU und auf die Wiederherstellung gesunder Haut. Entsprechend den routinemäßigen Pflegebehandlungen für alle Patienten wurden nicht-chirurgische Therapien ausgewählt, wie Salbe, Mullverband, Umhüllung und Bettpolster wurden nach dem Waschen durch Desinfektion mit saurem Wasser verwendet. Die Hautpflege, Druckentlastung und Ernährungsunterstützung wurden im Rahmen dieser Pflegebehandlung aggressiv eingesetzt [ 1 , 3 ]. Die wichtigsten Pflegeschritte zur Behandlung von PU waren:

  1. ein.Verwaltung der Gewebebelastung.
  2. b.Halten Sie den Ulkusbereich sauber und bedeckt und lassen Sie ihn nicht austrocknen.
  3. c.Die Körperhaltung ändert sich mindestens alle 2 Stunden, wenn der Patient an ein Bett gebunden ist, oder bis zu alle 15 Minuten, wenn er im Rollstuhl sitzt.
  4. d.Um eine positive Stickstoffbilanz zu erreichen, verbraucht der Patient mit TF ungefähr 30 bis 35 Kalorien pro kg und Tag und 1,25 bis 1,50 g Protein pro kg und Tag.

Vorbereitung für HW wasserstoffwasser

wasserstoffwasser HW wurde mit einer Wasserstoffperlenapparatur hergestellt, die hauptsächlich aus einem Wasserversorgungsabschnitt zur Herstellung von RW mit weniger als 0,018 ppm DH und +184 mV Redox und HW mit 0,8-1,3 ppm DH und -602 mV bis -583 mV besteht von ORP. Zum Vergleich von wasserstoffwasser HW mit RW wurden die Wassercharakteristikparameter mit den verschiedenen Verdünnungsraten gemessen (Tabelle 2 , Abbildungen 1 und 2 ). Es muss betont werden, dass einige stabile charakteristische Indikatoren und die Eigenschaften für die Unschuld und Unschädlichkeit von Wasserstoffwasser aus mehreren getrennten in vivo und menschlichen Experimenten erhalten wurden, die wir berichtet hatten [ 19 – 23 ]. Währenddessen wurden PU-Patienten über die Sondenfütterung gezwungen, morgens und nachmittags jeweils ungefähr eine Stunde lang wasserstoffwasser HW von 600 ml pro Tag zu sich zu nehmen, unmittelbar nachdem wasserstoffwasser HW jedes Mal hergestellt worden war.

Tabelle 2 Charakteristische Parameter, die aus in Wasserstoff gelöstem Wasser gegen umgekehrt osmotisches ultrareines Wasser erhalten wurden
Abbildung 1
Abbildung 1

Messergebnisse der Verdünnung von wasserstoffwasser HW mit RW. Die Verdünnungsraten sind in Abbildung 1 dargestellt . Die Abbildungen 1 – a und – b zeigen die immer stärkeren Tendenzen zu DO (gelöster Sauerstoffkonzentration) und ORP (Redoxpotential). In der Zwischenzeit zeigt DH (Konzentration an gelöstem Wasserstoff), wie in den Fig. 1- c und -d gezeigt, die stetig abnehmende Tendenz, die anzeigt, dass der im Wasserstoffwasser gelöste Wasserstoff durch Mischen mit normalem Wasser langsam verdampft wurde. Andererseits hielten sowohl HW wasserstoffwasser als auch RW den Temperaturbereich von 23,2-24,1ºC und pH 7,37-7,48, unabhängig von der 1- bis 11-fachen Verdünnungsrate.

Figur 2
Figur 2

Eine Vorrichtung zur Herstellung von in Wasserstoff gelöstem Wasser und zum Vergleich von in Wasserstoff gelöstem Wasser mit Leitungswasser im Hinblick auf ihre mit einem Aerosolpartikelzähler erfassten Blasenpartikelverteilungen. Abbildung 2 – a : Die Volumenrate der Blasen mit angegebener Größe im Verhältnis zum Gesamtvolumen der Blasen in Leitungswasser (im Zusammenhang mit der Entchlorung) wurde mit einem Aerosolpartikelzähler (Beckmann-Coulter, Delsa Nano S) analysiert. 2- a-1 und a-2 : Mikroblasenpartikel mit Durchmessern über 3 μm in Leitungswasser waren im Histogramm zu mehr als 50% belegt. Zusätzlich wurden fünf Wassereigenschaftsparameter der Leitungswasserprobe wie folgt nachgewiesen. DH: 0,025 ppm, DO: 8,6 ppm, ORP: +250 mV, pH: 7,30, Chlorionenkonzentrationen: 0,015 ppm. 2- b : Die Verteilung der Blasenpartikel in in Wasserstoff gelöstem Wasser wurde mit einem Aerosolpartikelzähler (Beckmann-Coulter, Delsa Nano S) analysiert. 2- b-1 : Nanoblasenbildende Partikel aus in Wasserstoff gelöstem Wasser waren reichlich vorhanden und im Gegensatz dazu waren die Mikroblasenbildenden Partikel über 3 & mgr; m rar. 2- b-2 : Die Nanoblasenpartikel mit einem Durchmesser unter 1 μm haben eine höhere Belegung als eines der Mikroblasenpartikel. 2- c : Eine schematische Ansicht einer Vorrichtung (Vorschlag Nr. 2005-177724, japanisches Patent) zur Herstellung von in Wasserstoff gelöstem Wasser. Der Mechanismus bedeutet, dass die minimalen Volumina von Tröpfchen mit Nanogröße erzeugt werden, um ihre Oberfläche zu maximieren, und so wurde ein Hochdruckwasserstoffgas stark in die Tröpfchen im Inneren eingebaut. Außerdem enthält der Tank eine Ausstoßdüse und ein Führungsrohr aus Wasserstoffgas, das aus der herkömmlichen Vorrichtung hergestellt wurde. Die Hauptzubehörteile und ihre Indizes sind wie folgt: 1. Abgasabschnitt, 0,01 MPa; 2. Wasserversorgungsabschnitt , 0,3 MPa, 1 Charge = 15 l / 8 min; 3. Wasserstoffgasversorgungsabschnitt , 0,9 MPa, 0,55 l / min; 4. Auslassabschnitt von in Wasserstoff gelöstem Wasser ; 5. winzige Teilchen aus Siliciumdioxid-Quarzporphyr ; 6. Wasserstoffstrahldüse mit mikroporösem Filter , wobei der Porendurchmesser 6,1 & mgr; m beträgt.

Klinische Bewertungen

Die Bewertungsindizes für klinisch-therapeutische Wirkungen auf PU bestanden aus den stationären Tagen, der Wundgröße, den Einstufungen des PU-Stadiums und dem DESIGN-Rating.

Tage im Krankenhaus

Da die verlängerte Dauer des Krankenhausaufenthalts für einen PU-Patienten mit Lebensqualität ein wichtiger Indikator ist, wurden die Tage von der Aufnahme bis zur Entlassung für 22 Patienten gezählt.

Wundgröße

Um genaue objektive Informationen zu erhalten und den Heilungsgrad der Wunde zu überwachen, maß das medizinische Pflegepersonal Größe, Tiefe und Fläche [ 24 ], verwendete Fotografien und Diagramme zur Aufzeichnung der Form und des Umrisses der Wunde.

Einteilung der PU-Stufen

Gemäß einer bekannten Panel-Richtlinie, die 2009 von EPUAP und NPUAP erstellt wurde [ 3 ], umfasst Stadium II die Teildicke bei Hautverlust mit Beteiligung von Epidermis, Dermis oder beidem. Das Geschwür ist oberflächlich und stellt sich klinisch als Abrieb oder Blase dar, ist aber nicht tiefer als die Dermis. Andererseits betrifft Stadium III die gesamte Tiefe der Haut und kann sich bis in die subkutane Gewebeschicht erstrecken, die eine relativ schlechte Blutversorgung aufweist und möglicherweise schwer zu heilen ist [ 25 , 26 ].

DESIGN-Bewertung

DESIGN war ein absolutes Bewertungsinstrument und wurde als klinischer Indikator zur Beurteilung der Qualität der medizinischen Versorgung herangezogen. Der Score konnte jedoch nicht mit dem Schweregrad der PU bei verschiedenen Patienten und ihren verschiedenen Geschwüren verglichen werden. Aus diesem Grund wurde das DESIGN-Rating erfunden, um eine einfache und einfache Beurteilung von PU zu ermöglichen [ 27 , 28 ]. In unserer Studie wurde der DESIGN-Rating-Score jedes Patienten mindestens einmal monatlich vom medizinischen Personal aufgezeichnet.

In-vitro- Experimente

Materialen und Methoden

Normale humane dermale Fibroblastenzellen OUMS-36

OUMS-36-Zellen wurden 18 Stunden in HW- oder RW-hergestelltem Dulbecco-modifiziertem Eagle-Medium (DMEM; Nissui Pharmaceutical Co. Ltd., Tokio), ergänzt mit 10% FCS (fötales Kälberserum) (GIBCO) in einem CO 2 -Inkubator kultiviert Bei 37 ° C und pH 7,1-7,4 in einer angefeuchteten Atmosphäre von 5% CO 2 aufbewahren . Das verbrauchte Medium wurde durch das frische HW- oder RW-Kulturmedium ersetzt und sofort mit UVA-Strahlen in Dosen von 12 oder 18 J / cm² bestrahlt, was dem normalen Dosisbereich für das tägliche Leben des Menschen entspricht. Die resultierenden Zellen wurden mit 4 ‘, 6-Diamidino-2-phenylindoldihydrochlorid (DAPI, Ultracruz Mounting Medium, sc-24941, Santa Cruz Biotechnology Inc., Santa Cruz, CA) auf die Kerne gefärbt und auf Kollagen vom Typ I untersucht Rekonstruktion durch Immunfärbung unter Verwendung des ersten Antikörpers, der gegen Kollagen Typ I gerichtet ist, und des mit FITC (Fluoresceinisothiocyanat) konjugierten sekundären Antikörpers, wie mit einem Fluoreszenzmikroskop (ECLIPSE E600, Nikon Corp., Tokio) wie zuvor beschrieben beobachtet [ 6 ].

Normale humane, von der Epidermis abgeleitete Keratinozyten HaCaT

HaCaT-Zellen wurden in ähnlicher Weise in HW- oder RW-hergestelltem DMEM, das mit 10% FCS (GIBCO) supplementiert war, kultiviert und in ähnlicher Weise mit UVA bestrahlt. Die resultierenden Zellen wurden durch WST-1-Verfahren unter Verwendung von (Phenyl) -5- (2-disulfophenyl) -2H-tetrazolium, Mononatriumsalz als Redoxindikator und durch NBT (Nitroblau) auf ROS wie Superoxidanionenradikale untersucht Tetrazorium) -Assay wie zuvor beschrieben [ 6 ].

statistische Analyse

Entweder in einer klinischen Studie oder in einer In-vitro- Studie wurde der t- Test des Schülers verwendet, um den Unterschied im Mittelwert ± SD zwischen der Kontrollgruppe und der behandelten Gruppe unter Verwendung einer Microsoft Office Excel 2010-Software (Microsoft, Albuquerque, NM, USA) oder eines Softwarepakets SPSS zu vergleichen 11.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) für Windows. Ein p- Wert, der unter 0,05 liegt, wurde als statistisch signifikant angesehen.

Ergebnisse

Die klinischen Ergebnisse von Routinebehandlungen in Kombination mit HW wasserstoffwasser über TF

Die hospitalisierten Tage und das DESIGN-Rating von PU

Bei den PU-Patienten waren die stationären Tage in EG signifikant kürzer als in LG (113,3 Tage gegenüber 155,4 Tagen, p <0,05) und die PU-Reduktionsrate betrug ungefähr 28,1% (Abbildung 3 -a). Ebenso wurde das DESIGN-Rating in EG verringert, um den Beginn mit dem Endpunkt (11,5 Raten gegenüber 14,3 Raten, p <0,05) zwischen den Prä-Post-Bewertungen zu vergleichen, einschließlich beider Ergebnisse (Bewertung in der Anfangszeit, am Tag des Beginns) Krankenhauseinweisung) und im Endpunkt (Auswertung in letzter Zeit, am Tag der Entlassung aus dem Krankenhaus oder Todestag). In LG wurde in der DESIGN-Bewertung, die den Schweregrad für PU angibt, zwischen beiden keine statistische Signifikanz festgestellt (Abbildung 3 -b).

Figur 3
Figur 3

Vergleich der klinischen Wirkungen von PU für die Tage im Krankenhaus und der DESIGN-Bewertung in der wirksamen Gruppe und in der weniger wirksamen Gruppe. Abbildung 3 – a zeigt, dass der Zeitraum für die PU-Krankenhausaufenthalte in EG signifikant kürzer war als in LG. Abbildung 3 – b zeigt an, dass die DESIGN-Bewertung in EG zum Vergleich des Beginns mit dem Endpunkt verringert wurde. Es wurden Pre-Post-Bewertungen durchgeführt, bei denen der Beginn und der Endpunkt berücksichtigt wurden. Alle Werte werden statistisch verglichen. Die statistische Analyse wurde unter Verwendung des Student- t- Tests durchgeführt, und die signifikanten Unterschiede sind als p <0,05 definiert. Die Daten werden als Mittelwert mit der Standardabweichung (± SD, angezeigt durch den vertikalen Balken) dargestellt. p <0,05.

Ergebnisse der Wundgröße in zwei Gruppen

Die Wundmessung ist ein wichtiges Mittel zur Bestimmung des PU-Gehalts. Die Messmethode ist in Abbildung 4 -a (Abbildung 4 -a) dargestellt. Sowohl bei EG als auch bei LG stellen die reduzierenden Veränderungen (EG: 91,4%; LG: 48,6%) der Wundgrößen einen statistisch signifikanten Unterschied dar ( p <0,05, p <0,001). In ähnlicher Weise ist auch ein signifikanter Unterschied zwischen der EG- und der LG-Gruppe festzustellen ( p <0,05) (Abbildung 4 -b).

Figur 4
Figur 4

Messmethoden für die Wundgröße und Ergebnisse der Wundgröße bei der reduzierenden Veränderung der Wundgröße zwischen beiden Gruppen. Abbildung 4 – a zeigt die Wundmessmethode. Messen Sie zunächst die größte Länge in axialer Richtung (von Kopf bis Fuß) und dann die größte Breite in Querrichtung (von Seite zu Seite) mit einem Zentimeterlineal. Zum Schluss multiplizieren Sie die Längen- und Breitenabstände, um eine Schätzung der Oberfläche in Quadratzentimetern (cm 2 ) zu erhalten. Abbildung 4 – b zeigt einen statistisch signifikanten Unterschied zur Verringerung der Wundgrößenänderung in zwei Gruppen. Einige Patienten hatten mehrere Standorte für PU. Werte werden statistisch verglichen. T- Test des Schülers, * p <0,05, *** p <0,001.

Angabe verschiedener PU-Beurteilungsindizes für Stufe II und Stufe III

Zur Beobachtung der klinischen Auswirkungen in vielerlei Hinsicht, einschließlich der Tage im Krankenhaus, wurden DESIGN-Bewertung und Wundgröße, EG und LG in vier Untergruppen nach Einteilung der PU-Stadien unterteilt (siehe Methoden (3) -3 ). Infolgedessen war in Stadium II die Dauer der Krankenhausaufenthalte in EG signifikant kürzer als in LG (87,5 Tage gegenüber 387,0 Tagen, p <0,001). Im Gegensatz dazu gab es in zwei Gruppen keine statistische Signifikanz für Krankenhausaufenthalte im Stadium III (Abbildung 5 -a) aufgrund anderer Erkrankungen als PU. Darüber hinaus zeigte das DESIGN-Rating der Untergruppen der Stadien II und III in EG einen statistisch signifikanten Unterschied ( p <0,05) (Abbildung 5 -b). Die Abnahme der Wundgröße innerhalb der Untergruppen des Stadiums II und des Stadiums III weist statistische Unterschiede auf (Abbildung 5 -c). Zusammenfassend heilen EG-Ulzera im Stadium II und III schneller und effektiver als LG-Ulzera.

Abbildung 5
Abbildung5

Angabe verschiedener PU-Beurteilungsindizes für Stufe II und Stufe III. Die Abbildungen 5 – a bis c weisen auf sehr signifikante Unterschiede zwischen vier Untergruppen auf der Grundlage von Stadium II oder Stadium III hin. P- Werte berechnet aus Student’s t- Test, * p <0,05, ** p <0,01, *** p <0,001.

Ergebnisse eines typischen Falls zum zeitabhängigen Wundheilungsfortschritt: für eine 85-jährige Patientin mit PU

Abbildung 6 zeigt den zeitabhängigen Wundheilungsfortschritt einer 85-jährigen Patientin mit PU. Sie wurde ins Krankenhaus eingeliefert, weil sie an PU litt. Der Wundbefund zu Beginn umfasste: Lokalisation: Kreuzbein; Wundgröße (cm 2 ): 20,8; Stufe: II; DESIGN-Bewertung: 16. Vier Monate nach der routinemäßigen Pflegebehandlung und einer Kombination mit der Aufnahme von HW wasserstoffwasser über TF war der Krater fast verschwunden. Der Wundbefund am Endpunkt (vs. Beginn) umfasste: Wundgröße (cm 2 ): ungefähr 0 (Verschwinden); Stufe: I (verbessern); DESIGN-Bewertung: 6 (Abnahme) (Abbildungen 6 -a bis -d).

Abbildung 6
Abbildung 6

Ergebnisse eines typischen Falls zum zeitabhängigen Wundheilungsverlauf. Ein jährlicher zeitabhängiger Wundheilungsfortschritt für eine 85-jährige PU-Patientin wird berichtet. Sie wurde ins Krankenhaus eingeliefert, um sich bei PU behandeln zu lassen. Abbildung 6 – a zeigt Fotos zum zeitabhängigen Wundheilungsverlauf desselben Patienten. Die Abbildungen 6- b bis- d zeigen die verringerten Tendenzen der Wundgröße, der DESIGN-Bewertung bzw. des Stadiums.

Ergebnisse eines anderen typischen Falls zum zeitabhängigen Wundheilungsfortschritt: für einen 80-jährigen männlichen Patienten mit PU

Abbildung 7 zeigt den zeitabhängigen Wundheilungsfortschritt eines 80-jährigen männlichen Patienten mit PU. Sein Krankenhausaufenthalt dauerte 10 Monate und es konnte in die beiden Unterperioden unterteilt werden. In den letzten 5 Monaten erhielt er zusätzlich zur routinemäßigen Pflege eine HW-Behandlung. Das Ergebnis zeigt ein verbessertes Ergebnis (Abbildungen 7 -a, -b).

Abbildung 7
Abbildung7

Ergebnisse eines weiteren typischen Falls zum zeitabhängigen Wundheilungsverlauf. Ähnlich wie in Abbildung 6 zeigt Abbildung 7 auch einen zeitabhängigen Wundheilungsfortschritt bei einem 80-jährigen männlichen PU-Patienten. Abbildung 7 – a zeigt die Merkmale, die im vorherigen Zeitraum nur für die routinemäßige Behandlung aufgenommen wurden. Auf der anderen Seite werden in Abbildung 7 – b diejenigen dargestellt, die im letzten Zeitraum für die routinemäßige Pflegebehandlung plus HW-Aufnahme fotografiert wurden. Der letztgenannte Zeitraum bei der Verwendung der HW-Aufnahme zeigt ein deutlich verbessertes Ergebnis.

In-vitro- Experimente

Promotorische Effekte auf die Rekonstruktion von Typ-I-Kollagen, wie durch Immunfärbung gezeigt, auf normale humane dermale Fibroblasten OUMS-36, die mit UVA-Strahlen bestrahlt und dann mit RW- bzw. HW-hergestelltem Kulturmedium verabreicht wurden

Um die rekonstruktive Wirkung von wasserstoffwasser HW auf Typ-I-Kollagen zu untersuchen, verwendeten wir Immunfärbung auf OUMS-36-Zellen, die mit UVA-Strahlen bestrahlt und dann in vitro mit RW bzw. HW wasserstoffwasser verabreicht wurden. Repräsentative Ausdrücke und Pixelwerte wurden mit einer Software ImageJ ( http://rsb.info.nih.gov/ij/ ) aufgezeichnet. Bei UVA-bestrahlten OUMS-36-Zellen in RW traten Kernkondensation (sogenannte Pyknose) und Fragmentierung (sogenannte Karyorrhexis) auf, in HW wasserstoffwasser jedoch kaum (Abbildung 8 ). Die HW-Gruppe zeigt eine höhere Proliferation von Zellen mit abgerundeter Morphologie in Fibroblasten und einer großen Morphologie und ist häufiger im Typ-I-Kollagen als diejenigen der RW-Gruppe.

Abbildung 8
Abbildung 8

Rekonstruktive Wirkung von HW wasserstoffwasser in UVA-bestrahlten OUMS-36-Zellen. 8a, b : Verteilungsexpressionen von Typ-I-Kollagen mit Immunfärbung (grün) in OUMS-36-Zellen, die mit UVA-Strahlen bestrahlt und mit RW bzw. HW wasserstoffwasser verabreicht wurden. 8 – b : Jede gelbe gestrichelte Linie zeigt kollagenreiche Regionen vom Typ I an. Abbildung 8 – c : Relative Fluoreszenzintensität, die mit ImageJ aufgezeichnet wurde, um die Pixelanzahl darzustellen. Es ist eine Typ-I-Kollagenfärbung auf OUMS-36-Zellen gezeigt, die mit UVA-Strahlen bestrahlt und mit RW bzw. HW wasserstoffwasser verabreicht wurden. 8 – d : Das Pseudofarbenmerkmal wurde unter Verwendung von ImageJ als eine Intensität aufgetragen, die dem Kollagenausstellungsgrad Typ I pro hundert Zellen (& mgr; m 2/100 Zellen) entspricht. Vergrößerung: × 200; Maßstabsbalken = 50 μm. T- Test des Schülers, *** p <0,001.

Proliferative Effekte der Nukleus-DAPI-Färbung auf UVA-bestrahlte normale humane dermale Fibroblasten OUMS-36, denen RW- bzw. HW-präpariertes Kulturmedium verabreicht wurde

Mit der Fluoreszenzmikroskopie kann der DAPI-Farbstoff durch UVA-Strahlen angeregt werden. Um die rekonstruktive Wirkung von wasserstoffwasser HW auf Typ-I-Kollagen durch Immunfärbung zu untersuchen, kontern wir Kerne auch mit einem DAPI-Farbstoff in UVA-bestrahlten OUMS-36-Zellen, um die Veränderungen zu beobachten, wenn OUMS-36-Zellen mit RW bzw. HW in vitro verabreicht wurden . Repräsentative Expression und relative Fluoreszenzintensität wurden mit dem ImageJ aufgezeichnet. Der erleichterte Effekt auf die Kernkondensation und -fragmentierung wurde für UVA-bestrahlte OUMS-36-Zellen in RW beobachtet, trat jedoch in wasserstoffwasser HW kaum auf, wie durch DAPI-Färbung wie das Ergebnis gezeigt, das durch Immunfärbung erhalten wurde ( 9 ). In 9c wurden die Grade der DAPI-Färbung auf HaCaT-Zellen, die mit UVA-Strahlen bestrahlt und mit RW bzw. wasserstoffwasser HW verabreicht wurden, geklärt.

Abbildung 9
abbildung9

Merkmale der Kern-DAPI-Färbung auf UVA-bestrahlten HaCaT-Zellen. 9 – a , – b : Verteilungsausdrücke von Nucleus-DAPI-Färbung (blau) in HaCaT-Zellen, die mit UVA-Strahlen bestrahlt und mit RW bzw. wasserstoffwasser HW verabreicht wurden. 9- c , -d : Die relative Fluoreszenzintensität und das Pseudofarbmerkmal für Typ-I-Kollagen wurden unter Verwendung von ImageJ aufgetragen. Vergrößerung: × 200; Maßstabsbalken = 200 μm. T- Test des Schülers, *** p <0,001.

ROS-Mengen in normalen humanen, von der Epidermis abgeleiteten Keratinozyten HaCaT, wie durch NBT-Assay quantifiziert

In HaCaT-Zellen wurden die intrazellulären ROS-Mengen in dem mit RW hergestellten Kulturmedium durch UVA-Bestrahlung in verschiedenen UVA-Strahlendosen erhöht, jedoch in dem mit wasserstoffwasser HW hergestellten Kulturmedium wiederhergestellt, wie durch NBT-Färbung für Superoxidanionenradikale gezeigt. Es wurde beobachtet, dass die Zellmorphologie bei wasserstoffwasser HW gesünder und weniger schädlich ist als bei RW ( 10 ). 10 -e zeigte, dass die dunkelblaue Farbe der NBT-Färbung in RW-verabreichten Zellen dichter war als in HW-verabreichten Zellen, was auf die intrazelluläre ROS-Repression in HW-verabreichten Zellen hinweist.

Abbildung 10
abbildung10

Intrazelluläre ROS-Mengen in HaCaT-Zellen, wie durch NBT-Assay quantifiziert. 10- a , -b : Die beibehaltene Zellmorphologie und die verringerte ROS wurden in HW-hergestelltem Kulturmedium zum Vergleich mit RW gezeigt. Gelbe gestrichelte Linien zeigen häufig vorkommende dunkelblaue Farbstoffe an, bei denen festgestellt wurde, dass ROS wie Superoxidanionenradikale mit NBT-Färbung reagieren. Abbildungen 10 – c , – d : Die Ausdrücke des Oberflächenplotters von ImageJ. 10 – e : Die von ImageJ erhaltenen mittleren Grauwerte, die verwendet wurden, um die Zunahme oder Abnahme von Superoxidanionenradikalen in normalen von der menschlichen Epidermis abgeleiteten Keratinozyten HaCaT gemäß NBT-Färbung auszudrücken. Im Detail zeigt die vertikale Achse die Helligkeit, die als mittlerer Grauwert dargestellt wird, der als Index zur Anzeige der zellulären Fleckintensität und zur Angabe der ROS-Mengen betrachtet wird. Die Zellmorphologien von RW und wasserstoffwasser HW wurden in die acht Regionen unterteilt und dann mit ihren mittleren Grauwerten durch Student- t- Test verglichen (** p <0,01). Vergrößerung: × 200; Maßstabsbalken = 100 μm.

Erhöhung der Lebensfähigkeit der Zellen durch vorbestrahlte Verabreichung von in Wasserstoff gelöstem Wasser an UVA-bestrahlte HaCaT-Zellen, wie durch einen auf Mitochondriendehydrogenase basierenden WST-1-Assay bewertet

In HaCaT-Zellen war die Lebensfähigkeit der Zellen in dem mit wasserstoffwasser HW präparierten Kulturmedium durch UVA-Bestrahlung offensichtlich erhöht, verglichen mit dem mit RW präparierten Kulturmedium durch WST-1-Assay ( 11 -d). Es wurde auch beobachtet, dass die Zellmorphologie im Hinblick auf verschiedene Symptome wie Zellschrumpfung, Kernkondensation und Zellfragmentierung für wasserstoffwasser HW weniger anfällig ist als für RW ( 11 -b, -c). Die HW-Gruppe zeigte eine höhere Proliferation von Zellen mit gerundeter Morphologie und großer Morphologie in HaCaT-Zellen als diejenigen der RW-Gruppe. Alle diese Beweise sagten voraus, dass in Wasserstoff gelöstes Wasser zytoprotektive Wirkungen gegen UVA-Strahlen auf HaCaT-Zellen ausüben könnte.

Abbildung 11
abbildung11

Ergebnisse der Zelllebensfähigkeit von HaCaT-Zellen, wie durch WST-1-Assay bewertet. Abbildung 11 – a : HaCaT-Zellen sind im nicht verabreichten oder nicht mit UVA bestrahlten Zustand dargestellt. Abbildungen 11 – b , – c : Die morphologischen Merkmale von HaCaT-Zellen sind nach Bestrahlung mit UVA-Strahlen in RW bzw. wasserstoffwasser HW dargestellt. 11 – d : Die Lebensfähigkeit der Zellen ist für HaCaT-Zellen nach UVA-Bestrahlung durch WST-1-Assay gezeigt. Vergrößerung: × 400; Maßstabsbalken = 100 μm. T- Test des Schülers, ** p <0,01.

Diskussion

Der Zweck der vorliegenden Studie war es, die klinische Wirksamkeit der Wundheilung für PU unter Verwendung der HW-Aufnahme über TF zu untersuchen. Wir haben die Hypothese aufgestellt, dass die routinemäßige Behandlung in Kombination mit der HW-Aufnahme bei PU-Patienten die Wundheilung verbessern und für sie einen gesünderen Zustand aufrechterhalten kann. Darüber hinaus wurden normale humane dermale Fibroblasten OUMS-36 und normale humane von der Epidermis abgeleitete Keratinozyten HaCaT untersucht, um die Mechanismen zu untersuchen, die durch In-vitro- Experimente zu untersuchen, ob Wasserstoff eine Rolle bei der Wundheilung bei Aspekten von Cutis-Gewebe spielt.

Unsere klinischen Ergebnisse scheinen darauf hinzudeuten, dass die HW-Aufnahme über TF ein wirksames Mittel zur Wundheilung von PU-Patienten ist, die an einer Essstörung litten. Trotz der Einschränkungen, die durch die Durchführung unserer klinischen Intervention für PU verursacht wurden, konnten wir die verbesserten Ergebnisse an Tagen im Krankenhaus, bei der Wundgröße und anderen klinischen Indikatoren durch Vergleich von EG mit LG erzielen. Daher haben wir geschätzt, dass das vom Magen-Darm-Trakt aufgenommene wasserstoffwasser HW eine wichtige Rolle bei der Reduzierung des oxidativen Stresses, der extrazellulären Matrixrekonstitution und der entzündungshemmenden Wirkung spielt. Mehrere Experimente haben unsere Überlegungen wie folgt gestützt.

Zunächst konnte gezeigt werden, dass molekulares Wasserstoffgas (H 2 ) den Magen-Darm-Trakt günstig beeinflusst [ 29 ]. Kajiya et al. ein Mausmodell für entzündliche Darmerkrankungen beim Menschen (IBD) durch Zufuhr von Trinkwasser an Mäuse, das a) 5% Dextran-Natriumsulfat (DSS), b) 5% DSS und H 2 oder c) H 2 nur ad libitum bis zu 7 enthielt Tage. Sie fanden heraus, dass an Tag 7 DSS-induzierte pathogene Ergebnisse, einschließlich erhöhter Spiegel von IL-12, TNF- & agr; und IL-1 & bgr; in Kolonläsionen usw., durch Zugabe von H 2 zu DSS-Lösung signifikant unterdrückt wurden. Daraus wurde der Schluss gezogen, dass H 2 in vivo einen entzündungshemmenden Einfluss auf den Magen-Darm-Trakt haben kann [ 30 ].

Zweitens haben Nakashima-Kamimura et al. Untersucht wurde, ob Trinkwasser, das den gesättigten gelösten Wasserstoff enthält (HW: 0,8 mM H 2 in Wasser), durch Untersuchung der Auswirkungen von oxidativem Stress, Mortalität und Körpergewichtsverlust sowie der Serumkreatinin- und Blutharnstoff-Stickstoff- (BUN-) Werte anwendbar ist . In In-vivo- Experimenten zeigten ihre Ergebnisse, dass Wasserstoff im Blut nachgewiesen wurde, wenn wasserstoffwasserHW über eine Sonde in einer Dosis von 15 ml / kg in den Magen einer Ratte gegeben wurde, und HW zur Linderung von nephrotoxischen Nebenwirkungen angewendet werden kann, die durch ein Anti-Agens hervorgerufen wurden Krebsmedikament wie Cisplatin [ 31 ].

Drittens können Cardinal et al. testete die Wirkung der Behandlung mit wasserstoffwasser HW in einem Rattenmodell der Nierentransplantation. Infolgedessen verbesserte die Behandlung mit wasserstoffwasser HW die Allotransplantatfunktion, verlangsamte das Fortschreiten der chronischen Allotransplantat-Nephropathie (CAN), verringerte die Oxidationsmittelverletzung und die Produktion entzündlicher Mediatoren und verbesserte das Gesamtüberleben. Ihre Schlussfolgerung war, dass wasserstoffwasser HW in vivo ein wirksames Antioxidans und entzündungshemmendes Mittel ist [ 32 ].

Es wurde zuvor gezeigt, dass einige freie Radikale den Wundheilungsprozess hemmen [ 33 ]. 2 ist ein farbloses, geruchloses, geschmackloses Gas und besitzt eine gewisse Peroxidationsreduzierbarkeit. 2 kann leicht durch die Dünndarmzotten in das Innere des menschlichen Körpers und in die Blutbahn gelangen [ 15 ], da sein Molekulargewicht die kleinste aller Molekülspezies ist und es gasförmige und elektrisch neutrale Eigenschaften aufweist eine starke Diffusionskapazität. Darüber hinaus hat H 2 möglicherweise seine speziellen Kanäle für den Transport in den intrazellulären Raum, wie die Aquaporine (AQPs) für Wasser, insbesondere wasserstoffhaltiges Wasser, und die Rhesus (Rh) -Proteine ​​[ 34 ].

In Verbindung mit dem Körper selbst und der Anwesenheit von enterogenem H 2 aufgrund spezifizierter Darmbakterien kann die HW-Aufnahme über TF eine wichtige Rolle bei der Verbesserung der Bildung von Wundgranulaten an aufgelösten Nekroseorten und der Fähigkeit spielen, ein Anti- entzündliche Wirkung durch einen ROS-Reduktionsmechanismus.

Zusätzlich sollte darauf hingewiesen werden, dass apoptotische Zellen die Proliferation, Wundheilung und Geweberegeneration stimulieren können [ 35 ]. Wir konzentrieren uns auf die „Apoptose-induzierte kompensatorische Proliferation“, die bei PU auftritt [ 36 ]. Im Allgemeinen hat Nekrose eine Auswirkung auf die sekundär letale Schädigung der die Wunde umgebenden PU-Zellen durch Schwellung und Platzen der Zellen. Im Gegensatz dazu werden Zelltrümmer, die durch Zellschrumpfung und -fragmentierung bei der Apoptose verursacht werden, bei der Karyorrhexis ( dh Kernfragmentierung) und Pyknose ( dh Kernkondensation) als frühes Ereignis aufgedeckt werden, von beiden wandernden professionellen Phagozyten ( zB Makrophagen) einer Endozytose unterzogen und Langerhans-Zellen in der Epidermis) und den umgebenden nichtprofessionellen Phagozyten. Es wird daher angenommen, dass “die kompensatorische Proliferation” induziert wird, weil Zelltrümmer friedlich gehandhabt werden, um die umgebenden Zellen innerhalb eines minimalen, sich verschlechternden Einflusses zurückzuhalten. Bei dieser Gelegenheit kann ROS durch das Wasserstoffwasser unterdrückt werden, um eine Apoptose sanfter hervorzurufen, und in der Folge stimuliert die Apoptose, die in den die Wunde umgebenden Zellen von PU verursacht wird, die kompensatorische Proliferation, um zu einer frühen Heilung zu führen. In der Tat haben Cai JM et al. berichteten, dass eine Inhalation mit 2% Wasserstoffgas, die an ein Rattenmodell mit neonataler Hypoxie und Ischämie verabreicht wurde, die Apoptose verringern könnte [ 37 ].

Durch die Kombination der HW-Zufuhr über TF mit routinemäßigen Pflegebehandlungen kann der Wundheilungsprozess deutlich beschleunigt werden. Daher besitzt der wirksame Mechanismus von HW wasserstoffwasser mindestens zwei mögliche Wege, zum einen eine antioxidative Wirkung und zum anderen eine entzündungshemmende Wirkung. Darüber hinaus dachten wir, dass HW wasserstoffwasser zusätzliche Effekte haben könnte, dh die Rekonstruktion von Kollagen und Zytoprotektion für andere dermale sowie epidermale Zellen. Daher führten wir ein In-vitro- Experiment mit normalen humanen dermalen Fibroblasten OUMS-36 und normalen humanen, von der Epidermis abgeleiteten Keratinozyten HaCaT durch, um deren Wechselwirkung zu untersuchen. Daher wurden entweder dermale oder epidermale Zellen in HW- oder RW-hergestelltem Medium kultiviert. Immunostain wurde zur Beobachtung der Typ-I-Kollagenrekonstruktion in OUMS-36-Zellen verwendet und zeigte die fördernde Wirkung. Die Lebensfähigkeit der HaCaT-Zellen wurde im Hinblick auf die zellmorphologische Beobachtung und den WST-1-Assay untersucht, und ihr erzeugter ROS, insbesondere die Superoxid-Zwiebel-Radialwerte, wurden durch einen NBT-Assay gemessen, wobei alle die Zelltod-Unterdrückung und den ROS zeigten ausräumende Effekte.

Wir haben versucht, die Abbildungen für die Annahme eines Heilungsmechanismus vom Stadium III bis zur Wundheilung während der PU zu zeichnen (Abbildung 12 ).

Abbildung 12
Abbildung 12

Mechanismus zur Wundheilung von Dekubitus durch in Wasserstoff gelöstes Wasser. Wir sagen voraus, dass ROS zu einem Dekubitus führen kann, und der verursachende Prozess ist in der linken Abbildung dargestellt. Zuallererst erzeugen so unterschiedliche Faktoren wie das bettlägerige Syndrom, der mechanische Druck und die lokale Ischämie eine ROS, die in Kombination mit anderen pathologischen Faktoren Nekrose und Apoptose verursacht und möglicherweise zu Wunden und Gewebedefekten des Dekubitus führt. Andererseits zeigt die rechte Abbildung den Heilungsmechanismus. Die orale Aufnahme von Nano-Bubble-Wasserstoffwasser über Trink- oder Sondennahrung erfolgt über den Mund oder die Speiseröhre und wird von den Epithelzellen des Dünndarms absorbiert. Es ist möglich, dass Wasserstoffgas aus wasserstoffwasser HW in die Vergangenheit gelangt und von der Lunge eingeatmet wird. Dann wandert der absorbierte Nano-Blasen-Wasserstoff durch die Blutzirkulation in das Cutis-Gewebe und fängt ROS ab, das reichlich in PU erzeugt wird. Schließlich führt dieser Prozess zur Kollagenrekonstruktion von Fibroblasten in der Dermis und zur Proliferation von Keratinozyten in der Epidermis und verursacht Angiogenese und Remodelling für Reparaturen im defekten Gewebe.

Folglich zeigten unsere In-vitro- Daten, dass die intrazelluläre ROS bei UVA-bestrahlten OUMS-36-Fibroblasten durch HW, aber nicht durch RW verringert wurde. Kernkondensation und -fragmentierung traten bei UVA-bestrahlten OUMS-36-Zellen in RW auf, in HW wasserstoffwasser jedoch kaum, wie durch DAPI-Färbung gezeigt wurde. Außerdem war in HaCaT-Zellen die mitochondriale Dehydrogenase-, insbesondere die Succinat-Dehydrogenase-Aktivität in mit UVA-Strahlung hergestelltem Kulturmedium vermindert, wurde jedoch in mit wasserstoffwasser HW hergestelltem Kulturmedium beibehalten, wie durch NBT- und WST-1-Assay gezeigt. Daher wurde vorgeschlagen, dass UVA-induzierte ROS, insbesondere Singulett-Sauerstoff- und Superoxid-Zwiebelradikale, durch Wasserstoff abgefangen werden und zu einem Zytoprotektor gegen ROS-induzierte mitochondriale Dysfunktion führen.

Ähnliche Ergebnisse wurden aus früheren Forschungsarbeiten zur Rekonstruktion von Kollagen in anderen dermalen oder epidermalen Zellen durch HW wasserstoffwasser berichtet [ 38 , 39 ]. Als Mechanismus für die Verwendung von HW  wasserstoffwasserzur Behandlung von PU unter Aspekten dermaler und epidermaler Zellen betrachten wir drei Wege: (1) die Förderung der Bildung der Dermisstruktur sowie die Rekonstruktion von Typ-I-Kollagen, (2 ) die Verhinderung der Bildung von Wundkörnern an aufgelösten Nekroseorten und (3) die Reparatur und Wiederherstellung von Narbengeweben.

Heilungseffekte für PU-Patienten durch wasserstoffwasser HW-Einnahme über TF, wie sie in unserer vorliegenden Studie gezeigt wurden, wurden in der Vergangenheit kaum festgestellt. Unsere Erfahrungen in dieser Studie haben weitere Beweise für eine mögliche Rolle bei medizinischen Therapien für PU erbracht. Darüber hinaus gibt es bekanntlich verschiedene Methoden zur Herstellung des Wasserstoffwassers durch verschiedene Forschungsgruppen, so dass es auch unterschiedliche Wasserparameter für HW wasserstoffwassergibt. Um unsere Daten zu zeigen, die aus Messungen mit den verschiedenen Verdünnungsverhältnissen erhalten wurden, haben wir die Abbildungen 1 und 2 sowie Tabelle 2 speziell zusammengestellt, um diese Ergebnisse zu präsentieren. Die Herstellung von HW wasserstoffwasserund RW ist eine wichtige und wesentliche Angelegenheit auf dem Gebiet der Wasserstoffwassermedizin.

Diese Studie weist jedoch einige Einschränkungen auf, die bei der Interpretation der Ergebnisse berücksichtigt werden sollten. Erstens konnte das Studiendesign nicht als randomisierter Kontrollpfad (randomized control trail, RCT) durchgeführt werden, da der klinische Interventionstest mit PU-Heilung im Allgemeinen nicht als RCT ausgeführt werden kann, da andere verschiedene Faktoren wie das Auftreten und die Komplikation verschiedener Krankheiten vorliegen. Die klinische Situation erlaubte es uns nicht, klinische Daten vor der von uns geplanten zu erhalten. Zweitens konnten wir die Studie nicht darauf ausrichten, die Ergebnisse sowohl der oralen wasserstoffwasser HW-Aufnahme als auch des externen Waschens von schädlichen Stellen mit wasserstoffwasserHW zu vergleichen. Diese verdienen die nächste Studie.

Schlussfolgerungen

Es wurde gezeigt, dass die HW-Aufnahme über TF bei schwer hospitalisierten älteren Patienten mit PU eine Verringerung der Wundgröße und eine frühe Genesung bewirkt, die beide auf die Kollagenkonstruktion vom Typ I bei dermalen Fibroblasten oder auf die gesteigerte Fähigkeit zur Reduktion der Mitochondrien und die ROS-Unterdrückung bei epidermalen Patienten zurückzuführen sind Keratinozyten, wie durch Immunfärbung, NBT- bzw. WST-1-Assays gezeigt.

Zustimmung

Die schriftlichen Einverständnisse, die von den Patienten zur Veröffentlichung dieses Berichts und der dazugehörigen Bilder vorgelegt wurden, wurden vom Ethikausschuss des Kobayashi-Krankenhauses in Fukuyama, Präfektur Hiroshima, Japan, eingeholt und als ethische Freigabe bestätigt.

Wasserstoff-Wasser-Aufnahme über Sondenernährung für Patienten mit Dekubitus und seine rekonstruktiven Wirkungenauf normale menschliche Hautzellen in vitro

wir empfehlen AlkaViva H2 Wasserionisierer /WASSERSTOFFGENERATOREN

SEHEN SIE ALLE WASSERIONISATOREN – MOLEKULARE WASSERSTOFFGENERATOREN

Verweise

Danksagung

Die Autoren danken dem Kobayashi Hospital und dem stellvertretenden Direktor Dr. Yoshizi Kobayashi für ihre engagierte Unterstützung für einen Teil der klinischen Studie. Diese Studie wurde zum Teil durch Zuschüsse von JCAAMS (Japanisches Zentrum für Anti-Aging-Wissenschaften in Hiroshima) unterstützt.

Informationen zum Autor

Korrespondenz mit Nobuhiko Miwa .

Zusätzliche Information

Konkurrierende Interessen

Die Autoren erklären, dass sie keine konkurrierenden Interessen haben.

Autorenbeiträge

Durchführung und Konzeption der Experimente: QL NM. Experimente durchgeführt: DM SK QL. Analysierte die Daten: QL NM. Mitwirkende Geräte / Reagenzien / Materialien: DM HT NM. Schrieb das Manuskript: QL NM. Alle Autoren haben das endgültige Manuskript gelesen und genehmigt.

Von den Autoren eingereichte Originaldateien für Bilder

Unten finden Sie die Links zu den ursprünglich eingereichten Dateien der Autoren für Bilder.

Originaldatei der Autoren für Abbildung 1

Originaldatei der Autoren für Abbildung 2

Originaldatei der Autoren für Abbildung 3

Originaldatei der Autoren zu Abbildung 4

Originaldatei der Autoren zu Abbildung 5

Originaldatei der Autoren zu Abbildung 6

Originaldatei der Autoren zu Abbildung 7

Originaldatei der Autoren zu Abbildung 8

Originaldatei der Autoren für Abbildung 9

Originaldatei der Autoren für Abbildung 10

Originaldatei der Autoren für Abbildung 11

Originaldatei der Autoren für Abbildung 12

Originaldatei der Autoren zu Abbildung 13

Originaldatei der Autoren zu Abbildung 14

Originaldatei der Autoren für Abbildung 15

Rechte und Erlaubnisse

Nachdrucke und Genehmigungen

Über diesen Artikel

Schreibe einen Kommentar

Deine E-Mail-Adresse wird nicht veröffentlicht. Erforderliche Felder sind mit * markiert.

Diese Website verwendet Akismet, um Spam zu reduzieren. Erfahre mehr darüber, wie deine Kommentardaten verarbeitet werden.