EFECTOS DE BEBER AGUA HIDROGENADA EN HOMBRES CON RIESGO DE ENFERMEDAD ARTERIAL PERIFÉRICA: UN ENSAYO ALEATORIZADO CONTROLADO CON PLACEBO

Objetivos 

Se considera que el tabaquismo, la hipertensión, la hiperlipidemia y la diabetes invirtió la incidencia de enfermedad arterial periférica (EAP). Pueden activar radicales libres endógenos, causar inflamación y estrés oxidativo y provocar disfunción de las células endoteliales. Se ha demostrado que el hidrógeno (H 2 ) disminuye el estrés oxidativo, mejora la función celular y reduce la inflamación crónica. El propósito de esta investigación fue validar el papel del agua hidrogenada H 2 en individuos que están en riesgo de enfermedad arterial periférica PAD.

Métodos  Sesenta sujetos fueron asignados aleatoriamente a placebo (PBO) grupo o grupo agua  rico en hidrógeno H 2  (HRW) y bebieron o bien agua embotellada puro o agua hidrógenada H 2 (245 ml / hora, 3 veces / d) para la semana diez.

Resultados  La velocidad de la onda del pulso mejoró en el grupo de agua con hidrógeno HRW sin cambios significativos en el índice tobillo-brazo. El colesterol total en suero del grupo de agua con hidrógeno HRW se reduce significativamente en comparación con el grupo de placebo. Además, en comparación con la línea de base, los niveles de lipoproteína (a) disminuyeron, el contenido de malondialdehído se redujo, la actividad superóxido dismutasaagua hidrógenada HRW. El nivel de fosfolípido oxidado de 1-palmitoil-2-azelaoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina en el grupo de agua con hidrógeno HRW se redujo significativamente en comparación con el grupo de placebo. Finalmente, agua hidrogenada H 2 mejoró significativamente las capacidades antioxidantes, antiinflamatorias y antiapoptóticas de las lipoproteínas de alta densidad (HDL).

Conclusiones  Beber agua hidrogenada HRW puede mejorar los indicadores de esclerosis vascular, mejorar la dislipidemia, reducir el estrés oxidativo vascular y la inflamación y mejorar la función de las HDL. El agua hidrogenada H 2  puede usarse para prevenir y aliviar la PAD causada por factores de riesgo importantes como el tabaquismo, la hipertensión, la hiperlipidemia y la diabetes.

Cifras

Figura 1

Figures

Figure 1

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Figure 2

Figure 2

Figure 3

Introducción

Las enfermedades ateroscleróticas, incluida la enfermedad arterial periférica (EAP), la enfermedad de las arterias coronarias y la enfermedad de las arterias cerebrales, son las principales causas de muerte en todo el mundo. La EAP es un estrechamiento anormal de las arterias e incluye principalmente enfermedad de los segmentos arteriales aortoilíaco, femoropoplíteo e infrapoplíteo. Las manifestaciones sintomáticas de la EAP incluyen dolor en las piernas, claudicación intermitente, dolor en reposo, gangrena cuando la extremidad está severamente isquémica e incluso amputación 1 . Actualmente, hay más de 202 millones de pacientes con EAP en todo el mundo y se prevé que hasta 45 millones de pacientes con EAP mueran por enfermedad coronaria o cerebrovascular durante un período de 10 años 2. El tabaquismo, la hipertensión, la hipercolesterolemia y la diabetes son los cuatro principales factores de riesgo de la EAP  3. El tabaquismo es un factor de riesgo particularmente fuerte de EAP con una obvia relación dosis-respuesta, y los fumadores empedernidos tienen cuatro veces más probabilidades de desarrollar EAP que los no fumadores 4 . La diabetes, la hipertensión y la hipercolesterolemia también están muy asociadas con la EAP, con un riesgo aproximadamente de dos a tres veces mayor. La incidencia de PAD también aumenta con los 5 , 6 años .

El ejercicio planificado y las mejoras en el estilo de vida son formas prácticas de reducir el riesgo y retrasar el progreso de la EAP. Actualmente, la EAP se trata principalmente con terapia antiplaquetaria, terapia anticoagulante, estatinas, terapia antihipertensiva y medicamentos para mejorar el flujo circulatorio 7 . Estas terapias están dirigidas principalmente a la causa de la EAP y se aplican a pacientes con EAP sintomática; sin embargo, estos fármacos suelen ir acompañados de efectos secundarios. En la actualidad, 17β-estradiol  8 , ginsenósido Rb3 9 , Relaxina-2 humana recombinante 10  y principios activos del vino tinto  11 han demostrado ser prometedores para mejorar el daño vascular causado por el tabaquismo. Sin embargo, sus efectos curativos tienen ciertas limitaciones. Los pacientes con síntomas típicos de EAP representan solo el 20% y aproximadamente el 50% de los pacientes son asintomáticos 12 . Las personas generalmente desconocen el diagnóstico y el tratamiento de la EAP y es poco probable que elijan un tratamiento a largo plazo para retrasar la progresión de la EAP. Por tanto, para los pacientes asintomáticos con EAP, es de gran importancia elegir un tratamiento seguro y sin efectos secundarios para prevenir y aliviar la progresión de la enfermedad.

El hidrógeno (H 2 ) es un gas bioactivo que tiene efectos beneficiosos en enfermedades como el síndrome metabólico  13 , 14 , la diabetes tipo 2  15 , la inflamación crónica del hígado  16  y la lesión focal del cerebro y la isquemia / reperfusión  17 . cuyos mecanismos se creen que están relacionados con sus propiedades antioxidantes, antiinflamatorias y antiapoptóticas . Además, se ha demostrado previamente que el H 2  tiene un efecto protector sobre las células endoteliales. De hecho, un informe anterior mostró que H 2-El agua saturada podría promover la recuperación de la perfusión sanguínea en un modelo de PAD de ratón aumentando la angiogénesis y disminuyendo el nivel de estrés oxidativo  18 . Sin embargo,  aún no se ha demostrado el efecto del H 2 en personas con riesgo de EAP.

En este estudio, se realizó un ensayo aleatorizado y controladora con placebo para caracterizar el efecto de H 2 beber agua rica en el PAD en los hombres en riesgo de PAD, y sus efectos sobre el estrés oxidativo y factores inflamatorios. Este es el primer ensayo controlado aleatorizado de H 2  en riesgo de PAD.

Resultados

Características basales del sujeto

El Proceso de Selección se Muestra en la Fig.  1 . 59 sujetos participantes en el estudio, y un sujeto se retiró en la semana 10 debido a su trabajo al aire libre. Los indicadores clínicos de referencia específicos se muestran en la Tabla  1 . Los sujetos del estudio se dividieron en el grupo de placebo (PBO) o el H 2 grupo rico en agua (HRW) al azar. El estudio somete cada bebió tres botellas de agua placebo o H 2 agua rica en (245 ml / botella) por día durante 10 semanas. Se recolectaron muestras de sangre al comienzo y después de la prueba de 10 semanas.

tabla 1

Nivel de referencia de información general de los dos grupos.

VARIABLE PBO (N = 29) HRW (N = 30) VALOR P
NÚMERO DE CASOS (PORCENTAJE) NÚMERO DE CASOS (PORCENTAJE)
Edad 0,31
40–55 16 (53,3%) 12 (40%)
55–65 9 (30%) 11 (36,6%)
≥ 65 5 (16,6%) 7 (23,3%)
IMC 0,79
27-29,9 10 (33,3%) 11 (36,6%)
≥ 30 20 (66,6%) 19 (63,3%)
Beber alcohol 0,61
Un menudo 16 (53,3%) 18 (60%)
de vez en cuando 8 (26,6%) 7 (23,3%)
No 6 (20%) 5 (16,6%)
Actividad 0,66
Un menudo 15 (50%) 16 (53,3%)
de vez en cuando 9 (30%) 10 (33,3%)
No 6 (20%) 4 (13,3%)
Índice de tabaquismo 0,12
<400 4 (13,3%) 9 (30%)
≥ 400 26 (86,6%) 21 (70%)
Condición de la enfermedad
hipertensión 10 9
Diabetes 14 12
Hiperlipidemia 8 8
Presión arterial sistólica 0,19
<140 16 (53,3%) 21 (70%)
≥ 140 14 (46,6%) 9 (30%)
Presión arterial diastólica 0,10
<90 17 (56,6%) 23 (76,6%)
≥ 90 13 (43,3%) 7 (23,3%)
HRW, H 2 grupo de agua rica en. PBO, grupo placebo. IMC, índice de masa corporal.

 

Breath hidrógeno administración siguiente de H 2 agua rica en

Como se Muestra en la Fig.  2 , Despues de beber H 2 rica en agua (650-700 mol / L, 245 ml), la exhalado H 2  Concentración Aumentó rapidamente en el transcurso de 5 min y Alcanzó el pico en el décimo min , con una valor de aproximadamente 7 ppm. Posteriormente, la concentración disminuyó gradualmente y volvió a la línea de base en el minuto 60. No hubo diferencias significativas entre los resultados de hombres y mujeres (datos no mostrados).

Efecto de H 2  en PWV y ABI

Tabla  2  representa los cambios en ABI y la VOP después de 10 semanas de H 2 intervención agua rica en. El valor bajo del ITB (el valor mínimo del ITB medido de las extremidades inferiores izquierda y derecha) y el ITB de las extremidades inferiores izquierda y derecha no fueron significativamente diferentes entre el grupo HRW y el grupo PBO). El bajo valor de VOP (el valor mínimo de la VOP medido de la izquierda y las extremidades derecha inferior) y la VOP de la extremidad inferior izquierda disminuyeron significativamente después de beber H 2 rica en agua (P <0,05). El VOP de la extremidad inferior derecha también mostró una tendencia a la disminución después de beber H 2 agua rica en (P> 0,05).

Tabla 2

Efecto de H2 en PWV y ABI

LA MEDIDA GRUPO HRW PAG GRUPO PBO PAG §
0 SEMANAS 10 SEMANAS 0 SEMANAS 10 SEMANAS
ITB del miembro inferior izquierdo 1,17 ± 0,10 1,22 ± 0,14 0,08 1,17 ± 0,11 0,16 ± 0,14 0,90 0,21
ITB del miembro inferior derecho 1,11 ± 0,11 1,16 ± 0,15 0,11 1,15 ± 0,15  1,14 ± 0,17 0,64  0,72
ABI valor bajo 1,10 ± 0,12 1,12 ± 0,16 0,47 1,14 ± 0,10  1,11 ± 0,17 0,98  0,55
PWV izquierda, cm / s 1583,5 ± 269,90 1430,16 ± 228,53 0,01 * 1421 ± 412  1520 ± 315   0,19  0,39 
PWV derecha, cm / s 1561,13 ± 272,93 1502,53 ± 258,41 0,17 1439 ± 421  1454 ± 313,5  0,08  0,79 
Valor bajo de PWV, cm / s 1583,5 ± 269,90 1391,56 ± 201,88 0,0004 * 1427 ± 326  1386 ± 267,5  0,56  0,50 
§ representa la comparación de 10 semanas entre el grupo de agua rica en hidrógeno y el grupo de placebo.   Los datos no normales se representan mediante la mediana y el rango intercuartílico y los resultados permanecen se muestran como media ± DE.  El análisis estadístico se realizó mediante pruebas no paramétricas para datos no paramétricos y la prueba t de Student para datos distribuidos normalmente. * P <0,05.

 

Efecto del H 2  sobre los perfiles lipídicos

Después de 10 semanas de intervención, el nivel de CT en el grupo HRW fue significativamente más bajo que en el grupo PBO (P <0.05, Tabla  3 ). Los niveles séricos de Lp (a) disminuyeron significativamente después de 10 semanas de tratamiento con H2 en el grupo HRW (P <0,05, Tabla  3 ). Además, los niveles de TG, VLDL y LDL-C muestran una ligera tendencia a la disminución en el grupo HRW después de 10 semanas de intervención en comparación con el grupo HRW antes de la intervención o el grupo PBO (Tabla  3 ). No se observaron cambios obvios en los niveles de Apo AⅠ, Apo B y HDL-C (Tabla  3 ).

Tabla 3

Efecto del H2 sobre los perfiles lipídicos, biomarcadores oxidativos e inflamatorios

LA MEDIDA GRUPO HRW PAG GRUPO PBO PAG §
0 SEMANAS 10 SEMANAS 0 SEMANAS 10 SEMANAS
TC, mmol / L 5,24 ± 1,21 5,34 ± 0,82  0,82  5,39 ± 0,77 5,69 ± 0,84 0,004 * 0.047 *
TG, mmol / L 1,19 ± 0,64  1,53 ± 1,18  0,22  1,30 ± 0,65  1,42 ± 0,64  0,82  0,43 
Lp (a), mg / L 2,06 ± 0,50 1,98 ± 0,54 0,01 * 1,98 ± 0,36 1,99 ± 0,38 0,50 0,55
LDL-C, mmol / L 1,21 ± 0,27 1,23 ± 0,27 0,70 1,22 ± 0,20 1,24 ± 0,21 0,27 0,72
VLDL, mmol / L 0,85 ± 0,43  0,86 ± 0,23 0,22   0,83 ± 0,3  0,86 ± 0,30 0,79  0,98
HDL-C (mmol / L) 1,44 ± 0,32 1,41 ± 0,35 0,70 1,30 ± 0,28 1,32 ± 0,28 0,72 0,95
ApoB, g / L 1,24 ± 0,21 1,24 ± 0,21 1,00 1,22 ± 0,20  1,23 ± 0,24  0,72  0,90 
ApoAⅠ, g / L 1,48 ± 0,23 1,43 ± 0,21 0,34 1,38 ± 0,33  1,46 ± 0,27 0,85  0,60
MDA, mmol / L 3,93 ± 1,68 3,12 ± 0,69 0,03 * 3,38 ± 1,39 3,32 ± 0,85 0,86 0,98
Actividad de SOD, U / mL 12,47 ± 1,84 13,39 ± 0,88  0,002 *   12,71 ± 1,84   12,98 ± 1,91  0,06  0,44 
PAZPC, área de pico relativa —— 0,08 ± 0,02 —— —— 0,09 ± 0,03 —— 0,04
PGPC, área de pico relativa —— 0,05 ± 0,02 —— —— 0,06 ± 0,02 —— 0,27
PONPC, área de pico relativa —— 0,0056 ± 0,0004 —— —— 0,0059 ± 0,0008  —— 0,09 
POVPC, área de pico relativa —— 0,0045 ± 0,002 —— —— 0,0046 ± 0,001 —— 0,85
ICAM-1, pg / ml 5,32 ± 0,39 5,30 ± 0,37 0,003 * 5,11 ± 0,85  5,10 ± 0,83  0,16  0,42 
MMP-1, pg / ml 2,67 ± 0,32 2,66 ± 0,30 0,82 2,69 ± 0,31 2,64 ± 0,27 0,35 0,85
CCL1, pg / mL 1,35 ± 0,35  1,49 ± 0,25  0,19  1,48 ± 0,20  1,35 ± 0,35  0,33  0,26 
§ representa la comparación entre el grupo de agua rica en hidrógeno y el grupo de placebo a las 10 semanas. * P <0,05.  Los datos no normales se representan mediante la mediana y el rango intercuartílico y los resultados permanecen se muestran como media ± DE.  El análisis estadístico se realizó mediante pruebas no paramétricas para datos no paramétricos y la prueba t de Student para datos distribuidos normalmente.

 

Efecto del H 2  sobre biomarcadores oxidativos e inflamatorios

Los niveles séricos de MDA disminuyeron y la actividad de SOD aumentó en el grupo HRW después de 10 semanas de intervención (P <0.05, Tabla  3 ). Los niveles de fosfolípidos oxidados también disminuyeron, especialmente PAzPC (P <0.05, Tabla  3 ). El grupo de HRW demostró una atenuación significativa del biomarcador inflamatorio de ICAM-1 (P <0,05, Tabla  3 ). La concentración de MMP-1 y CCL1 no fue significativamente diferente después de la intervención (Tabla  3 ).

El H 2  mejora la oxidación y las propiedades funcionales de las HDL

2  redujo sustancialmente sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico generados por la oxidación de LDL (Fig.  3 A), lo que indica que H 2  puede mejorar HDL función antioxidante. Detectamos la viabilidad celular por CCK-8 para verificar la función antiapoptótica de las HDL después de la  intervención con H2 . Encontramos que el H 2  inhibía la apoptosis de células endoteliales inducidas por ox-LDL (Fig.  3 B). Ox-LDL puede inducir a las HUVEC a aumentar la adhesión de los monocitos a las células endoteliales.Tras la incubación con HDL, se encontró que la adhesión de los monocitos en el grupo HRW se redujo significativamente después de H 2  intervención (Fig.  3 C), mostrando que H 2  puede mejorar el efecto antiinflamatorio de las HDL.

Discusión

Realizamos un ensayo aleatorizado controlado con placebo y descubrimos que el H 2  puede aliviar la esclerosis vascular, regular el trastorno del metabolismo de los lípidos, mejorar la capacidad antioxidante y reducir la inflamación en personas con riesgo de EAP. Dado que la lesión por isquemia / reperfusión que se produce durante la EAP se acompaña de un aumento en la formación de especies reactivas de oxígeno (ROS), la terapia antioxidante puede ser una contramedida viable  19 . Se ha demostrado que el H 2 , como un antioxidante novedoso, tiene funciones en diversas enfermedades, y un informe anterior ha demostrado el efecto terapéutico del H 2  en la PAD en ratones  18. Por lo tanto, es importante verificar aún más el efecto del H 2  en pacientes con EAP.

Se midió el H 2  concentración en el gas exhalado de pacientes con el fin de estudiar la  vivo en  la cinética de H 2  después de beber H 2 rica en agua. Nuestros resultados demostraron que el H 2 tardó 10 minutos  en alcanzar el pico y regresó gradualmente a la línea de base en 60 minutos. Estos resultados fueron consistentes con los informes anteriores que experimentaron que la respiración H 2  alcanza el máximo de 10-15 minutos después de la ingesta, y luego disminuyen gradualmente, volviendo a los niveles de referencia 45-150 min después de beber H 2 agua rica en 20 – 22. La concentración máxima en el estudio actual fue de aproximadamente 7 ppm después de beber 245 ml de H 2 -agua rica; Esto Es Más Baja Que los Informes Previos Que encontraron Niveles de Hidrógeno pico aliento de 30-60 ppm Despues de beber 200-300 ml de H 2 Agua Rica en 20 – 22 .

La VOP y la LCA son cada vez más importantes en la evaluación de la rigidez arterial. El ABI se refiere a la relación de presión entre la parte superior del brazo izquierdo y derecho y los tobillos izquierdo y derecho, y tiene un rango normal de 1,0 a 1,4. La VOP es la medida de rigidez arterial más usada, y un aumento en la velocidad de propagación de la VOP en la arteria se asocia con un aumento de la rigidez arterial. La velocidad de conducción fluctuante entre dos latidos se utiliza para juzgar la elasticidad de la pared arterial 23 . La VOP normal es menor de 1400 cm / s, y nuestro estudio mostró que el H 2  tuvo un impacto significativo en la VOP después de una intervención de 10 semanas.

El efecto de reducción de lípidos de H 2 agua rica en ha sido verificada en pacientes con el síndrome de potencial metabólico  24 . En nuestro estudio, el nivel de TC fue menor en el grupo de HRW que el grupo PBO, y el de 10 semanas H 2  intervención redujo (a) Nivel de la Lp en individuos en riesgo de PAD. Además, nuestro estudio anterior también mostró el efecto reductor de H 2 agua rica en el TC en pacientes con síndrome metabólico potencial o hipercolesterolemia  13 , 25 . Además, los estudios han demostrado que los niveles de CT en suero se redujeron de manera significativa en el hígado graso inducido por etanol y ratones hígado graso no alcoólico después de H 2de tratamiento de agua rica en  26 , 27 . Es bien sabido que un nivel alto de colesterol es uno de los factores de riesgo más importantes para la EAP. Por lo tanto, la elucidación del mecanismo por el cual el H 2  disminuye el colesterol sérico proporcionará pruebas sólidas de la aplicación de H 2  en la terapia de la PAD.

Lp (a) es una partícula similar a LDL rica en colesterol, con apolipoproteína (a) y apolipoproteína B-100 específicas. Los niveles de Lp (a) en plasma predicen independientemente de la enfermedad cardiovascular aterosclerótica (ECV) y la EAP, aunque su mecanismo de acción en la aterosclerosis sigue sin estar claro  28 . Terapia para reducir los niveles plasmáticos de Lp (a) ha ganado mucha atención en los últimos años, y nuestros resultados revelan que el H 2 el agua rica en puede reducir el nivel de plasma de Lp (a). Lp (a) es considerado como un portador preferenciante de fosfolípidos oxidados (OxPLs) en el plasma humano  29 , y hemos demostrado que H 2agua rica en puede reducir los niveles de fosfolípidos oxidados, especialmente PAzPC. Además, un estudio anterior mostró que el H 2  puede suprimir la autooxidación del ácido linoleico y PAPC en un sistema químico puro 30 . El mecanismo por el cual el H 2  disminuyó la formación de OxPL  in vivo  merece un estudio más a fondo.

La EAP es una enfermedad aterosclerótica de los vasos arteriales, en la que los ciclos de isquemia y reperfusión inducidos por la EAP conducen a un aumento de ROS mitocondrial 19 . El tabaquismo es uno de los principales factores de riesgo de PAD, y los fumadores con hipertensión, hiperlipidemia y diabetes aumentarán la incidencia de PAD. Se sabe que los productos de cigarrillos activan la producción de radicales libres oxidativos en el cuerpo  31 . En nuestro estudio, H 2, como un nuevo antioxidante, podría reducir significativamente la MDA y aumentar significativamente la actividad de la SOD. La MDA es el producto de la peroxidación lipídica y un marcador de estrés oxidativo, mientras que la SOD es una enzima antioxidante que puede eliminar las ROS del cuerpo  32. Los estudios han demostrado una reducción en el suero MDA y el aumento en la actividad de SOD en los pacientes con síndrome metabólico potencial  33  o diabetes tipo 2  20  después de H 2  tratamiento. Informes anteriores también han demostrado que el H 2  puede inhibir la formación de MDA en el hígado graso 34 inducido por etanol / acetaminofén   o la lesión por reperfusión por isquemia hepática en ratones  35 , y reducir la MDA y aumentar la actividad de la SOD para aliviar el estrés oxidativo inducido por la hipoxia crónica intermitente en ratas  36 . Por lo tanto, el H 2  puede reducir la formación de peróxidos de lípidos en personas con riesgo de EAP mejorando la actividad de la enzima antioxidante.

ICAM-1 juega un papel clave en los procesos inflamatorios e inmunomediados; puede ser inducida por la interleucina-1 y el factor de necrosis tumoral, y expresada por el endotelio vascular, los macrófagos y los linfocitos. ICAM-1 también participa en la formación de placa local y se ha demostrado que es un predictor independiente del desarrollo y la progresión de PAD  37 . Estudios anteriores han demostrado que el H 2  puede inhibir la expresión de ICAM-1 y reducir la respuesta inflamatoria en diferentes modelos animales, incluido un modelo 38 de ratón con úlcera por presión, un  modelo 39 de ratón con sepsis  y un modelo 40 deconejillo de indias con pérdida auditiva inducida por ruido  . En nuestro estudio, la expresión reducida de ICAM-1 en suero puede haber conducido al alivio de la PAD.

Se sabe que el HDL tiene acciones vasoprotectoras y efectos antiaterogénicos 41 . El mecanismo subyacente está relacionado principalmente con su función de promover la salida de colesterol de las células espumosas de los macrófagos y estimular la producción de NO de las células endoteliales para mejorar la función de las células endoteliales 41 , 42 . El HDL también juega un papel en la reducción de la inflamación y el estrés oxidativo  43 , y es beneficioso para las células endoteliales mediante la protección de la adhesión de monocitos inducida por citocinas  44 . Se ha probado que H 2 puede mejorar la función de las HDL aumenta la capacidad de salida del colesterol mediada por las HDL, previniendo la oxidación de las LDL y reduciendo la apoptosis de las células endoteliales inducidas por ox-LDL y la adhesión de los monocitos a las células endoteliales  25 , 33 . En este estudio, aislamos HDL de diferentes grupos antes y después de la intervención y probamos las funciones  in vivo . Nuestros resultados muestran que el H 2  puede mejorar los efectos antioxidantes, antiinflamatorios y antiadhesivos de las HDL, lo que puede mejorar la oxidación y la inflamación y reducir el daño vascular en personas con riesgo de EAP.

Este estudio muestra los efectos del H 2  en el alivio de la esclerosis vascular mediante mecanismos antioxidantes y antiinflamatorios, así como en la mejora de la función de las HDL. Es probable que el H 2  ejerza efectos antioxidantes y antiinflamatorios al mejorar la actividad de la SOD y la función de las HDL; esto, a su vez, disminuye los niveles de MDA, OxPL, ICAM-1, CCL-1 e incluso Lp (a), aliviando así la rigidez artística medida por PWV. Al mismo tiempo, el H 2  ejerce un efecto hipolipemiante al reducir la CT plasmática, que también funciona para reducir el riesgo de PAD.

Este estudio tiene varias limitaciones. Primero, el número de participantes es pequeño y se necesita una muestra ampliada para verificar los resultados. En segundo lugar, la relación dosis-efecto de H 2 rica en agua no se ha estudiado, y se necesita un estudio adicional para determinar la mejor dosis. En tercer lugar, la intervención solo duró 10 semanas y el efecto de la intervención a largo plazo necesita una mayor verificación. Finalmente, además de las propiedades antioxidantes y antiinflamatorias, los mecanismos moleculares del H 2  necesitan más, especialmente sus efectos reguladores sobre el trastorno del metabolismo de los lípidos y su efecto sobre la Lp (a).

En conclusión, nuestros datos muestran que H 2- agua rica puede mejorar indicadores esclerosis vasculares y trastornos de los lípidos, y reducir el estrés oxidativo y la infiltración de factor inflamatorio. El H 2  puede usar en terapia adyuvante para aliviar la PAD.

Métodos

Asignaturas y diseño del estudio

El estudio fue un ensayo aleatorizado controlado con placebo de 10 semanas. El protocolo del estudio fue autorizado por el Comité de Ética de la Primera Universidad Médica de Shandong (NO.2019121, Fecha 08/10/2019). Este estudio se registró en el Registro de Ensayos Clínicos de China ( www.chictr.org.cn, Número de registro Chi CTR 2000035232, Fecha: 04/08/2020). Todos los participantes que fueron elegibles y aceptaron participar en la asignación aleatoria debían firmar un consentimiento informado por escrito antes de participar en el estudio. Este estudio siguió las pautas CONSORT. Todos los métodos se realizaron de acuerdo con las pautas y regulaciones relevantes para la investigación con humanos. Se inscribieron sesenta y tres sujetos mayores de 40 años de la comunidad de Zhoudian (Tai’an, China). Las condiciones de inscripción fueron las siguientes: fumador actual o dejó de fumar en los últimos 10 años, índice tobillo-brazo (ITB) <1,0 o índice de tabaquismo (intensidad del tabaquismo × duración del tabaquismo) ≥ 200, con o sin factores de riesgo de diabetes, alta presión arterial e hiperlipidemia,y poder completar el cuestionario de forma independiente o con la ayuda del investigador.

2 agua rica en agua y placebo

H embotellada 2 agua rica en, en el que las burbujas de hidrógeno nano-escala se mezclan físicamente con agua pura, se adquirió de Beijing Huoli Qingyuan Co., Ltd. (China). El placebo era agua pura, que era consistente con H 2 agua rica en términos de apariencia, la dosis, y el embalaje. Los sujetos bebieron el agua dentro de los 15 minutos posteriores a la apertura de la tapa sellada. El H 2  concentración del H 2 rica en agua fue de entre 650 a 700 mol / L cuando se abrió la botella, tal como se mide por el H 2  sensor (Unisense, Aarhus, Dinamarca) en nuestro laboratorio.

Medición de hidrógeno en el aliento después de la administración de agua rica en H2

Reclutamos a 10 participantes (5 hombres y 5 mujeres) que cumplían con los siguientes criterios: 20 a 30 años, sin enfermedad intestinal, hipoglucemia o enfermedades importantes, y sin tomar medicamentos para la flora intestinal. Después de un ayuno de 12 h, el participante bebió una botella de H 2 agua rica en el transcurso de 1 min. El aire exhalado se recogió cada 5 min a partir de entonces, y el H 2  concentración se midió usando un cromatógrafo de gases sensor (SGHA-P1; FIS Co. Ltd., Hyogo, Japón).

Análisis del índice de rigidez y elasticidad vascular

La rigidez y la elasticidad de las arterias periféricas se evaluaron mediante la medición automática del ITB y la velocidad de la onda del pulso (VOP) utilizando un dispositivo de detección vascular no invasivo (BP-203RPEIII, Omron, Japón) con los participantes en posición supina después de descansar durante 10 min. El ABI se refiere a la relación de presión de la parte superior del brazo izquierdo y derecho a los tobillos izquierdo y derecho, y PWV se refiere a la velocidad a la que la sangre del latido del corazón viaja a la periferia en forma de ondas, formando una onda de pulso y propagándose en las arterias.

Análisis de lípidos en suero

Se midió la lipoproteína (a) (Lp [a]) sérica por el método inmunoturbidimétrico de látex, y el colesterol total (CT), triacilgliceroles (TG), colesterol unido a lipoproteínas de alta densidad (HDL-C), colesterol unido a lipoproteínas de baja densidad (LDL-C), lipoproteína de muy baja densidad (VLDL-C), apolipoproteína AⅠ (Apo AⅠ) y Apo B se midieron mediante métodos enzimáticos en un autoanalizador químico (Hitachi Co, Tokio, Japón).

Estrés oxidativo sérico y factores inflamatorios

Los niveles séricos de malondialdehído (MDA) se determinaron después de la medición espectrofotométrica de sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS) utilizando un kit comercial (Nanjing Jiancheng Biochemistry, China). La actividad de la superóxido dismutasa (SOD) se probó de acuerdo con las instrucciones del fabricante (Nanjing Jiancheng Biochemistry, China). Las concentraciones séricas de molécula de adhesión celular intercelular-1 (ICAM-1), metaloproteinasa de matriz-1 (MMP-1) y quimiocina (CC Motif) Ligando 1 (CCL1) se midieron con kits Luminex (Univ-bio, Shanghai, Porcelana).

Fosfolípidos oxidados en suero

Los lípidos se extrajeron del plasma usando un método de metil-terc-butil éter con dimiristoilfosfatidilcolina (PC 14: 0/14: 0) como patrón interno. Los extractos de lípidos se analizaron utilizando un sistema de bomba binaria Shimadzu LC-20 AD interconectado con un espectrómetro de masas ABI 4000QTrap (Sciex, Framingham, MA, EE. UU.). La separación cromatográfica se realizó usando una columna Waters Symmetry C18 (3,5 \ mu m, 2,1 mm di x 100 mm) a 40ºC con un caudal de 0,3 ml / min. El volumen de inyección fue de 10 µl; la fase móvil comprendía el disolvente A (acetonitrilo / agua, 60:40, v / v) y el disolvente B (2-propanol / acetonitrilo, 90:10, v / v), con ambos disolventes que contenían acetato de amonio 10 mM y ácido acético al 0,1% ácido. La elución isocrática se realizó durante 16 min con 95% de B.La detección de fosfolípidos oxidados se logró durante el modo de monitorización de reacción múltiple con detección de iones positivos utilizando m / z 184 como ión producto. Los iones parentales de 1-palmitoil-2- (5-oxo-valeroil) -sn-glicero-3-fosfatidilcolina (POVPC), 1-palmitoil-2-glutaroil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina (PGPC), 1- palmitoil-2-azelaoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina (PAzPC) y 1-palmitoil-2- (9-oxo-nonanoil) -sn-glicero-3-fosfatidilcolina (PONPC) fueron 594,4, 610,4, 666,5 y 650,5, respectivamente.4, 666,5 y 650,5, respectivamente.4, 666,5 y 650,5, respectivamente.1-palmitoil-2-glutaroil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina (PGPC), 1- palmitoil-2-azelaoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina (PAzPC) y 1-palmitoil-2- (9-oxo-nonanoil ) -sn-glicero-3-fosfatidilcolina (PONPC) fueron 594,4, 610,4, 666,5 y 650,5, respectivamente.4, 666,5 y 650,5, respectivamente.4, 666,5 y 650 , 5, respectivamente.1-palmitoil-2-glutaroil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina (PGPC), 1- palmitoil-2-azelaoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina (PAzPC) y 1-palmitoil-2- (9-oxo-nonanoil ) -sn-glicero-3-fosfatidilcolina (PONPC) fueron 594,4, 610,4, 666,5 y 650,5, respectivamente.4, 666,5 y 650,5, respectivamente.4, 666,5 y 650 , 5, respectivamente.

Propiedades antioxidantes de HDL

Se aisló HDL del suero combinado mediante ultracentrifugación (n = 3 muestras para cada grupo, cada una de las cuales comprendía el suero de 4-5 sujetos) como se describe  45 . LDL (100 µg / mL) de personas sanas y HDL (200 µg / mL) aislado de cada grupo se incubaron con CuSO4 recién preparado  (10 µmol / L) a 37 ° C durante 2 h. El grado de oxidación de LDL se evaluó midiendo el nivel de MDA un método espectrofotométrico de acuerdo con las instrucciones del fabricante (Nanjing Jiancheng Biochemistry, China).

Ensayo de adhesión de células endoteliales y monocitos

El ensayo de adhesión de monocitos se modificó ligeramente como se describió anteriormente 46 . Las células endoteliales de la vena umbilical humana (HUVEC) se cultivaron a 37 ° C en una atmósfera humidificada de aire al 95% y CO 2 al 5%  , se cultivaron hasta una confluencia del 70 al 80% en placas de 96 pocillos y se estimularon con ox-LDL (100 µg / mL) en presencia o ausencia de HDL (100 µg / mL) durante 24 h. Monocitos THP-1 a una densidad de 2 × 10 5 se marcaron con 10 µmol / L 2 ′, 7′-bis (2-carboxietil) -5 (6) -carboxifluoresceína, éster acetoximetílico (BCECF-AM) a 37 ° C durante 1 h en medio RPMI-1640 y se enjuagaron con suero -medio RPMI-1640 libre. Las HUVEC en placas de 96 pocillos se lavaron tres veces y se incubaron con 100 µl de células THP-1 durante 1 h. Luego, cada pocillo se enjuagó tres veces con PBS para eliminar las células THP-1 no unidas. Las células THP-1 unidas a HUVEC se visualizaron con un microscopio fluorescente (Nikon, Japón) a 4 campos por pocillo de campo de alta potencia x 100. Los experimentos se realizaron al menos tres veces y la selección de campos de alta potencia para contar pozos separados se realizaron al azar.

Viabilidad celular determinada por ensayo CCK-8

Se sembraron HUVEC en placas de 96 pocillos y se pretrataron con o sin HDL (100 µg / ml) durante 6 y se estimularon con ox-LDL (100 µg / ml) durante 18 h. La viabilidad de las HUVEC se midió mediante el ensayo CCK-8 (Med Chem Express, EE. UU.), Y la absorbancia se midió a 450 nm usando un sistema de espectrofotómetro de microplacas (Tecan, Suecia). El porcentaje de viabilidad se calculó mediante la siguiente fórmula:% de viabilidad de HUVECs = (OD  muestra – OD  blanco ) / (OD  control – OD  blanco ) × 100% 33 .

análisis estadístico

Se utilizó estadística descriptiva para comparar las características básicas de los sujetos en los dos grupos (media ± DE). El análisis estadístico se realizó mediante la prueba t de Student para datos distribuidos normalmente y mediante pruebas no paramétricas para datos no paramétricos. Se utilizó el programa SPSS (versión 22.0) para todos los análisis estadísticos, y todos los datos se trazaron con GraphPad Prism 8. Los valores de p <0,05 se consideraron significativos.

Declaraciones

Conflicto de intereses:

Los autores no tienen ningún conflicto de intereses que informar.

Fondos:

Esta investigación fue financiada por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (número de subvención 81770855), el Programa de Becarios Taishan de la provincia de Shandong (número de subvención ts201511057) y el programa de promoción académica de la Primera Universidad Médica de Shandong ( números de subvención 2019QL010, 2019PT009).

Los ionizadores de agua AlkaViva H2
todos los generadores de agua de hidrógeno

Contribuciones de autor

SQ, YX, BL y QG, ​​participaron en la concepción y el diseño del estudio. QG, BL, JXMZ, XZ, MW y MZ realizaron la adquisición de datos. QG, BL y JX participaron en el análisis y la interpretación de los datos. BL y QG redactaron el manuscrito y SQ ayudó en la revisión crítica del manuscrito. SQ obtuvo la financiación. SQ e YX supervisaron el estudio. Todos los autores han leído y aprobado el manuscrito enviado.

Expresiones de gratitud

Esta investigación fue financiada por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (número de subvención 81770855), el Programa de Becarios Taishan de la provincia de Shandong (número de subvención ts201511057) y el programa de promoción académica de la Primera Universidad Médica de Shandong ( números de subvención 2019QL010, 2019PT009) .Los autores agradecen a Xiao Liu por su ayuda con el reclutamiento de sujetos, Meiyuan Liu, Yujuan Sun y Mei Li de la comunidad Zhoudian por su ayuda, así como a todos los voluntarios que participaron en este estudio .

Referencias

1 Miembros del comité de redacción, G.-HM, Gornik HL, et al. . Guía de 2016 de la AHA / ACC sobre el tratamiento de pacientes con enfermedad de las arterias periféricas de las extremidades inferiores: resumen.  Medicina vascular  22 (3) NP1 –NP43 , doi: DOI: 10.1177 / 1358863X17701592 (2017).

2 Lozano, R.  et al.  Mortalidad mundial y regional por 235 causas de muerte para 20 grupos de edad en 1990 y 2010: un análisis sistemático para el Estudio de carga mundial de enfermedades 2010.  The Lancet  380 , 2095-2128, doi: 10.1016 / s0140-6736 (12) 61728-0 (2012).

3 Fowkes, FGR  y col.  Comparación de estimaciones globales de prevalencia y factores de riesgo de enfermedad arterial periférica en 2000 y 2010: revisión y análisis sistemáticos. The Lancet  382 , 1329-1340, doi: 10.1016 / s0140-6736 (13) 61249-0 (2013).

4 Hisamatsu, T.  et al.  Tabaquismo, abandono del hábito de fumar y medidas de aterosclerosis subclínica en lechos vasculares múltiples en hombres japoneses. Revista de la Asociación Estadounidense del Corazón  5 (9): e003738 , doi: 10.1161 / jaha.116.003738 (2016).

5 Mohammedi K, Woodward M, Hirakawa Y & al., E. Enfermedad microvascular y macrovascular y riesgo de enfermedad arterial periférica mayor en pacientes con diabetes tipo 2.  Diabetes Care  2016; 39 (10): 1796-1803 , doi: 10.2337 / dc16-0588 / – / DC1 (2016).

6 Selvin E, ET Prevalencia y factores de riesgo de la enfermedad arterial periférica en los Estados Unidos Resultados de la Encuesta nacional de exámenes de salud y nutrición, 1999-2000. Circulación  110 (6): 738-743 , doi: 10.1161 / 01.CIR.0000137913.26087.F0 (2004).

7 Firnhaber JM, PC Enfermedad de la arteria periférica de la extremidad inferior: diagnóstico y tratamiento. Soy Fam Physician  99 (6): 362-369  (2019).

8 Resanovic, I.  et al.  Efectos anti-aterogénicos del 17beta-estradiol. Horm Metab Res  45 , 701-708, doi: 10.1055 / s-0033-1343478 (2013).

9 Wang, M.  y col.  El ginsenósido Rb3 ejerce propiedades protectoras contra la lesión celular inducida por el extracto de humo de cigarrillo al inhibir las vías p38 MAPK / NF-kappaB y TGF-beta1 / VEGF en fibroblastos y células epiteliales. Biomed Pharmacother  108 , 1751-1758, doi: 10.1016 / j.biopha.2018.10.018 (2018).

10 Pini, A.  y col.  Protección contra la lesión vascular inducida por el humo del cigarrillo mediante la relaxina-2 humana recombinante (serelaxina). J Cell Mol Med  20 , 891-902, doi: 10.1111 / jcmm.12802 (2016).

11 Schwarz, V.  et al.  El vino tinto previene los efectos vasculares negativos agudos del tabaquismo.  Am J Med  130 , 95-100, doi: 10.1016 / j.amjmed.2016.08.025 (2017).

12 Hiatt WR, GJ, Smith SC Jr, McDermott M, Moneta G, Oka R, Newman AB, Pearce WH. Grupo de redacción de la American Heart Association 1. Simposio II sobre enfermedades vasculares periféricas ateroscleróticas: nomenclatura de las enfermedades vasculares.  Circulación  118 (25): 2826-2829. , doi: 10.1161 / CIRCULATIONAHA.108.191171 (2008).

13 Song, G.  y col.  El agua rica en descenso de los niveles séricos de colesterol LDL y mejora la función de las HDL en pacientes con síndrome metabólico potencial. Revista de investigación de lípidos  54 (7), 1884-1893.  (2000).

14 Liu B, XJ, Zhang M, Wang M, Ma T, Zhao M, Gu Q, Qin S. La inhalación de hidrógeno alivia la enfermedad del hígado graso no alcohólico en ratas con síndrome metabólico. Mol Med Rep  22 (4): 2860-2868 , doi: 10,3892 / mmr. 2020,11364 (2020).

15 Amitani, H.  et al.  El mejoramiento del hidrógeno el control glucémico en un modelo animal con diabetes tipo 1 al promover la captación de glucosa en el músculo esquelético. PLoS One  8 , e53913, doi: 10.1371 / journal.pone.0053913 (2013).

16 Gharib B  y col.  Propiedades antiinflamatorias del hidrógeno molecular: investigación sobre la inflamación hepática inducida por parásitos.  CR Acad Sci III  324 (8): 719-724 , doi: doi: 10,1016 / s0764-4469 (01) 01350-6 (2001).

17 Ohsawa, I.  et al.  El hidrógeno actúa como un antioxidante terapéutico al reducir selectivamente los radicales citotóxicos de oxígeno. Nature Medicine  13 , 688-694, doi: 10.1038 / nm1577 (2007).

18 Fu, J.  y col.  Las moléculas de hidrógeno (H2) mejoran la recuperación de la perfusión a través de los efectos antioxidantes en la enfermedad arterial periférica experimental. Informes de medicina molecular  18 (6): 5009-5015 , doi: 10.3892 / mmr.2018.9546 (2018).

19 Koutakis, P.  et al.  Estrés oxidativo y tratamiento antioxidante en pacientes con enfermedad arterial periférica. Physiol Rep  6 , e13650, doi: 10.14814 / phy2.13650 (2018).

20 Kajiyama, S.  et al.  La suplementación con agua rica en hidrógeno mejora el metabolismo de los lípidos y la glucosa en pacientes con diabetes tipo 2 o intolerancia a la glucosa. Nutr Res  28 , 137-143, doi: 10.1016 / j.nutres.2008.01.008 (2008).

21 Ito, M.  y col.  Beber agua con hidrógeno y la exposición intermitente al gas hidrógeno, pero no lactulosa o la exposición continua al gas hidrógeno, previenen la enfermedad de Parkinson inducida por 6-hidroxidopamina en ratas. Med Gas Res  2 , 15, doi: 10.1186 / 2045-9912-2-15 (2012).

22 Shimouchi A, Nose K, Yamaguchi M, Ishiguro H & T., K. Breath Hydrogen Produced by Ingestion of Commercial Hydrogen Water and Milk. Biomark Insights  4: 27-32 , doi: doi: 10.4137 / bmi.s2209 (2009).

23 Kim HL, KS Velocidad de onda de pulso en aterosclerosis. Frente Cardiovasc Med  6 , 41, doi: 10.3389 / fcvm.2019.00041 (2019).

24 Nakao A, Toyoda Y, Sharma P, Evans M & N., G. Eficacia del agua rica en hidrógeno sobre el estado antioxidante de sujetos con síndrome metabólico potencial: un estudio piloto abierto.  J Clin Biochem Nutr  46 (2): 140-149 , 140-149, doi: doi: 10.3164 / jcbn.09-100 (2010).

25 Song, G.  y col.  El hidrógeno activa el eflujo ex vivo dependiente del transportador de casete de unión a ATP A1 y mejora la función de las lipoproteínas de alta densidad en pacientes con hipercolesterolemia: un ensayo doble ciego, aleatorizado y controladora con placebo. J Clin Endocrinol Metab  100 , 2724-2733, doi: 10.1210 / jc.2015-1321 (2015).

26 Lin, CP, Chuang, WC, Lu, FJ & Chen, CY Los efectos antioxidantes y antiinflamatorios del agua rica en hidrógeno alivian el hígado graso inducido por etanol en ratones. World J Gastroenterol  23 , 4920-4934, doi: 10.3748 / wjg.v23.i27.4920 (2017).

27 Wang, X. y Wang, J. La regulación a la baja de miR-136 inducida por agua de hidrógeno de alto contenido alivia la enfermedad del hígado graso no alcohólico al regular Nrf2 mediante la selección de MEG3. Biol Chem  399 , 397-406, doi: 10.1515 / hsz-2017-0303 (2018).

28 Orsó E, SG La lipoproteína (a) y su papel en la inflamación, aterosclerosis y neoplasias. Clin Res Cardiol Suppl  12 , 31-37, doi: 10.1007 / s11789-017-0084-1 (2017).

29 Bergmark, C.  et al.  Una función novedosa de la lipoproteína [a] como portador preferencial de fosfolípidos oxidados en el plasma humano. J Lipid Res  49 , 2230-2239, doi: 10.1194 / jlr.M800174-JLR200 (2008).

30 Iuchi, K.  et al.  El hidrógeno molecular regula la expresión génica modificando la generación dependiente de la reacción en cadena de radicales libres de mediadores de fosfolípidos oxidados. Sci Rep  6 , 18971, doi: 10.1038 / srep18971 (2016).

31 Varela-Carver A, Parker H, Kleinert C & O., R. Efectos adversos del humo del cigarrillo e inducción de estrés oxidativo en cardiomiocitos y endotelio vascular. Curr Pharm Des  16 (23): 2551-2558. , doi: doi: 10.2174 / 138161210792062830 (2010).

32 Niizuma, K.  et al.  Vías de señalización de muerte neuronal mitocondrial y apoptótica en isquemia cerebral.  Biochim Biophys Acta  1802 , 92-99, doi: 10.1016 / j.bbadis.2009.09.002 (2010).

33 Song, G.  y col.  El agua rica en descenso de los niveles séricos de colesterol LDL y mejora la función de las HDL en pacientes con síndrome metabólico potencial. Revista de investigación de lípidos  54 (7), 1884-1893 , doi: https://doi.org/10.1194/jlr.M036640  (2013).

34 Lin, C.-P., Chuang, W.-C., Lu, F.-J. Y Chen, C.-Y. Los efectos antioxidantes y antiinflamatorios del agua rica en hidrógeno alivian el hígado graso inducido por etanol en ratones. Revista mundial de gastroenterología  23 , 4920 (2017).

35 Liu, Y.  et al.  Efectos protectores de la solución salina enriquecida con hidrógeno sobre la lesión por reperfusión por isquemia hepática al reducir el estrés oxidativo y la liberación de HMGB1. Gastroenterología BMC  14 , 12 (2014).

36 Li, W.  et al.  El hidrógeno mejora el deterioro neurocognitivo crónico intermitente inducido por hipoxia la inhibición del estrés oxidativo mediante. Brain Res Bull  143 , 225-233, doi: 10.1016 / j.brainresbull.2018.09.012 (2018).

37 Tzoulaki, I.  et al.  Proteína C reactiva, interleucina-6 y moléculas de adhesión solubles como predictores de aterosclerosis periférica progresiva en la población general: Edinburgh Artery Study  Circulación  112 , 976-983, doi: 10.1161 / CIRCULATIONAHA.104.513085 (2005).

38 Fang, W.  et al.  La inhalación de gas hidrógeno protege contra la lesión por reperfusión / isquemia cutánea en un modelo de ratón de úlcera por presión. J Cell Mol Med  22 , 4243-4252, doi: 10.1111 / jcmm.13704 (2018).

39 Chen, H.  y col.  El hidrógeno molecular protege a los ratones contra la sepsis polimicrobiana al mejorar la disfunción endotelial a través de una vía de señalización Nrf2 / HO-1. Int Immunopharmacol  28 , 643-654, doi: 10.1016 / j.intimp.2015.07.034 (2015).

40 Chen, L.  et al.  Mecanismos moleculares subyacentes a los efectos protectores de la solución salina saturada de hidrógeno sobre la pérdida auditiva inducida por ruido. Acta Otolaryngol  137 , 1063-1068, doi: 10.1080 / 00016489.2017.1328743 (2017).

41 Besler, C.  et al.  Mecanismos subyacentes a los efectos adversos de las HDL en las vías de activación de eNOS en pacientes con enfermedad de las arterias coronarias. J Clin Invest  121 , 2693-2708, doi: 10.1172 / JCI42946 (2011).

42 Tall, AR, Yvan-Charvet, L., Terasaka, N., Pagler, T. & Wang, N. HDL, transportadores ABC y salida de colesterol: implicaciones para el tratamiento de la aterosclerosis. Cell Metab  7 , 365-375, doi: 10.1016 / j.cmet.2008.03.001 (2008).

43 Soran, H., Hama, S., Yadav, R. y Durrington, funcionalidad PN HDL. Curr Opin Lipidol  23 , 353-366, doi: 10.1097 / MOL.0b013e328355ca25 (2012).

44 Park SH, Park JH, Kang JS & YH., K. Implicación de los factores de transcripción en la protección de las HDL plasmáticas contra la expresión de la molécula 1 de adhesión de células vasculares inducida por TNF-alfa.  Int J Biochem Cell Biol  35 (2): 168-182. , 168-182., Doi: doi: 10.1016 / s1357-2725 (02) 00173-5 (2003).

45 HAVEL RJ, EH, BRAGDON JH. . Distribución y composición química de lipoproteínas separadas ultracentrífugamente en suero humano. J Clin Invest  34 (9): 1345-1353 , doi: doi: 10.1172 / JCI103182 (1955).

46 Yang X, Wan M, Cheng Z, Wang Z y Q., W. Tofacitinib inhibe la adhesión de los monocitos THP-1 inducida por ox-LDL a las células endoteliales. Artif Cells Nanomed Biotechnol  47 (1): 2775-2782 , doi: doi: 10.1080 / 21691401.2019.1573740 (2019).

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