Arhive etichetă: estrés oxidativo

Apa cu hidrogen molecular in TRATAMENTUL AFECȚIUNILOR NEUROLOGICE ACUTE ȘI CRONICE (ALZHEIMER, PARKINSON, ETC.): MECANISME DE PROTECȚIE ȘI CĂI DE ADMINISTRARE

 Hidrogenul molecular(dizolvat in apa)  în tratamentul afecțiunilor neurologice acute și cronice (de exemplu, Alzheimer, Parkinson, atac vascular cerebral,etc.): mecanisme de protecție și căi de administrare hidrogen molecular

 
 
Revizuim efectele terapiei cu apa cy hidrogen molecular in conditii neuronale acute si a boli neurodegenerative. Terapia cu apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular dizolvat poate fi util pentru prevenirea bolilor neurodegenerative și pentru reducerea simptomelor de conditii neuronale acute.
 
Recent, efectele neuroprotectoare ale tratamentului (cu apa) cu hidrogen molecular  au fost raportate in ambele setari de baza si clinice după cum se va vedea mai jos; am examinat efectele hidrogenului molecular H 2  (dizolvat in  apa) asupra bolilor acute ale sistemului nervos central și privind bolile neurodegenerative cronice. Am examinat , de asemenea , diferite mecanisme prin care apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular  H 2  isi exercita efectele neuroprotectoare.
Hidrogen molecular H 2  acționează ca un captator pentru OH   și ONOO  , afectează neuroinflammatia, conservă producerea de energie mitocondriala și posedă proprietăți neuroprotectoare.
 
Spre deosebire de medicamente conventionale, mai mult hidrogen molecular H 2 ca  tratament, în special consumul de apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular H 2  , nu are efecte secundare grave și este eficient pentru prevenirea debutului bolilor neurodegenerative și prevenirii agravarii condițiilor neuronale acute –  exemple:
 

apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular si boala Parkinson (PD)

 Boala Parkinson este o tulburare care prezintă simptome extrapiramidale cauzate de degenerarea si pierderea de celule producatoare de dopamina din substantia nigra. Stresul oxidativ este cunoscut a fi implicat în starea clinică a bolii Parkinson .  )  Mai mult decât atât, a fost raportată implicarea disfuncției mitocondriale în boala Parkinson PD.  )

Efectele de hidrogen molecular  H 2 (in apa) asupra bolii Parkinson(PD) au fost raportate la modelele animale de PD precum și în studiile clinice.  –  )

In 2009, Fujita  și colab.  )  și Fu  și colab.  ) au  raportat că ,consumul de apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular H 2 inhiba stresul oxidativ pe calea nigrostriatala și previne pierderea de celule de dopamina intr – un model animal boala Parkinson PD. Cu consumul de apa bogata in hidrogen molecular H 2  stresul oxidativ in calea nigrostriatala a fost inhibată și pierderea celulelor dopaminei a fost scazuta. Aceste rezultate sugerează : consumul de apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular H 2 ar putea afecta debutul bolii Parkinson PD.

In ultimii ani, rezultatele unui studiu clinic privind efectele consumului de apa cu  hidrogen molecular H 2 au fost raportate  pentru boala Parkinson.  )  Un studiu clinic uman dublu-orb , randomizat , a aratat : consumul de apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen  molecular H 2  (1000 ml / zi) timp de 48 săptămâni a îmbunătățit semnificativ scorul total Unified Parkinson Disease – Scala de evaluare (UPDRS) dintre pacientii  boala Parkinson tratați cu levodopa. Un studiu dublu-orb , multi-centru de apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular H 2 este în prezent în curs de desfășurare (Tabelul  1 ).  )

 

apa cu  hidrogen molecular si boala Alzheimer (AD)

Boala Alzheimer AD, o boala neurodegenerativa legată de vârstă , este cea mai frecventa cauza de dementa.  ,  )  Patologic, acesta este caracterizat prin depunerea de proteină Ap în afara celulelor nervoase și acumularea de proteine fosforilate in interiorul celulelor nervoase. Există , de asemenea , o pierdere marcata a celulelor nervoase din cortexul cerebral.  )  În ultimii ani, stresul oxidativ și neuroinflammatia au fost raportate pentru a fi implicate in boala Alzheimer AD.  ,  )  Până în prezent, rapoartele s-au axat pe implicarea stresului oxidativ în parenchimul cerebral.  ,  , ) Acumularea de proteină Ap este puternic asociata cu eșecul de clearance de  care Ap este strâns legată de patogeneza bolii Alzheimer AD.  )  Este cunoscut faptul că proteina legată de receptor lipoproteine cu densitate joasă 1 (LRP1) este implicată în eliminarea proteinelor Ap. Disfuncția LRP cauzata de stresul oxidativ și neuroinflammatie este implicata in debutul bolii Alzheimer AD.  ) Reglementarea stresului oxidativ și neuroinflammatiei poate preveni debutul sau progresiei bolii Alzheimer AD. O serie de rapoarte au investigat efectele hidrogen molecular  H 2  pentru prevenirea debutului bolii Alzheimer AD.  , )

Într – un model șobolan de Boala Alzheimer AD  , s-a raportat că administrarea de ser  bogat in hidrogen molecular  (5 ml / kg, ip, zilnic) a inhibat stresul oxidativ, producerea de citokine și factorului nuclear-kB de producție (NF-kB) in hipocampul si cortexul cerebral, si imbunatatit memoria afectata.  ,  )

Sa raportat că consumul de apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular H 2 inhiba modificari cerebrale legate de îmbătrânirea populației și declinul memoriei spațiale.  )

 

Efectul terapeutic al consumului de apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogenului molecular H 2 dupa un prejudiciu post – traumatic al creierului (TBI) si in debutul posttraumaticei boli Alzheimer (AD) a fost investigată de către Dohi  et al.  în 2014,  ) ,  care a investigat dacă consumul de apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular H 2  cu 24 ore înainte  traumatismelor poate inhiba daune neuronale într – un model de leziune corticală controlat folosind soareci. Autorii au constatat ca expresia proteinelor fosforilate AT8 si Alz50 in hipocampus si cortexul a fost blocata la șoareci care au consumat apa bogata in  hidrogen molecular. Mai mult, activitatea astrocitelor și microglia au fost inhibate la soareci model de boala dauna cerebrala post – traumatica de consumul de apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular H 2  Expresia genelor induse de dauna cerebrala post – traumatica in special cele care sunt implicate în oxidarea / metabolismul carbohidraților, eliberarea de citokine, leucocite sau migrarea celulelor, transportul citokină și adenozintrifosfat (ATP) și nucleotidici de legare, a fost inhibată prin consumul apa bogata in molecular de hidrogen H 2

Dohi  și colab.  ) ,a  revizuit în mod specific rolul apei cu  hidrogen molecular H 2 în neuroinflammatie dupa traumatisme cerebrale. Consumul de apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular H 2  a influențat producția  de citokine și chemokine în creier deteriorat și a inhibat producerea de hipoxie inductibile factor-1 (HIF-1), MMP-9 și ciclofilină A. Cu toate acestea, apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular H 2  nu a afectat producerea proteinei precursoare a amiloidului (APP), Ap-40 sau Ap-42. Ei au investigat , de asemenea , relația dintre hidrogen molecular H 2  și producerea de ATP și au raportat că hidrogenul molecular H 2 a crescut respiratia bazala, capacitate de rezervă, și respirația nonmitochondriala , dar nu a crescut producția de ATP aerobă. Astfel s-a demonstrat că efectele inhibitoare ale hidrogenului molecular H 2 de  pe lezaiuni nervoase nu sunt numai datorită funcției sale simple ca un captator de radicali liberi (Fig.  1  și  și2.O 2 ).

 
Hidrogenul molecular este bine caracterizat ca un captator selectiv a radicalilor hidroxil și peroxynitrite.

Stresul oxidativ cauzat de specii reactive de oxigen este considerat un mediator major al leziunilor tisulare/tesut și celule în diferite condiții neuronale, inclusiv urgențe neurologice și boli neurodegenerative.

Stresul oxidativ cauzat de specii reactive de oxigen (ROS) este un mediator major al tesutului si leziunile celulare in diferite conditii neuronale, inclusiv urgențe neurologice și boli neurodegenerative.  –  )

Controlul stresului oxidativ este o strategie terapeutică majoră pentru diverse condiții neuronale.  ,  ,  )  Există mai multe metode pentru controlul stresului oxidativ cu utilizarea captatori de radicali liberi fiind cea mai comună abordare.  ,  )  Dovezi din experimentele pe animale susțin ideea că captatori de radicali liberi si antioxidanti reduce dramatic leziuni cerebrale.  ) edaravonă (MCI-186), un nou captator de radicali liberi, a fost dezvoltat pentru a preveni peroxidarea lipidelor in conditii neurologice patologice.  ,  )Edaravonă este în prezent singurul medicament antioxidant aprobat pentru tratarea infarctului cerebral care îmbunătățește rezultatul funcțional al accidentului vascular cerebral ischemic.  )  terapie hipotermie creier(managementul temperaturii vizate) poate controla în mod eficient stresul oxidativ. Terapia  hipotermie creier este eficace la pacienții cu diferite boli neuronale acute.  ,  ,  )

In 2007, Ohsawa  și colab.  ) au  raportat că hidrogenul molecular (H 2 ) , poate acționa ca un antioxidant pentru a preveni si trata leziunea artera  cerebrala medie ocluzia-reperfuzie la șobolani . Acest efect a fost susținut de rapoarte suplimentare. Recent, efectul benefic al molecular H 2  a fost raportată în multe alte organe, inclusiv creierul.  – de  )  Primul efect terapeutic major al hidrogenului molecular H 2 a  fost acela a unui antioxidant, care combină cu ionii hidroxil pentru a produce apă.  )  Recent, alte mecanisme biologice de hidrogen molecular H 2  (anti-inflamatoare, anti-apoptoză, anti-citokine, expresia ADN – ului și a metabolismului energetic) au fost propuse (Fig.  1  și  și2.O 2 ).  ) Prin urmare, biologia hidrogenului molecular  H 2  nu este simpla. In aceasta revizuire, vom discuta despre rolul  hidrogen molecular H2  în diferite condiții neuronale.

Fig. 1

Efectele benefice ale hidrogenului molecular în patofiziologia diferitelor afecțiuni neuronale acute. ATP, adenozin trifosfat; miR-200, microRNA-200; ROS, specii reactive de oxigen.

Fig. 2

Efectul consumului de apa bogat în hidrogen molecular ca apa functionala in patofiziologia bolilor neurodegenerative. ATP, adenozin trifosfat; miR-200, microRNA-200; ROS, specii reactive de oxigen.
 

Metode și cai de administrare ale terapiei  hidrogen molecular H 2

fiind o mica (2 Da), molecula neîncărcată de hidrogen H 2,  ar fi de așteptat să distribuie cu ușurință pe tot corpul, inclusiv posibilitatea de a pătrunde cu ușurință membranele celulare, dar nu putem determina distribuția de  hidrogen molecular H 2  între organe și concentrațiile sale în fiecare organ și ser pe baza metodelor de administrare și dozare. Această problemă a fost investigată în 2014.  )  O analiză comparativă a fost realizat pe consumul de apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular H 2 ,  administrarea intravenoasă de hidrogen molecular H 2  in ser fiziologic și inhalarea  de hidrogen molecular  H 2 gaz. Rezultatele au aratat ca cele mai mari concentrații sunt atinse 1 min după administrarea intravenoasă și 5 minute după administrarea orală. Cea mai mare concentrație a ajuns la 30 min după inhalarea de hidrogen molecular H 2  gaz și a fost menținut pentru ceva timp . Deși concentrațiile de hidrogen  molecular  H 2   din creier tind să fie ridicate după administrare intravenoasă sau prin inhalare, nu au fost observate diferențe semnificative în comparație cu concentrațiile după consumul de apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular H 2 si ser bogat in hidrogen molecular H 2  Astfel, deși au existat variații în funcție de metoda de administrare, toate metodele au fost găsite pentru a avea ca rezultat prezența hidrogenului molecular H 2  in tesutul creier . Liu  și colab.  )  măsurat  nivele de hidrogen molecular   H 2 in artere, vene și țesuturile cerebrale după inhalarea de 2% hidrogen molecular H 2  gaz. Ei au descoperit ca nivelul de hidrogen molecular H 2 arterial a  ajuns la 30 de minute după administrare, în timp ce in țesutul venos și creier  hidrogenul molecular H 2 a  ajuns la 45 de minute după administrare. Ei au raportat că  nivelele de hidrogen molecular H 2   au fost similare in artere si tesuturi ale creierului.

Acest lucru a demonstrat că  hidrogen molecular H 2  a migrat la tesutul cerebral , indiferent de metoda de administrare ( astfel, studiile de mai jos  ar fi putut la fel de bine  fi efectuate cu ajutorul de apa cu  hidrogen molecular  in loc de gaz de hidrogen molecular sau ser cu hidrogen molecular ).

Aceste rezultate sugerează că consumul de apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular H 2 previne bolile neurodegenerative  și apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular H 2 poate fi utilizata pentru tratarea tulburărilor cerebrale acute (Fig.  1  și  AND2 2 ) .

 
 
 

Hidrogenul molecular & Boli neurologice

Hidrogenul molecular in leziuni cerebrale ischemice

S – a raportat că  hidrogenu molecular  H 2  previne leziuni cerebrale ischemice în experimentele pe animale.  , de  –  ) Ohsawa  și colab.  ) au  raportat că inhalarea de 2% hidrogen molecular H 2  gaz  dupa accident vascular cereblra suprimată puternic    artera de mijloc cerebrala ischemie-reperfuzie la șobolani. Intr – un studiu de rezonanță electronică de spin (RES), au aratat ca hidrogen molecular  H 2 a  avut o activitate hidroxil radical purjat. Hydroxynonenal (HNE) și 8-hidroxi-2′-deoxiguanozină (8-OHdG) imunoreactivitatea a fost suprimata in creier deteriorat dupa tratamentul cu 2% hidrogen molecular H 2. inhalarea de hidrogen molecular H 2  a redus leziune ischemică și volumul hemoragic după tranzitoria ischemie ocluzia arterei cerebrale medie (MCAO) .  )  Generarea de radicali liberi după ischemie induce expresie metaloproteinaze matriceale  (MMP).  ,  ) ,  MMP-9 promovează  infarctul hemoragic prin perturbarea vaselor cerebrale.  )  Inhalarea de hidrogen molecular H 2   a fost găsit pentru a reduce expresia MMP-9  într – un model de șobolan MCAO.  hidrogenul molecular  H 2  are de asemenea un efect neuroprotector împotriva ischemiei globale. Ji  și colab.  ) a raportat că  hidrogen molecular  H 2 in injecție salină [5 ml / kg intra-peritoneal (ip) ca  administrare] după ischemie globală –  moartea celulelor neuronale a redus leziunile hipocampice Cornet d’Ammon 1 (CA1) la șobolani. Hipoxie-ischemie cerebralași asfixie neonatală sunt principalele cauze ale leziuni creierului la nou – născuți. Hidrogen molecular H 2  inhalat ca gaz și hidrogen molecular H 2 in injecție salină furnizează neuroprotecție timpurie de leziuni neurologice neonatale .  )  Nagatani  și colab.  ) au  raportat că un hidrogen molecular H  2 ca soluție intravenoasă -îmbogățita este sigur pentru pacienții cu infarct/accident vascular cerebral acut, incluzând pacienții tratați cu terapie  activator al plasminogenului tisular  (t-PA).

Sindromul metabolic este un puternic factor de risc de accident vascular cerebral. S – a raportat că terapia cu hidrogen molecular  H 2 poate ameliora sindromul metabolic in setarile de baza si clinice. ( Deschisă  – de  )  Terapia cu hidrogen molecular H 2   poate reduce accident vascular cerebral la pacienții cu sindrom metabolic care implica diabet zaharat.

Hidrogenul molecular in accident vascular cerebral hemoragic

Accident vascular cerebral hemoragic care implica hemoragie intracerebrala (HIC) și hemoragie subarahnoidă (SAH) este o stare critică neuronala, iar rata de mortalitate de accident vascular cerebral hemoragic este încă ridicata. ( De  – la  ) Manaenko  și colab.  ) au  raportat un efect neuroprotector al hidrogenului molecular H 2  inhalat ca si gaz folosind un HIC model. experimentele pe animale cu H 2  inhalarea de gaz hidrogen molecular suprima stresul redox si perturbarea barierei hemato – encefalică (BBB) ,  prin reducerea activării celulelor mastocite și degranulare. Edem cerebral și deficite neurologice au fost , de asemenea , suprimate. În SAH, există mai multe studii care demonstrează efectul neuroprotector al hidrogenului molecular H2  . ( De  –  )  Un studiu clinic a inceput la pacientii cu SAH (Tabelul  1 ).  )

tabelul 1

Studiile clinice cu hidrogen molecular in boli ale sistemului nervos central (SNC)

Hidrogen molecular si leziuni traumatice ale creierului (TBI)

Eficacitatea hidrogenului molecular  H 2  pentru tratarea leziunilor traumatice ale creierului TBI a fost investigată în mai multe studii.  ,  ,  )  Ji  și colab.  ) a  raportat că într – un model de TBI șobolan, hidrogen molecular H 2  inhalat ca gaz a fost găsit pentru a proteja permeabilitate BBB si de a reglementa edemul cerebral posttraumatic, inhibând astfel leziuni ale creierului. Hidrogen molecular H 2  inhalat ca gaz inhibă , de asemenea , scăderea activității superoxid dismutaza (SOD) și activitatea catalazei (CAT). Acestea sunt enzime antioxidante in creierul posttraumatic care inhiba producerea de malondialdehidă (MDA) și 8-izo-prostaglandina F2α (8-izo-PGF2α). Eckermann și colab.  ) a  raportat că într – un model de chirurgie trauma pe șoarece lobectomie frontal drept, hidrogen molecular H 2  inhalat ca gaz a fost găsit pentru a inhiba edemul cerebral postoperator și  a îmbunătăți scorul neurocomportamental postoperator. De asemenea , același raport a arătat că peroxidarea lipidelor și producerea de substanțe de stres oxidativ nu au fost inhibate de hidrogen molecular H 2  inhalat ca gaz.  ) 

Hidrogenul molecular si leziuni ale măduvei spinării

Chen  și colab.  ) au  evaluat efectele hidrogenului molecular  H 2 administrat in ser (ip) într – un model de leziune traumatică a măduvei spinării de șobolan. Ei au descoperit ca simptome neurologice posttraumatice au fost imbunatatite prin  tratament cu ser bogat in  hidrogen molecular H 2 . In plus, hidrogenul molecular H 2 a fost gasit pentru a reduce infiltrarea celulelor inflamatorii, TdT mediată dUTP nick și etichetare (TUNEL) celule -pozitiv si hemoragie. In plus, stresul oxidativ a fost inhibat și expresia  factorului neurotrofic derivat (BDNF) creier a fost crescută.

Efectele  de hidrogen molecular H 2 s-  au raportat si la administrarea asupra ischemia maduvei spinarii.  ,  )  Huang  și colab.  )au investigat efectele  hidrogen molecular H 2  inhalat ca gaz în măduva spinării, model de ischemie-reperfuzie iepure. Ei au analizat efectele inhalarii de hidrogen molecular H 2  cu diferite concentrații (1, 2 și 4%) și au raportat că hidrogenul molecular H 2  inhalat ca gaz la concentrații de 2% și 4% a inhibat  moarte neuronală. Cu toate acestea, nu au observat diferențe semnificative între cele două grupuri în ceea ce privește efectele , concentratiile  2% și 4% hidrogen molecular, fiind la fel de eficiente. )  S – a raportat că inhalarea de 2% hidrogen molecular H 2  gaz inhiba apoptoza in urmatoarele leziuni ale coloanei vertebrale cauzate de ischemie-reperfuzie. In plus, hidrogenul molecular H 2  inhalat ca gaz regleaza activitatea caspazei-3 , producerea de citokine inflamatorii, stres oxidativ si diminueaza substanțelor antioxidante endogene. Zhou  și colab.  ) au  raportat , de asemenea , că  hidrogen molecular H 2 administrat ca ser  (ip) are efecte benefice asupra măduvei spinării in ischemie-reperfuzie la iepuri.

Alte afecțiuni neurologice acute

In ultimii ani, cercetările au arătat că există o incidență ridicată a  simptomelor comorbide ale sistemului nervos central , în cazurile sepsis.  )  Utilizarea unui ligatura cecală șoareci și model de puncție (CLP), Liu  și colab.  ) au  raportat că  hidrogenul molecular H 2  inhalat ca gaz îmbunătățește  encefalopatie septica. Ei au raportat că inhalarea gazului 2% hidrogen molecular H 2  a inhibat apoptoza post CLP, edem cerebral, permeabilitatea BBB, producerea de citokine și stresul oxidativ în regiunea hipocampului CA1 precum și îmbunătățește funcția cognitivă. Nakano  și colab.  ) au  raportat că administrarea maternă a hidrogenului molecular H 2 are un efect supresiv asupra leziunilor cerebrale fetale cauzate de inflamarea intrauterină cu injectarea intraperitoneală materna a lipopolizaharide (LPS).

Tratamentul de monoxid de carbon (CO) ,otrăvire encefalopatica , care este o otrăvire comună a gazelor, este încă să fie stabilită.  ,  )  Sun  și colab.  )  și Shen  și colab.  ) au  investigat efectele serului bogat in  hidrogen molecular H 2 . Ei au raportat că într – un model de otrăvire CO, administrarea de hidrogen  molecular H2 in ser a scăzut activarea de gliale, producerea de citokine, stresul oxidativ și  producția caspazei 3 și 9  precum șia inhibat  moartea celulelor nervoase.

Este cunoscut faptul că stresul oxidativ provoaca deficiente de celule nervoase.  )  Consumul de apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular H 2  inhibă stresul oxidativ bogat și prin aceasta inhibă declanșarea leziuni ale creierului induse de stres oxidativ.  )

Leziuni cerebrale hipoxice cauzate de asfixie, encefalopatie hipoxica ischemica, asfixie neonatală și alte evenimente similare mediate de hipoxie sunt afecțiuni clinice comune în urgențe medicale. 

Hidrogen molecular H 2  a fost găsit că inhibă moartea celulelor  in vitro  in model de hipoxie / reoxygenare folosind celule hipocampice de șoarece imortalizate (HT-22)  

Hidrogenul molecular H 2  a crescut Akt fosforilată (p-Akt) și leucemia cu celule B / limfom-2 (BCL-2), în timp ce acesta a scăzut Bax și caspazei-3.  )  

În ultimii ani, s – a constatat că familia microRNA-200 (miR-200)  regleaza stresul oxidativ.  ) Inhibarea miR-200 suprima H /R moartea celulelor indusă , reducand producția de ROS și MMP. Hidrogen molecular H 2    a suprimat expresia H /R indusă de miR-200. 

 

In Japonia, un dublu – orb , randomizat , controlat pentru sindromul post – stop cardiac a început din 2017 (Tabelul  1 ).

 

produse ce creeaza H2 – hidrogen  molecular in apa ionizata alcalina potabila:

purificator aparat apa hidrogenata / ionizator apa AlkaViva Vesta H2  

purificator-ionizator-apa-AlkaViva-Vesta-H2
purificator-ionizator-apa-AlkaViva-Vesta-H2

 
CLICK AICI PENTRU A VEDEA MAI MULTE DESPRE ionizatorul apa ALKAVIVA VESTA H2, cel mai puternic purificator,ionizator si generator de apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen diatomic molecular H2 CounterTop

 

 purificator aparat apa hidrogenata / ionizator apa AlkaViva Delphi  H2 – sub-chiuveta

purificator-ionizator-apa-AlkaViva-Delphi-H2
purificator-ionizator-apa-AlkaViva-Delphi-H2

 

CLICK AICI PENTRU A VEDEA MAI MULTE DESPRE ionizatorul apa  ALKAVIVA Delphi  H2 – Vesta H2 in varianta SUB CHIUVETA

purificator aparat apa hidrogenata / ionizator apa AlkaViva-Athena H2 

purificator aparat apa hidrogenata / ionizator apa Alkaviva Athena H2
purificator aparat apa hidrogenata / ionizator apa Alkaviva Athena H2

AlkaViva Athena H2,  purificator de apa, ionizator și generator de apa cu  hidrogen diatomica molecular H2  va produce aproximativ 20% mai puțin -ORP și H2 decât purificator,ionizator si generator de apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen diatomic molecular H2 , AlkaViva Vesta H2   *.

purificator-ionizator-apa-AlkaViva-Melody-II-H2

purificator-ionizator-apa-AlkaViva-Melody-II-H2
purificator-ionizator-apa-AlkaViva-Melody-II-H2

purificator-ionizator-apa-AlkaViva-Melody-II-H2  va produce aproximativ 40% – 50% mai puțin  -ORP și H2 comparativ cu un purificator,ionizator si generator de apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen diatomic molecular H2 , AlkaViva Vesta H2   *.

* În funcție de sursa de apă

*DELPHI H2 este Vesta H2 in varianta sub chiuveta

 

 

 
 

Abrevieri

AD Boala Alzheimer
APP proteina precursoare a amiloidului
ATP adenozin trifosfat
BBB bariera hematoencefalică
CA1 Cornet d’Armon 1
CLP ligatura cecală și puncție
CO monoxid de carbon
ICH hemoragie intracerebrală
LRP receptor legate de lipoproteine ​​cu proteină
MCAO ocluzia arterei cerebrale medii
miR-200 microRNA-200
MMP matricea metaloproteinazei
PD boala Parkinson
ROS specii reactive de oxigen
SAH hemoragie subarahnoidiană
TBI leziuni cerebrale

 

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5525017/
Kenji Dohi , 1, 2, 3,  Kazue Satoh ,  Kazuyuki Miyamoto ,  Shusuke Momma ,  Kenichiro Fukuda ,  Ryo Higuchi ,  Hirokazu Ohtaki , 4  și  Williams Banks 3

Referințe

1.  Huang WJ, Zhang X, Chen WW. Rolul stresului oxidativ in boala Alzheimer. Biomed Rep.  2016; 4 : 519-522. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
2.  Dohi K, Ohtaki H, Nakamachi T, și colab. GP91 PHOX (NOX2) în microgliile clasic activat exacerbează leziuni cerebrale traumatice. J Neuroinflammation. 2010; 7 : 41. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
3.  Lewen A, Matz P, Chan PH. Căi de radicali liberi în prejudiciu SNC. J neurotraumatismele. 2000; 17 : 871-890. PubMed ]
4.  Gaetani P, Pasqualin A, Rodriguez y Baena R, Borasio E, stres Marzatico F. oxidativă în creierul uman după hemoragie subarahnoidiană. J Neurosurg. 1998; 89 : 748-754. PubMed ]
5.  Erickson MA, Dohi K, Bănci WA. Neuroinflammation: o cale comuna in bolile SNC mediate la bariera hematoencefalică. Neuroimmunomodulation. 2012; 19 : 121-130. PMC articol gratuit ] PubMed ]
6.  Dohi K, Miyamoto K, Fukuda K, și colab. Statutul stresului oxidativ sistemic in timpul hipotermie terapeutice la pacienții cu sindrom post-stop cardiac. Med Longev Cell oxid. 2013; 2013 : 562429. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
7.  Yoritaka A, Hattori N, Uchida K, Tanaka M, Stadtman ER, detectie Mizuno Y. imunohistochimică aductilor 4-hydroxynonenal proteine in boala Parkinson. Proc Natl Acad Sci US A.  1996; 93 : 2696-2701. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
8.  Dohi K, Satoh K, Mihara Y, și colab. Alcoxil activitate radical-neutralizantă edaravonă la pacienții cu leziuni cerebrale traumatice. J neurotraumatismele. 2006; 23 : 1591-1599. PubMed ]
9.  Dohi K, Satoh K, Nakamachi T, și colab. Are edaravonă (MCI-186) acționează ca un antioxidant și un neuroprotector la leziuni traumatice ale creierului experimental? Antioxid Redox Signal. 2007; 9 : 281-287. PubMed ]
10.  Kaneko T, Kasaoka S, Nakahara T, și colab. Eficacitatea mai scăzută temperatură țintă hipotermie terapeutice la pacienții cu sindrom post-stop cardiac , cu un interval de resuscitare de ≤30 min. J terapie intensiva. 2015; 3 : 28. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
11.  Silveira RC, Procianoy RS. Terapia Hipotermia pentru nou – nascuti cu encefalopatie hipoxic ischemică. J Pediatr (Rio J) 2015; 91 (6 Suppl 1) : S78-S83. PubMed ]
12.  Ohsawa I, Ishikawa M, Takahashi K, și colab. Hidrogenul actioneaza ca un antioxidant terapeutic prin reducerea selectivă a radicalilor de oxigen citotoxice. Nat Med. 2007; 13 : 688-694. PubMed ]
13.  Ohta S. Moleculară hidrogen ca gaz medical preventiv și terapeutic: inițierea, dezvoltarea și potențialul de medicina hidrogenului. Pharmacol Ther. 2014; 144 : 1-11. PubMed ]
14.  Terasaki Y, Ohsawa I, Terasaki M, și colab. Terapia de hidrogen atenueaza indusă de iradiere leziuni pulmonare prin reducerea stresului oxidativ. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2011; 301 : L415-L426. PubMed ]
15.  Yang Y, Li B, C Liu, și colab. Bogat în hidrogen ser fiziologic protejează imunocite de apoptoza indusă de radiații. Med Sci Monit. 2012; 18 : BR144-BR148. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
16.  Zeng K, Huang H, Jiang XQ, Chen XJ, efecte Huang W. protectoare ale hidrogenului asupra renale ischemie / reperfuzie la șobolani. Sichuan Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 2014; 45 : 39-42. (în chineză) PubMed ]
17.  Ichihara M, Sobue S, Ito M, Ito M, Hirayama M, Ohno K. Benefic efectele biologice și mecanismele care stau la baza de hidrogen molecular – revizuire cuprinzătoare a 321 articole originale. Med Gaz Res. 2015; 5 : 12. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
18.  Dohi K, Kraemer BC, Erickson MA, și colab. Hidrogen molecular în apă potabilă protejează împotriva schimbărilor neurodegenerative induse de leziuni cerebrale traumatice. PLoS One. 2014; 9 : e108034. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
19.  Chen CH, Manaenko A, Zhan Y, și colab. Hidrogenul gazos redus de transformare acuta hemoragica consolidata hiperglicemie intr – un model de ischemie focală la șobolan. Neuroscience. 2010; 169 : 402-414. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
20.  Yang Y, Estrada EY, Thompson JF, Liu W, Rosenberg GA. Perturbarea metaloproteinazei mediată de proteine de joncțiune strans la nivelul vaselor cerebrale este inversată de inhibitor sintetic al metaloproteinazei de matrice în ischemia focală la șobolan. J Cereb Blood Flow Metab. 2007; 27 : 697-709. PubMed ]
21.  Ji Q, Hui K, Zhang L, Sun X, Li W, Duan M. Efectul ser bogat în hidrogen asupra creierului șobolanilor cu ischemie tranzitorie. J Surg Res. 2011; 168 : E95-E101. PubMed ]
22.  Domoki F, Oláh O, Zimmermann A, et al. Hidrogenul este neuroprotector și păstrează reactivitatea cerebrovasculară la porcii nou – născuți asfixiate. Pediatr Res. 2010; 68 : 387-392. PubMed ]
23.  Nagatani K, Nawashiro H, Takeuchi S, et al. Siguranța administrării intravenoase a fluidului îmbogățit cu hidrogen la pacienții cu ischemie cerebrală acută: studiile clinice inițiale. Med Gaz Res. 2013; 3 : 13. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
24.  Song G, Li M, Sang H, și colab. Apă bogate în hidrogen scade nivelul seric de LDL-colesterol și îmbunătățește funcția HDL la pacienții cu sindrom metabolic potențial. J Lipid Res. 2013; 54 : 1884-1893. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
25.  Kajiyama S, Hasegawa G, Asano M, și colab. Suplimentarea apei bogate în hidrogen îmbunătățește metabolismul lipidelor și glucozei la pacienții cu diabet zaharat de tip 2 sau toleranță scăzută la glucoză. Res Nutr. 2008; 28 : 137-143. PubMed ]
26.  Nakao A, Toyoda Y, Sharma P, Evans M, Guthrie N. Eficacitatea apei bogat în hidrogen asupra statusului antioxidant al subiecților cu potențial studiu metabolic pilot sindromul-o etichetă deschisă. J Clin Nutr Biochem. 2010; 46 : 140-149. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
27.  Hashimoto M, Katakura M, Nabika T, și colab. Efectele apei bogate în hidrogen asupra anomaliilor un șobolan SHR.Cg-Leprcp / NDmcr – un model de sindrom metabolic. Sobolan Med Gaz Res. 2011; 1 : 26. PMC articol gratuit ] PubMed ]
28.  Manaenko A, Lekic T, Ma Q, Zhang JH, Tang J. Hidrogenul inhalare catarg ameliorata mediată celular leziuni cerebrale după hemoragie intracerebrală la șoareci. Crit Care Med. 2013; 41 : 1266-1275. PMC articol gratuit ] PubMed ]
29.  Zhuang Z, Zhou ML, Tu WC, și colab. Ser bogat în hidrogen alină leziuni cerebrale precoce , prin reducerea stresului oxidativ și edem cerebral hemoragie subarahnoidiană experimentale la iepuri. BMC Neurosci. 2012; 13 : 47. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
30.  Zhuang Z, Sun XJ, Zhang X, și colab. Nucleare cale factor-kB / Bcl-XL este implicată în efectul protector al ser bogat în hidrogen asupra creierului ca urmare hemoragie subarahnoidiană experimentale la iepuri. J Neurosci Res. 2013; 91 : 1599-1608. PubMed ]
31.  Hong Y, Shao A, Wang J, și colab. Efectul neuroprotector al ser bogat în hidrogen impotriva deteriorarii neurologice si apoptoza in traumatisme cerebrale precoce în urma hemoragie subarahnoidiană: posibil rol al căii de semnalizare Akt / GSK3p. PLoS One. 2014; 9 : e96212. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
32.  Takeuchi S, Mori K, Arimoto H, și colab. Efectele perfuziei intravenoase de lichid bogat în hidrogen combinat cu perfuzie intra-canaliculele sulfat de magneziu în aneurysmal severe hemoragie subarahnoidiană: protocol de studiu pentru un studiu randomizat controlat. BMC Neural. 2014; 14 : 176. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
33.  Ji X, Liu W, Xie K, și colab. Efectele benefice ale hidrogenului gazos într – un model de sobolan de leziuni cerebrale traumatice prin reducerea stresului oxidativ. Brain Res. 2010; 1354 : 196-205. PubMed ]
34.  Eckermann JM, Chen W, Jadhav V, și colab. Hidrogenul este neuroprotector impotriva leziuni cerebrale induse chirurgical. Med Gaz Res. 2011; 1 : 7. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
35.  Chen C, Chen Q, Mao Y, și colab. Soluție salină bogat în hidrogen protejează împotriva leziunilor măduvei spinării la șobolani. Neurochem Res. 2010; 35 : 1111-1118. PubMed ]
36.  Huang Y, Xie K, Li J, și colab. Efectele benefice ale hidrogenului gazos impotriva maduvei spinarii ischemie-reperfuzie la iepuri. Brain Res. 2011; 1378 : 125-136. PubMed ]
37.  Zhou L, Wang X, Xue W, și colab. Efectele benefice ale ser bogat în hidrogen împotriva măduvei spinării ischemie-reperfuzie la iepuri. Brain Res. 2013; 1517 : 150-160. PubMed ]
38.  Gofton TE, Young GB. -Sepsis asociate encefalopatie. Nat Rev Neural. 2012; 8 : 557-566. PubMed ]
39.  Liu L, Xie K, Chen H, și colab. Inhalarea de gaz de hidrogen atenueaza leziuni ale creierului la soareci cu ligatura cecală și puncție prin inhibarea neuroinflammation, stresul oxidativ și apoptoza neuronală. Brain Res. 2014; 1589 : 78-92. PubMed ]
40.  Nakano T, Kotani T, Mano Y, și colab. Administrarea materno hidrogen molecular la șoarece leziuni cerebrale fetale induse de lipopolizaharide. J Clin Nutr Biochem. 2015; 57 : 178-182. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
41.  Shen MH, Cai JM, Sun Q, și colab. Efectul neuroprotector al ser bogat în hidrogen în intoxicație acută cu monoxid de carbon. CNS Neurosci Ther. 2013; 19 : 361-363. PubMed ]
42.  Sun Q, Cai J, Zhou J, și colab. Moleculară saline bogate în hidrogen reduce sechele neurologice întârziat în toxicitate monoxidului de carbon experimental. Crit Care Med. 2011; 39 : 765-769. PubMed ]
43.  Nagata K, Nakashima-Kamimura N, Mikami T, Ohsawa I, Ohta S. Consumul de hidrogen molecular previne dereglările induse de stres la sarcini de învățare dependente de hipocampus in timpul imobilizării fizice cronice la șoareci.  Neuropsychopharmacology. 2009; 34 : 501-508. PubMed ]
44.  Wei R, Zhang R, Xie Y, Shen L, Chen F. MOLECULAR hidrogen suprima hipoxie / moartea celulelor indusă de reoxigenare în neuronii hipocampici prin reducerea stresului oxidativ. Cell Physiol Biochem. 2015; 36 : 585-598. PubMed ]
45.  Schapira AH. Mitocondriile în etiologia și patogeneza bolii Parkinson. Lancet Neural. 2008; 7 : 97-109. PubMed ]
46.  Ito M, Hirayama M, Yamai K, și colab. Apa potabilă hidrogen molecular și expunerea intermitentă hidrogen gaz, dar nu lactuloza sau expunere continuă de hidrogen gazos, pentru a preveni 6-hydorxydopamine indusă bolii Parkinson la șobolani. Med Gaz Res. 2012; 2 : 15. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
47.  Fujita K, Seike T, Yutsudo N, și colab. Hidrogenul in apa potabila reduce dopaminergice pierderii neuronale în modelul de șoarece 1-metil-4-fenil-1,2,3,6-tetrahidropiridină bolii Parkinson. PLoS One. 2009; 4 : e7247. PMC articol gratuit ]  PubMed]
48.  Fu Y, Ito M, Fujita Y, și colab. Hidrogenul molecular este protector împotriva degenerării nigrostriatal 6-hidroxidopamină indusă într – un model de șobolan al bolii Parkinson. Neurosci Lett. 2009; 453 : 81-85. PubMed ]
49.  Yoritaka A, Takanashi M, Hirayama M, Nakahara T, Ohta S, studiul Hattori N. pilot de hidrogen molecular H 2  terapie in boala Parkinson: un studiu dublu-orb , randomizat , controlat cu placebo. Mov Dizord. 2013; 28 : 836-839. PubMed ]
50.  Yoritaka A, Abe T, Ohtsuka C, și colab. Un studiu randomizat , dublu-orb , multi-centru de apă hidrogen molecular pentru boala Parkinson: caracteristicile de protocol și de bază. BMC Neural. 2016; 16 : 66. PMC articol gratuit ] PubMed ]
51.  Wang C, Li J, Liu Q, și colab. Moleculară saline bogate în hidrogen reduce stresul oxidativ si inflamatia prin inhiba JNK și activarea NF-kB într – un model de sobolan de boala amyloid-beta-induse Alzheimer. Neurosci Lett. 2011; 491 : 127-132. PubMed ]
52.  Jucker M, Walker LC. Însămânțarea proteină patogenă în boala Alzheimer și alte tulburări neurodegenerative. Ann Neural. 2011; 70 : 532-540. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
53.  Li J, Wang C, Zhang JH, Cai JM, Cao YP, Sun XJ. Moleculară saline bogate în hidrogen îmbunătățește funcția de memorie într – un model de șobolan al bolii Alzheimer amyloid-beta-induse prin reducerea stresului oxidativ. Brain Res. 2010; 1328 : 152-161. PubMed ]
54.  Gu Y, Huang CS, Inoue T, și colab. Apa potabila hidrogen molecular ameliorata tulburari cognitive la soareci accelerat-senescență. J Clin Nutr Biochem. 2010; 46 : 269-276. PMC articol gratuit ]  PubMed ]
55.  Liu C, Kurokawa R, Fujino M, Hirano S, Sato B, Li XK. Estimarea concentrației hidrogenului molecular în țesutul șobolanului folosind un măsurător tub etanș la aer după administrarea de hidrogen molecular prin diverse căi. Sci Rep.  2014; 4 : 5485. PMC articol gratuit ]  PubMed ]

efecte apa hidrogenata in INSUFICIENTA COGNITIVA USOARA

Abstract

Fundal:

Stresul oxidativ este unul dintre factorii cauzali în patogeneza bolilor neuro-degenerative incluzând  afectarea cognitivă ușoară (MCI) și demență. Am raportat anterior că hidrogenul molecular (H2) acționează ca un antioxidant terapeutic și preventiv.

Obiectiv:

Evaluăm efectele consumului de apă hidogenata H2 (apă infuzată cu hidrogen molecula H2) asupra șoarecilor cu model de stres oxidativ și subiecților umani  cu MCI.

metode:

Șoarecii transgenici care exprimă o formă dominant-negativă de aldehidă dehidrogenază 2 au fost folosiți ca model de demență. Șoarecii cu stres oxidativ sporit li s-a permis să bea apă hidrogenata H2. Pentru un studiu clinic controlat cu placebo, dublu-orb, dominat de rang, 73 de subiecți umani cu MCI au băut ~ 300 ml de apă hidrogenata H2 (grupa H2) sau apă placebo (grup de control) pe zi, și scala cognitivă a evaluării bolii Alzheimer Scorurile (ADAS-cog) au fost determinate după 1 an.

Rezultate:

La șoareci, consumul de apă hidrogenizata H2 a scăzut markerii de stres oxidativ și a suprimat declinul deficienței de memorie și neurodegenerare. Mai mult, durata medie de viață a grupului apa hidrogenata H2-apă a fost mai lungă decât cea a grupului de control. La subiecții MCI, deși nu a existat o diferență semnificativă între H2 și grupurile de control în scorul ADAS-cog după 1 an, purtătorii geno-ului de apolipoproteină E4 (APOE4) din grupul apa hidrogenata H2 au fost îmbunătățiți semnificativ pe ADAS-cog total punctaj și scor de reamintire a cuvântului (unul dintre sub-scorurile din scorul ADAS-cog).

Concluzie:

H2-apa hidrogenata poate avea un potențial pentru suprimarea demenței într-un model de stres oxidativ și în purtătorii APOE4 cu MCI.

1. INTRODUCERE

Stresul oxidativ este unul dintre factorii cauzali în patogeneza bolilor neurodegenerative majore incluzând boala Alzheimer (AD), deficiența cognitivă ușoară (MCI) și boala Parkinson (PD) [ 1 , 2 ]. Mai mult, genotipul apolipoproteinei E4 (APOE4) este un risc genetic pentru AD, iar creșterea stresului oxidativ la purtătorii APOE4 este considerată ca unul dintre modificatorii riscului [ 3 ].

Pentru a explora antioxidanții alimentari eficienți pentru a atenua neurodegenerarea dependentă de vârstă, poate fi util să se construiască șoarec-model în care fenotipurile AD ar progresa într-o manieră dependentă de vârstă, ca răspuns la stresul oxidativ. Am construit șoareci transgenici DAL101 care exprimă un polimorfism al genei aldehidă dehidrogenază mitocondrială 2 (ALDH2 * 2) [ 4 ]. ALDH2 * 2 este responsabil pentru o deficiență în activitatea ALDH2 și este specific asiaticilor din Nord-Est [ 5 ]. Am raportat anterior că deficiența de ALDH2 este un factor de risc pentru AD-ul cu debut tardiv la populația japoneză [ 6 ], care a fost reprodus prin studii chineze și coreene în populațiile respective [ 7 , 8 ]. Șoarecii DAL101 au prezentat o capacitate scăzută de a detoxifica 4-hidroxi-2-nonenal (4-HNE) în neuronii corticali și, prin urmare, o neurodegenerare dependentă de vârstă, declin cognitiv și o durată de viață scurtată [ 4 ].

Am propus că hidrogenul molecular (H 2 ) are potențial ca antioxidant nou [ 9 ] și numeroase studii au sugerat puternic potențialul său pentru aplicații preventive și terapeutice [ 10 – 12 ]. Pe lângă experimentele extinse pe animale, au fost raportate peste 25 de studii clinice pe oameni care examinează eficacitatea H2, [ 11 , 12 ] inclusiv studii clinice dublu-orb. Pe baza acestor studii, domeniul medical cu hidrogen crește rapid.

Există mai multe metode de administrare a hidrogenului molecular H2, inclusiv inhalarea gazului de hidrogen (H 2 -gas), apă potabilă avand dizolvat hidrogen H 2 (apă hidrogenta/hidrogenizata H 2 ) și injectarea de soluție salină dizolvată cu H2 (soluție salină bogată în hidrogen)13 ]. Băutul de apă hidrogenata H 2 a prevenit deficiențele cronice induse de stres în învățare și memorie, prin reducerea stresului oxidativ la șoareci [ 14 ] și protejează celulele neuronale prin stimularea expresiei hormonale a ghrelinei15 ]. În plus, injectarea de soluție salină bogată în hidrogen a îmbunătățit funcția de memorie într-un model de șobolan din demența indusă de amiloid β prin reducerea stresului oxidativ [ 16 ].Mai mult decât atât, inhalarea de hidrogen în timpul resuscitării normoxice a îmbunătățit rezultatul neurologic la un model de șobolan de stop cardiac independent de gestionarea țintelor  [ 17 ].

În acest studiu, am examinat dacă consumul de apă hidrogenata H 2 ar putea suprima deteriorarea memoriei dependente de îmbătrânire indusă de stresul oxidativ la șoarecii DAL101. În continuare, într-un studiu randomizat controlat cu placebo dublu-orb, am investigat dacă H 2- apă hidrogenata ar putea întârzia progresia MCI, astfel cum a fost evaluată de scorurile de pe scala de cotație a evaluării bolii Alzheimer (scăderea ADAS-cog) [ 18 , 19 ] de la valoarea inițială la 1 an. Am constatat o îmbunătățire semnificativă a cogniției la 1 an la purtătorii cu genotipul APOE4 în grupul apa hidrogenata H 2 folosind scoruri sub și total ADAS-cog.

2. MATERIALE ȘI METODE

2.1. Aprobarea etică și acordul de participare

Acest studiu asupra animalelor a fost aprobat de Comitetul de îngrijire și utilizare a animalelor de la Școala Medicală Nippon. Metodele au fost realizate „în conformitate” cu instrucțiunile și reglementările relevante.

Protocolul de studiu clinic a fost aprobat de comitetele de etică ale Universității din Tsukuba și înregistrat în rețeaua de informații medicale a spitalului universitar (UMIN) ca UMIN000002218 pe 17 iulie 2009 la https://upload.umin.ac.jp/cgi-open -bin / ctr / ctr.cgi? function = history & action = list & type = sumar & recptno = R000002-725 & language = J.

Participanții au fost înrolați începând cu iulie 2009. Toți pacienții au oferit consimțământ scris scris înainte de investigațiile de cercetare, care au fost efectuate conform Declarației de la Helsinki și revizuirile ulterioare.

2.2. Șoareci transgenici DAL101

Șoarecii transgenici (DAL101) care exprimă o transgenă care conține o versiune de mouse de ALDH2 * 2 au fost construiți așa cum s-a descris anterior [ 4 ]. Deoarece numărul de șoareci utilizați pentru fiecare experiment nu a fost consecvent din cauza unei dificultăți de reproducere, a fost specificat numărul șoarecilor utilizați. Toți șoarecii au fost ținuți într-un ciclu lumină / întuneric de 12 ore cu acces ad libitumla alimente și apă. Examinatorii au efectuat experimente într-o manieră orbită. Deoarece nu s-a observat declin semnificativ la deficiența cognitivă la vârsta de 18 luni la șoarecii de tip sălbatic cu același fundal genetic (C57BL / 6), [ 4 ] efectele H 2- apă nu au fost evaluate în acest studiu.

2.3. Apa cu hidrogen

Pentru experimente pe animale, apa hidrogenata H 2 saturată a fost preparată așa cum s-a descris anterior [ 14 ]. Pe scurt, hidrogen molecular H2 a fost dizolvat în apă sub presiune înaltă (0,4 MPa) până la un nivel suprasaturat, iar apa H 2saturată a fost depozitată sub presiune atmosferică într-o pungă de aluminiu fără spațiu. Ca un control, apa hidrogenata H2 a fost degazată complet prin agitare blândă timp de o zi. Șoarecii li s-a dat apă liber folosind vase de sticlă închise echipate cu o linie de ieșire care conține doi rulmenți cu bile, care împiedicau apa să fie degazată. Vasul a fost reumplut cu H2-apă hidrogenata 6 zile pe săptămână la 14:00. Concentrația hidrogen H2 a fost încă mai mare de 0,3 mM în ziua următoare.

Pentru acest studiu clinic, apa hidrogenata H 2 disponibilă în comerț a fost un cadou de la Blue Mercury, Inc. (Tokyo, Japonia). H2-apa hidrogenata  (500 ml) a fost împachetată într-o pungă de aluminiu fără spațiu pentru a menține concentrația de hidrogen H2 și sterilizată la 80 ° C timp de 30 min. Concentrația de hidrogen H2 a fost măsurată folosind un senzor de hidrogen (Unisense, Aarhus N, Danemarca) și a fost utilizată dacă valoarea a fost mai mare de 0,6 mM. Apa placebo ambalată într-un pachet identic (500 ml) a fost furnizată de Blue Mercury Inc. Această companie nu a jucat niciun rol în colectarea datelor, gestionarea, analiza sau interpretarea datelor.Un pachet cu 500 ml placebo sau H2-apă hidrogenata pe zi a fost furnizat după ce au arătat pachete goale anterioare, prin care ratele de conformitate auto-raportate în grupul de intervenție au fost calculate ca volumul de H2-apă hidrogenata la 1 an.

2.4. Măsurarea stresului oxidativ

Ca marker de stres oxidativ, 8-OHdG [ 20 ] a fost măsurat folosind probe de urină, care au fost colectate între 9:00 și 10:00 am, așa cum s-a descris anterior [ 21 ], prin utilizarea unui test imuno-enzimatic legat de enzimă (New 8-OHdG verificați; Institutul japonez pentru controlul îmbătrânirii, Shizuoka, Japonia).Valorile au fost normalizate prin concentrația de creatinină urinară, care a fost testată folosind un kit standard (Wako, Kyoto, Japonia). Ca un marker de stres oxidativ suplimentar în creier, MDA acumulată a fost determinată folosind un kit de analiză Bioxytech MDA-586 (Percipio Biosciences, CA, SUA).Nivelurile de malondialdehidă (MDA) au fost normalizate față de concentrațiile de proteine.

2.5. Măsurarea deprecierii memoriei: sarcină de recunoaștere a obiectelor

Abilitățile de învățare și memorie au fost examinate folosind sarcina de recunoaștere a obiecțiilor (ORT) [ 4 ]. Un șoarece a fost obișnuit într-o cușcă timp de 4 ore, iar apoi două obiecte în formă diferită au fost prezentate soarecelui-ului timp de 10 min ca antrenament. Numărul de ori de explorare și / sau adulmecare a fiecărui obiect a fost contabilizat pentru primele 5 minute (test de antrenament). Frecvențele (%) la testul de antrenament au fost considerate ca fiind mediul de bază. Pentru testarea reținerii memoriei după 1 zi, unul dintre obiectele originale a fost înlocuit cu unul nou, cu o formă diferită, apoi timpii de explorare și / sau adulmecare au fost contorizați pentru primele 5 minute (test de retenție). Când șoarecii ar pierde abilitățile de învățare și de memorie, frecvențele de explorare și / sau adulmecare a fiecărui obiect ar trebui să fie egale (aproximativ 50%) în sesiunea de antrenament, ceea ce indică faptul că șoarecii au arătat un interes similar pentru fiecare obiect din cauza lipsei de memorie pentru obiecte. Abilitățile de învățare și memorie au fost evaluate ca scăderea frecvențelor (%) la testul de retenție din fiecare fundal (testul de formare).

2.6. Măsurarea deprecierii memoriei: sarcină de evitare pasivă (PA)

Aparatul era format din două compartimente, unul luminos și celălalt întunecat, despărțite de o ușă glisantă verticală [ 22 ]. În ziua 1, am plasat inițial un soarece în compartimentul luminos timp de 20 de secunde.După deschiderea ușii, soarecele putea intra în compartimentul întunecat (șoarecii preferă instinctiv să fie în întuneric). În ziua 2, soricelul a fost din nou plasat în secțiunea de lumină pentru a permite soarecelui să se deplaseze în secțiunea întunecată. După ce soarecele a intrat în compartimentul întunecat, ușa a fost închisă. După 20 de secunde, soarecele/mouse-ul a primit un șoc electric de 0,3 mA timp de 2 secunde. Șoarecelui i s-a permis să se recupereze timp de 10 secunde, apoi a fost returnat în cușca de acasă. În ziua 3, la 24 de ore de la șoc, mouse-ul a fost din nou plasat în secțiunea de lumină, cu ușa deschisă pentru a permite mouse-ului să se deplaseze în secțiunea întunecată. Am examinat timpul de latență pentru a intra prin ușă.Abilitățile de învățare și memorie au fost evaluate ca scăderea timpilor de latență după șocul electric din fiecare fundal (înainte).

2.7. Imunizarea regiunii hipocampale CA1

Pentru a examina pierderea neuronală și activarea gliala, regiunea hipocampului a fost colorată cu un anticorp anti-NeuN specific neuronului piramidal (clonă A60; Merck Millipore, Darmstadt, Germania), o proteină acidă fibrilă anti-glială anti-glială specifică astrocitelor (anti-GFAP) anticorp (Thermo Scientific, MA, SUA) sau un anticorp anti-IbaI specific microglia (Wako). Șoarecii au fost perforați transcardial pentru a fi fixați cu 4% paraformaldehidă în soluție salină tamponată cu fosfat (PBS) sub anestezie, iar creierul lor a fost crioprotectat cu zaharoză 30%, iar apoi creierul înghețat a fost secționat la o grosime de 8 μm. După incubarea cu fiecare anticorp primar, secțiunile au fost tratate cu anticorpi secundari (Vector Laboratories, CA, SUA) și imunereactivitatea lor a fost vizualizată prin metoda complexului avidin-biotină (Vector Laboratories).

2.8. Subiecte ale studiului clinic

Acest studiu a fost un studiu randomizat, dublu-orb, controlat cu placebo, efectuat ca parte a proiectului Tone, un studiu epidemiologic în desfășurare efectuat în Tone Town, Ibaraki, Japonia, așa cum este descris în detaliu anterior [ 23 , 24 ]. Acest oraș este situat la aproximativ 40 km nord-est de centrul Tokyo și este format din 22 de districte. Studiul de bază al proiectului Tone a cuprins 1.032 de participanți în iulie 2009, iar subiecții studiului au fost recrutați de la acești participanți.

Criteriile de eligibilitate au vârsta de 67 de ani sau mai mult, putând da consimțământul scris în scris pentru participarea la studiul de față, cu un diagnostic de MCI, putând respecta următoarea cerință: o bună conformitate cu consumul de apă; participarea la examenele programate pentru evaluare; păstrarea unui jurnal de înregistrare a consumului de apă, cu un scor ischemic Hachinski modificat de 4 sau mai puțin și un scor de scădere a depresiunii geriatrice de 15 itemi de 6 sau mai puțin. Pe scurt, cu 3 luni înainte de acest studiu clinic, toți participanții au fost supuși unei evaluări de grup care a utilizat un set de 5 teste care au măsurat următoarele domenii cognitive: atenție; memorie; funcția visuospatială; limba; și raționamentul descris anterior [ 25 ]. Deficiență obiectivă în cel puțin 1 domeniu cognitiv bazat pe media scorurilor la măsurile neuropsihologice din acel domeniu și 1 reducere SD folosind corecții normative pentru vârstă, ani de educație și sex.

Criteriile de excludere aveau criteriile „Manualul de diagnostic și statistic al tulburărilor mintale (DSM) -IV TR” pentru boli demențiale, boli grave sau instabile, un istoric în ultimii 5 ani de boli infecțioase grave care afectează creierul și / sau boli maligne , un istoric de consum de alcool sau droguri sau dependență (de DSM-IV TR) în ultimii 5 ani și care a primit orice tip de medicamente anti-Alzheimer și inițierea recentă (în termen de 4 săptămâni) a medicamentelor care afectează sistemul nervos central. Când scorul examenului de mini-mental mental (MMSE) [ 26 ] a fost mai mic de 24, subiecții au fost excluși.

În acest studiu, subiecții au fost repartizați aleatoriu fie unui grup de intervenție, care a primit H2-apă hidrogenata în fiecare zi timp de 1 an, fie unui grup de control, care a primit apă placebo. Secvența de alocare a fost determinată de numere aleatorii generate de computer care au fost ascunse investigatorilor și subiecților.Doctorii. Nakajima și Ikejima au generat secvența de alocare aleatorie, au înscris participanții și au atribuit participanților la intervenții. Toți participanții și furnizorii de îngrijiri au fost mascați orb.

În protocolul inițial, ne-am propus să administrăm H2-apă hidrogenata timp de 2 ani și să evaluăm rezultatele secundare; cu toate acestea, a trebuit să oprim proiectul în 2011 prin dezastrul Tsunami și nu am putut obține datele de 2 ani și rezultatele secundare.

Genotipul APOE4 a fost determinat așa cum este descris [ 25 ].

2.9. Considerații statistice

Toate analizele statistice au fost efectuate de un biostatistician academic folosind software-ul SAS versiunea 9.2 (SAS Institute Inc, Cary, NC, SUA). Rezultatele au fost considerate semnificative la p <0.05.

Pentru compararea a două grupuri în abilitățile de învățare și memorie, și planurile de viață, t -testul Student fără două perechi a fost utilizat pentru compararea grupului apa hidrogenata H 2 c u grupul de control. Pentru celelalte experimente pe animale, s-a aplicat analiza unidirecțională a varianței (ANOVA) cu analiza post-Tukey-Kramer sau Dunnett post-hoc, dacă nu se menționează altfel.

Pentru studiul clinic, am planificat să recrutăm un număr total de 120 de pacienți, ceea ce ar oferi 90% putere pentru a detecta o dimensiune a efectului de 0,6 folosind un test pe două fețe cu un nivel de semnificație de 5%, dar dimensiunea reală a eșantionului pentru analiza primară a fost 73, ceea ce a dus la o putere de 70% în același cadru. Punctele finale au fost scoruri în versiunea japoneză a ADAS-cog la 1 an, iar modificările au fost evaluate prin testul lui Mann-Whitney (analiză non-parametrică), precum și testul tal lui Student (analiza parametrică).

3. REZULTATE

3.1. Stresul oxidativ redus de apă hidrogenata la șoarecii DAL

Șoarecii masculi DAL101 au primit H2 – apa hidrogenata sau apă de control pentru a bea ad libitum de la vârsta de 1 lună și au continuat până la vârsta de 18 luni. Grupul H2-apă hidrogenata DAL101 a arătat o scădere semnificativă a nivelului unui marker de stres oxidativ, 8-hidroxi-2′-dezoxiguanozină (8-OHdG) [ 20 ] la vârsta de 14 luni (supliment. Fig. S1A ). Mai mult, șoarecii DAL101 au crescut tensiunea oxidativă în creier, măsurată de nivelul MDA ca un marker alternativ de stres oxidativ, iar H2-apă hidrogenata a arătat o recuperare semnificativă a acestui nivel crescut de MDA la șoarecii DAL101 (Suppl. Fig. S1B ).

3.2. Apa de hidrogen a suprimat o scădere a deprecierii învățării și a memoriei

Am examinat abilitățile de învățare și memorie folosind ORT [ 4 ]. Așa cum s-a descris în MATERIALE ȘI METODE , abilitățile de învățare și memorie au fost evaluate ca scăderea frecvenței (%) la testul de retenție din fiecare fundal (test de formare). Șoarecii au primit apă sau apă hidrogenata H 2 de la vârsta de 1 lună. La vârsta de 14 luni, grupul H 2 apa hidrogenata a memorat în mod semnificativ obiectele originale și a arătat preferința pentru obiectul nou mai mult decât grupul de control (Fig. 1A 1A în vârstă de 14 luni ).

Un fișier extern care conține o imagine, ilustrare etc. Numele obiectului este CAR-15-482_F1.jpg

Apa cu hidrogen a prevenit declinul cognitiv. H2-apa a fost furnizată de la vârsta de 1 lună ( A, C ) și de la vârsta de 8 luni ( B ). Șoarecii au fost supuși primei sarcini de recunoaștere a obiecțiilor (ORT) la vârsta de 14 luni ( A, B, 14 luni ) și a doua ORT la vârsta de 18 luni ( A, B, 18 luni) ). Indicii de recunoaștere au fost obținuți ca frecvență (%) de explorare și / sau adulmecare a obiectului care va fi înlocuit sau a celui nou care a fost înlocuit. Index Indicele de recunoaștere (%) indică frecvențele din testul de retenție al ORT după scăderea celor din testul de antrenament (fundal). WT, de tip sălbatic; (DAL, H2 -), DAL101 șoareci care beau apă de control degazată; (DAL, H 2 +), DAL101 șoareci care beau apă cu hidrogen. Datele sunt afișate ca media ± SEM. n = 9, * p <0,05, ** p <0,01 de testul t al lui Student. C ) Șoarecii au fost supuși unei sarcini de evitare pasivă. Latențele treptate înainte și după șocul electric sunt obținute și Δ Latența (-s) trece prin indicarea scăderii latențelor treptate după ce înainte de șocul electric. WT, de tip sălbatic (n = 10); DAL, H2 -, DAL101 șoareci care primesc apă de control degazată (n = 8); și DAL, H2 +, DAL101 șoareci care primesc H2-apă (n = 8). Datele sunt afișate ca media ± SEM. p <0,05.

La vârsta de 18 luni, șoarecii au fost supuși celui de-al doilea ORT, care poate fi realizat folosind diferite obiecte la vârsta de 18 luni [ 14 ]. Șoarecii în vârstă DAL101 care beau apă hidrogenata H 2 au memorat în continuare semnificativ obiectele originale și au preferat unul mai nou decât grupul martor (Fig. 1A 1A, 18 luni ).

În continuare, pentru a testa efectele potabile ale apei hidrogenate H 2 din stadiul ulterior, am început să dăm apă hidrogenata H 2 la șoarecii masculi DAL101 la vârsta de 8 luni în loc de 1 lună și am supus ORT la vârsta de 14 luni ( Fig. 1B 1B în vârstă de 14 luni) și a doua ORT la vârsta de 18 luni (Fig. 1B 1B 18 luni ). Chiar și când șoarecii au început să bea la vârsta de 8 luni, apa hidrogenata H 2 a suprimat semnificativ declinul abilităților de învățare și memorie la vârsta de 18 luni, precum și la vârsta de 14 luni (Fig. 1B 1B ) .

Mai mult decât atât, am supus șoarecii la PA [ 22 ] la vârsta de 18 luni ca o metodă alternativă. Într-o zi după ce s-a dat un șoc electric de 0,3 mA timp de 2 secunde, șoarecii C57BL / 6 de tip sălbatic au memorat șocul, astfel cum a fost evaluat prin scăderea timpului (timpurilor) de latență pentru a reintra în compartimentul întunecat din fiecare fundal (Fig. 1C1C ). Grupul H 2- apă  hidrogenata a suprimat semnificativ declinul în învățare și memorie mai mult decât grupul de control (Fig. 1C 1C ).

Astfel, consumul de apă hidrogenata 2  a suprimat deficitul de învățare și memorie la șoarecii de stres oxidativ.

3.3. Neurodegenerare suprimată de hidrogen-apă

Pentru a examina dacă apa H 2 ar putea preveni neurodegenerarea la șoarecii DAL101 în vârstă, am colorat hipocampul cu un anticorp anti-NeuN specific neuronului (Fig. 2A 2A ). Neurodegenerarea a fost evaluată prin activări gliale folosind un anticorp anti-GFAP și un anticorp anti-Iba-I microglia-specific. Celulele imun pozitive pe câmpul vizual (FOV) au fost contorizate în regiunea CA1 (Fig. 2B 2B ).

Un fișier extern care conține o imagine, ilustrare etc. Numele obiectului este CAR-15-482_F2.jpg

Apa de hidrogen a suprimat neurodegenerarea. A ) Regiunea CA1 a hipocampului a fost colorată cu anticorpi împotriva NeuN (un marker neuronal), GFAP (un marker astrocitic) sau Iba-1 (un marker microglial) (bare de scară: 50 µm). Panourile din dreapta arată imagini mărită ale pătratelor din panourile din stânga (bare de scară: 10 µm). B ) Celulele pozitive pentru anticorpii anti-NeuN, anti-GFAP și anti-Iba-I pe câmpul vizual (FOV) au fost contorizate în regiunea CA1 (n = 5). Datele sunt afișate ca media ± SD. p <0,05, ** p <0,01 (tip sălbatic vs DAL), # p <0,05 (H2-apă hidrogenata vs. apă de control în DAL).

Numărul neuronilor a fost redus în grupul DAL101 de control, în comparație cu grupul de tip sălbatic, iar grupa H2-DAL101 a arătat o tendință de recuperare a scăderii (Fig. 2A 2A ). Așa cum s-a descris anterior, [ 4 ] șoarecii control DAL101 au prezentat o creștere a activării gliale, iar grupul H2-apă  hidrogenata a suprimat activarea glială îmbunătățită în regiunea CA1 (Fig. 2 2 , GFAP și Iba-I).

3.4. Hidrogen-apă a prelungit durata medie de viata  a șoarecilor

Șoarecii DAL101 au prezentat o durată de viață mai scurtă, care a fost descrisă și anterior [ 4 ]. Pentru a examina dacă consumul de apă hidrogenata H 2  a atenuat durata de viață scurtată, șoarecii DAL101 au început să bea controlul sau H2-apă hidrogenata la vârsta de 1 lună. Deși apa hidrogenata H2 nu a extins durata de viață maximă (Fig. 3A 3A ), H2-apă hidrogenata a extins semnificativ durata de viață a șoarecilor DAL101 (Fig. 3B 3B ).

Un fișier extern care conține o imagine, ilustrare etc. Numele obiectului este CAR-15-482_F3.jpg

Extinderea duratei de viață medii prin consumul continuu de H 2- apă. A ) Curba Kaplan-Meier reprezentând supraviețuirea femelelor C57BL / 6 șoareci (de tip sălbatic), femele DAL101 șoareci apă de control (apă de control) și H 2- apă (H 2- apă). B ) Fiecare punct indică durata de viață a fiecărui mouse.Barele indică durata medie de viață a fiecărui grup. p < 0,05 (p = 0,036) de testul t al lui Student.

3.5. studiu clinic randomizat, controlat cu placebo

 Aparente privind recrutarea, randomizarea și urmărirea pentru studiu. Au fost randomizati în total 81 de subiecți din 1.032 de participanți; cu toate acestea, 3 din grupul de control și 5 din grupul de intervenție au fost diagnosticați ca fiind neeligibili după randomizare și nu au fost inclusi în această analiză. Caracteristicile de bază și factorii de viață au fost echilibrați între grupurile de studiu (Tabelul 1 1 ). Alocarea aleatorie a fost stratificată în funcție de vârsta de ~ 74 ani și scorul MMSE de ~ 28 puncte. Rata medie de conformitate a apei potabile a fost estimată la 64% în ambele grupuri la 1 an, ceea ce înseamnă că subiecții au băut 320 ml / zi în medie. Media scorurilor totale ADAS-cog în H2 – și grupurile de control au fost 8,04 și, respectiv, 7,89, fără nicio semnificație.

Un fișier extern care conține o imagine, ilustrare etc. Numele obiectului este CAR-15-482_F4.jpg

Profilul recrutării, randomizarea și urmărirea acestui studiu. Acest studiu a fost un studiu randomizat, dublu-orb, controlat cu placebo, realizat ca parte a proiectului Tone, un studiu epidemiologic în curs de desfășurare efectuat în Tone Town, Ibaraki, Japonia [ 23 , 24 ].

tabelul 1

Caracteristici de fond ale 73 de subiecți cu insuficiență cognitivă ușoară.

Control (n = 38) Intervenție (n = 35)
Însemna SD sau% Însemna SD sau%
Femeie * 20 (52,6%) 19 (54,3%)
Vârsta (ani) 74,45 5,44 73.97 5.11
Indicele masei corporale (kg / m2) 23,55 2,59 23.19 4,08
Tensiunea arterială sistolică (mmHg) 131.26 12.35 135.14 13.31
Tensiunea arterială diastolică (mmHg) 77.92 7.13 78.89 9,53
Educație (ani) 11.26 2,71 11.57 2.83
Băutor actual de alcool * 19 (50,0%) 14 (40,0%)
Fumator curent * 4 (10,5%) 5 (14,3%)
Obiceiul actual de exercițiu * 27 (71,1%) 22 (62,9%)
Transportator APOE4 * 6 (15,7%) 7 (20,0%)
Istorie de familie * 2 (5,3%) 2 (5,7%)
Comorbiditate *
Hipertensiune 15 (39,5%) 14 (40,0%)
Diabetul zaharat 4 (10,5%) 5 (14,3%)
dislipidemia 4 (10,5%) 4 (11,4%)
Accident vascular cerebral 2 (5,3%) 1 (2,9%)
depresiune 1 (2,6%) 2 (5,7%)
MMSE 28.08 1.66 27.83 1,74
ADAS-Cog 7,89 3,19 8.04 3,47

* indică frecvența (%).

După 1 an, nu au fost observate daune sau efecte neintenționate la fiecare grup și a existat o tendință de îmbunătățire a scorului ADA-cog total atât în ​​grupele H 2 – cât și în grupurile de control (supliment. Tabelul S1 ), probabil din cauza intervențiilor ca exercițiu moderat prin proiectul Tone. Mai mult decât atât, subiecții din grupul  apa hidrogenata H 2 au avut mai multe tendințe de îmbunătățire decât cei din grupurile de control, deși nu a existat nicio semnificație (supliment. Tabelul S1 ). Cu toate acestea, când acordăm atenție modificărilor de scor în purtătorii genotipului APOE4, totalul ADAS-cog-urilor și scorurile de reamintire a cuvintelor (unul dintre sub-scoruri) s-au îmbunătățit semnificativ, astfel cum este evaluat prin distribuția modificării scorului la fiecare subiect ( Fig. 5 5 ). La transportatorii APOE4, grupul apa hidrogenata H 2 s-a îmbunătățit semnificativ, în timp ce grupul de control a înrăutățit ușor.fig.6 6 ) Deși subiecții din grupul de control nu s-au îmbunătățit, șase și cinci din 7 subiecți s-au îmbunătățit la scorurile ADAS totale și, respectiv, la scorurile de reamintire a cuvintelor, în grupul apa hidrogenata H 2al transportatorilor APOE4.

Un fișier extern care conține o imagine, ilustrare etc. Numele obiectului este CAR-15-482_F5.jpg

Distribuția modificărilor scorului sub și total ADAS-cog. Distribuția modificării punctajului de reamintire a cuvântului ( A ), un scor secundar al ADAS-cog și ( B ) scorului total ADAS-cog-urilor în transportatorii APOE4 (stânga) și APOE4 (dreapta). Fiecare punct indică schimbarea subiecților individuali. Diferența dintre grupurile de control H2 și control a fost semnificativă la purtătorii APOE4 printr-o analiză non-parametrică, precum și o analiză parametrică. A ) p = 0.036 (prin testul t al lui Student) și p = 0.047 (prin testul lui U al lui Mann-Whitney) și ( B ) p = 0.037 (prin testul t al lui Student) și p = 0.044 (prin testul lui U al lui Mann-Whitney) ) pentru ( A ) și, respectiv, ( B ). Barele medii din pastile indică valori mediane.

Un fișier extern care conține o imagine, ilustrare etc. Numele obiectului este CAR-15-482_F6.jpg

Modificări ale scorului ADAS-cog sub-dur și total al fiecărui subiect din operatorii de operare APOE4.Fiecare linie indică modificarea de un an a punctajului de reamintire a cuvântului ( A ) și a scorului total ADAS-cog ( B ) al unui subiect din transportatorii APOE4. * indică p <0.05 după cum se arată în legenda din Fig. 5 .

DISCUŢIE

Tulburările neurodegenerative dependente de vârstă sunt implicate în stresul oxidativ. În acest studiu, am arătat urmatoarele:consumul de H2-apa hidrogenata a suprimat declinul biochimic, comportamental și patologic la șoarecii de stres oxidativ. Scorul ADAS-cog [ 18 ] este măsura cognitivă generală cea mai larg utilizată în studiile clinice ale AD [ 27 , 28 ].Scorul ADAS-cog evaluează mai multe domenii cognitive incluzând memoria, limbajul, praxisul și orientarea. În general, ADAS-cog s-a dovedit de succes în scopul propus. Studiul clinic prezent arată că consumul de apă hidrogenata H 2 a îmbunătățit semnificativ scorul ADAS-cog al purtătorilor genotipului APOE4.

Am arătat anterior că șoarecii DAL101 prezintă neurodegenerare dependentă de vârstă și declin cognitiv și scurtează durata de viață [ 4 ]. Șoarecii DAL101 prezintă fenotipuri demențiale într-o manieră dependentă de vârstă, ca răspuns la o cantitate din ce în ce mai mare de stres oxidativ [ 4 ]. Stresul oxidativ îmbunătățește peroxidarea lipidelor, ceea ce duce la formarea de aldehide α, β nesaturate, foarte reactive, cum ar fi MDA și 4-HNE [ 29 ]. Acumularea de proteine ​​aduse de 4-HNE în neuronii piramidali a fost observată la creierul pacienților cu AD și PD [ 30 ]. Declinul capacității ALDH2 * 2 nu a reușit să detoxifice aldehide citotoxice și, prin urmare, creșterea stresului oxidativ [ 31 ].

Mai mult, șoarecii dublu-transgenici au fost construiți prin încrucișarea șoarecilor DAL101 cu șoarecii Tg2576, care exprimă o formă mutantă a proteinei precursoare amiloide umane (APP). Au prezentat depuneri accelerate de amiloid, fosforilare tau și glioză, precum și capacități de învățare și capacități de memorie afectate. Durata de viață a șoarecilor APP / DAL a fost semnificativ mai scurtă decât cea a șoarecilor APP și DAL101 [ 32 ]. Astfel, aceste animale-model pot fi de ajutor pentru a explora antioxidanți care ar putea fi capabili să prevină demența dependentă de vârstă. Într-adevăr, o dietă care conține Chlorella a arătat efecte atenuate asupra declinului cognitiv în DAL101 [ 33 ].

Unul dintre cei mai puternici factori de risc pentru AD este statutul de purtător al genotipului APOE4, iar rolurile APOE4 în evoluția AD au fost examinate pe larg din diferite aspecte [ 34 , 35 ]. APOE4 crește, de asemenea, numărul de lipoproteine ​​aterogene și accelerează aterogeneza [ 36 ]. Stresul oxidativ crescut la purtătorii APOE4 este considerat unul dintre modificatorii riscului [ 3 ]. O combinație de antioxidanți a îmbunătățit funcția cognitivă a subiecților în vârstă după 3 ani, în special la purtătorii APOE423 ]. Acest rezultat clinic anterior este de acord cu prezentul studiu. 2 acționează ca un antioxidant eficient în interiorul celulelor, datorită capacității sale de a difuza rapid între membrane9 ]. Mai mult, ca funcție secundară anti-oxidativă, H 2 pare să activeze factorul 2 legat de NF-E2 (Nrf2), [ 10 ] care reduce stresul oxidativ prin exprimarea unei varietăți de enzime antioxidante [ 37 ]. Am raportat că băutul cu apă H 2 a prevenit arterioscleroza folosind șoareci knockout APOE, un model de dezvoltare spontană a aterosclerozei care însoțește o scădere a stresului oxidativ [ 38 ]. Astfel, este posibil ca consumul de apă hidrogenata H 2 sa imbunătățească deteriorarea vasculară prin scăderea stresului oxidativ ca antioxidant direct sau indirect, ceea ce duce la îmbunătățirea unui model demintia și a subiecților MCI. În acest studiu, ne-am concentrat pe genotipul izoformelor APOE; cu toate acestea, polimorfismul genei APOE în regiunea promotor influențează expresia genei APOE [ 39 ]. Astfel, va fi important să examinăm efectul apei H2 hidrogenate sub acest polimorfism.

Pentru atenuarea AD, a fost acordată o atenție semnificativă exercițiilor fizice regulate și moderate pentru a ajuta la reducerea riscului de demență și la prevenirea dezvoltării MCI la pacienții îmbătrâniți [ 40 – 42 ].Exercițiul moderat îmbunătățește metabolismul energetic și suprimă expresia citokinelor pro-inflamatorii [ 43 ] și protejează sistemele vasculare [ 40 , 44 , 45 ]. H2 prezintă funcții multiple printr-o scădere a nivelului de citokine pro-inflamatorii și o creștere a metabolismului energetic pe lângă rolurile anti-oxidative. Pentru a exercita mai multe funcții, H 2 reglează diverse căi de transducție a semnalului și expresia multor gene [ 10 ]. De exemplu, H 2 protejează celulele neuronale și stimulează metabolismul energetic prin stimularea expresiei hormonale a ghrelinei [ 15 ] și respectiv a factorului 21 de creștere a fibroblastului [ 21 ]. În schimb, H 2 ameliorează inflamația prin scăderea citokinelor pro-inflamatorii [ 46 ].Astfel, combinația acestor funcții de H2 asupra antiinflamării și stimulării metabolismului energetic ar putea împiedica declinul funcției creierului, [ 10 ] ambele fiind îmbunătățite prin exerciții fizice regulate și moderate. Astfel, este posibil ca funcțiile multiple ale H 2 , inclusiv stimularea metabolismului energetic și antiinflamarea, să contribuie la îmbunătățirea modelului de demență și a subiecților MCI.

Ca un aspect alternativ, H 2 suprima factorul nuclear al căii de transcripție a celulelor T activate (NFAT) pentru a regla diferite tipare de expresie genică [ 47 ]. Semnalizarea NFAT este modificată în AD și joacă un rol important în conducerea neurodegenerarii mediată de β amiloid [ 48 ]. Mai mult decât atât, cascada transcripțională NFAT contribuie la sinaptotoxicitatea β amiloidă [ 49 ]. În plus, o implicare activă a căii de semnalizare mediată de NFAT în degenerarea mediată de α-sin-neuroni în PD [ 50 ]. Într-adevăr, pacienții cu PD s-au îmbunătățit prin consumul de apă hidrogenata H 2, așa cum a fost dezvăluit de un studiu clinic dublu-orb, controlat cu placebo 51 ] și o scară mai mare a unui studiu clinic este în curs de investigare [ 52 ]. Astfel, efectele benefice ale H 2 asupra bolilor neurodegenerative pot fi explicate prin suprimarea reglării transcripționale a NFAT.

CONCLUZIE

Studiul de față sugerează posibilitatea de a încetini progresul demenței prin consumul de apă H 2 prin experimente pe animale și un studiu de intervenție clinică pentru purtătorii APOE4; cu toate acestea, va fi necesară o scară mai lungă și mai mare de încercări pentru a clarifica efectul apei H2 asupra MCI.

Curr Alzheimer Res . 15 (5): 482–492.
PMCID: PMC5872374
PMID: 29110615
Efectele hidrogenului molecular apreciate de un model animal și de un studiu clinic aleatoriu asupra tulburării cognitive ușoare
Kiyomi Nishimaki , 1 Takashi Asada , 2, 3, * Ikuroh Ohsawa , 1, 4 Etsuko Nakajima , 2 Chiaki Ikejima , 2Takashi Yokota , 1 Naomi Kamimura , 1 și Shigeo Ohta 1, 5, *

Date asociate

Materiale suplimentare

MULȚUMIRI

Mulțumim Blue Mercury, Inc. (Tokyo, Japonia) pentru furnizarea de apă H 2 și apă placebo, doamnei Hiroe Murakoshi pentru asistență tehnică și doamnei Suga Kato pentru lucrări de secretariat. Sprijinul financiar pentru acest studiu a fost oferit de Grants-in-Aid pentru Cercetări Științifice de la Societatea Japoneză pentru Promovarea Științei (23300257, 24651055 și 26282198 la SO; 23500971 și 25350907 către KN).Sprijinul financiar pentru acest studiu a fost oferit de Grants-in-Aid pentru Cercetări Științifice de la Societatea Japoneză pentru Promovarea Științei (23300257, 24651055 și 26282198 la SO; 23500971 și 25350907 către KN).

LISTA DE ABREVIERI

APOE4 Apolipoproteină E4
MCI Deficit cognitiv minor
ALDH2 Aldehidă Dehidrogenază 2
ADAS-Cog Evaluarea bolilor Alzheimer Scala-subscala cognitivă
ANUNȚ Boala Alzheimer
PD Boala Parkinson
DAL101 Tipul 101 dominant dominant al polimorfismului mutant ALDH2 (ALDH2 * 2)
4-HNE 4-hidroxi-2-nonenal
8-OHdG 8-hidroxi-2′-deoxiguanozină
MDA malondialdehidă
ORT Sarcina de recunoaștere a obiectelor
PA Sarcina de evitare pasivă
ACGP Proteină acidă fibrilă glială
PBS Salină tamponată cu fosfat
ANOVA Analiza unidirecțională a variației
CI Interval de încredere
MMSE Mini examen de stare mentală
FOV Câmp de vizualizare
APP Proteină precursoare amiloidă
Nrf2 Factorul 2 legat de NF-E2
NFAT Factorul nuclear al celulelor T activate

 

MATERIAL SUPLIMENTAR

Materialul suplimentar este disponibil pe site-ul web al editorului împreună cu articolul publicat.

APROBARE ETICĂ ȘI CONSENTIU DE PARTICIPARE

Studiul pe animale a fost aprobat de Comitetul de îngrijire și utilizare a animalelor de la Școala Medicală Nippon.

Protocolul de studiu clinic uman a fost aprobat de comitetele de etică ale Universității din Tsukuba.

DREPTURILE UMANE ȘI ANIMALE

Toate procedurile de cercetare a animalelor urmate au fost în conformitate cu standardele stabilite în cea de-a opta ediție a Ghidului pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator, publicată de Academia Națională de Științe, The National Academies Press, Washington, DC).

Toate materialele umane au fost obținute în conformitate cu standardele stabilite în principiile Declarației de la Helsinki din 1975, astfel cum a fost revizuit în 2008 ( http://www.wma.net/en/10ethics/10helsinki/<http://www.wma .net / en / 10ethics / 10helsinki / >).

Consimțământ pentru publicare

Toți pacienții au oferit consimțământ scris, cu prioritate, pentru investigațiile de cercetare.

CONFLICTUL DE INTERES

Declarăm că nu există un conflict de interese real și potențial pentru acest studiu. Deși SO a fost consilier științific al Blue Mercury, Inc. (Tokyo, Japonia) de la 2.005 la 2.008, nu a fost implicată în acest studiu.

REFERINȚE

1. Lin MT, Beal MF disfuncție mitocondrială și stres oxidativ în bolile neurodegenerative. Natură. 2006;443 : 787–795. PubMed ] Google Scholar ]
2. Mecocci P., Polidori MC Studii clinice cu antioxidanți în insuficiență cognitivă ușoară și boala Alzheimer. Biochim. Biophys. Acta. 2012; 1822 : 631–638. PubMed ] Google Scholar ]
3. Jofre-Monseny L., Minihane AM, Rimbach G. Impactul genotipului apoE asupra stresului oxidativ, a inflamației și a riscului de boală. Mol. Nutr. Produse alimentare 2008; 52 : 131-145. PubMed ] Google Scholar ]
4. Ohsawa I., Nishimaki K., Murakami Y., Suzuki Y., Ishikawa M., Ohta S. Neurodegenerare dependentă de vârstă care însoțește pierderea memoriei la șoarecii transgenici defecti în activitatea de aldehidă dehidrogenază mitocondrială 2. J. Neurosci. 2008; 28 : 6239–6249. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
5. Chen CH, Ferreira JC, ER Brut, Mochly-Rosen D. Direcția aldehide dehidrogenazei 2: noi oportunități terapeutice. Physiol. Rev. 2014; 94 : 1–34. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
6. Kamino K., Nagasaka K., Imagawa M., Yamamoto H., Yoneda H., Ueki A. și colab. Deficiența de aldehidă dehidrogenază mitocondrială crește riscul de boală Alzheimer cu debut tardiv la populația japoneză. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2000; 273 : 192–196. PubMed ] Google Scholar ]
7. Jo SA, Kim EK, Park MH, Han C., Park HY, Jang Y. și colab. Un polimorfism Glu487Lys în gena pentru aldehida dehidrogenazei mitocondriale 2 este asociat cu infarct miocardic la bărbații coreeni în vârstă. Clin.Chim. Acta. 2007; 382 : 43–47. PubMed ] Google Scholar ]
8. Wang B., Wang J., Zhou S., Tan S., He X., Yang Z. și colab. Asocierea polimorfismului genei aldehidă dehidrogenază mitocondrială (ALDH2) cu susceptibilitatea la boala Alzheimer cu debut tardiv la chineză. J. Neurol. Sci. 2008; 268 : 172–175. PubMed ] Google Scholar ]
9. Ohsawa I., Ishikawa M., Takahashi K., Watanabe M., Nishimaki K., Yamagata K., și colab. Hidrogenul acționează ca un antioxidant terapeutic prin reducerea selectivă a radicalilor de oxigen citotoxici. Nat. Med.2007; 13 : 688–94. PubMed ] Google Scholar ]
10. Ohta S. Hidrogenul molecular ca gaz medical preventiv și terapeutic: inițierea, dezvoltarea și potențialul medicamentului cu hidrogen. Pharmacol. Ther. 2014; 144 : 1–11. PubMed ] Google Scholar ]
11. Ichihara M., Sobue S., Ito M., Ito M., Hirayama M., Ohno K. Efecte biologice benefice și mecanismele de bază ale hidrogenului molecular – revizuire cuprinzătoare a 321 de articole originale. Med. Rez. Gaz2015; 5 : 12. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
12. Iketani M., Ohsawa I. Hidrogenul molecular ca agent neuroprotector. Curr. Neuropharmacol. 2017; 15 : 324–331. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
13. Ohta S. Hidrogenul molecular ca antioxidant nou: imagine de ansamblu asupra avantajelor hidrogenului pentru aplicații medicale. Metode Enzimol. 2015; 555 : 289–317. PubMed ] Google Scholar ]
14. Nagata K, Nakashima-Kamimura N, Mikami T, Ohsawa I, Ohta S. Consumul de hidrogen molecular previne deficiențele provocate de stres în sarcinile de învățare dependente de hipocamp în timpul reținerii fizice cronice la șoareci. 2009. [ PubMed ]
15. Matsumoto A., Yamafuji M., Tachibana T., Nakabeppu Y., Noda M., Nakaya H. „Apa hidrogenică” orală induce secreție de ghrelină neuroprotectoare la șoareci. Sci. Rep. 2013; 3 : 3273.Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
16. Li J., Wang C., Zhang JH, Cai JM, Cao YP, Sun XJ Salină bogată în hidrogen îmbunătățește funcția de memorie într-un model de șobolan al bolii Alzheimer indusă de amiloid beta prin reducerea stresului oxidativ. Rez. Creier 2010; 1328 : 152–161. PubMed ] Google Scholar ]
17. Hayashida K., Sano M., Kamimura N., Yokota T., Suzuki M., Ohta S., și colab. Inhalarea de hidrogen în timpul resuscitării normoxice îmbunătățește rezultatul neurologic într-un model de șobolan de stop cardiac, independent de managementul temperaturii țintit. Circulaţie. 2014; 130 : 2173–2180. PubMed ] Google Scholar ]
18. Rosen WG, Mohs RC, Davis KL O nouă scală de rating pentru boala Alzheimer. A.m. J. Psihiatrie.1984; 141 : 1356–1364. PubMed ] Google Scholar ]
19. Connor DJ, Administrația Sabbagh MN și variația punctajului pe ADAS-Cog. J. Alzheimers Dis. 2008;15 : 461–464. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
20. de Zwart LL, Meerman JH, Commandeur JN, Vermeulen NP Biomarkeri ai aplicațiilor de deteriorare a radicalilor liberi la animale experimentale și la om. Radica gratuită. Biol. Med. 1999; 26 : 202–226. PubMed ] Google Scholar ]
21. Kamimura N., Nishimaki K., Ohsawa I., Ohta S. Hidrogenul molecular îmbunătățește obezitatea și diabetul inducând FGF21 hepatic și stimulând metabolismul energetic la șoarecii db / db. Obezitate (Primăvara de Argint) 2011; 19 : 1396–1403. PubMed ] Google Scholar ]
22. O’Riordan KJ, Huang IC, Pizzi M., Spano P., Boroni F., Egli R., și colab. Reglarea factorului nuclear kappaB în hipocamp prin receptorii metabotropi ai glutamatului din grupa I. J. Neurosci. 2006; 26 : 4870–4879. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
23. Bun S., Ikejima C., Kida J., Yoshimura A., Lebowitz AJ, Kakuma T., și colab. O combinație de suplimente poate reduce riscul de boală Alzheimer la vârstnicii japonezi cu cunoștințe normale. J. Alzheimers Dis. 2015; 45 : 15–25. PubMed ] Google Scholar ]
24. Miyamoto M., Kodama C., Kinoshita T., Yamashita F., Hidaka S., Mizukami K., și colab. Demența și deficiența cognitivă ușoară în rândul celor care nu răspund la un sondaj comunitar. J. Clin. Neurosci. 2009;16 : 270–276. PubMed ] Google Scholar ]
25. Sasaki M., Kodama C., Hidaka S., Yamashita F., Kinoshita T., Nemoto K., și colab. Prevalența a patru subtipuri de deficiență cognitivă ușoară și APOE într-o comunitate japoneză. Int. J. Geriatr. Psihiatrie.2009; 24 : 1119–1126. PubMed ] Google Scholar ]
26. Arevalo-Rodriguez I., Smailagic N., Roque IFM, Ciapponi A., Sanchez-Perez E., Giannakou A., și colab. Mini-Mental State Examination (MMSE) pentru depistarea bolii Alzheimer și a altor demențe la persoanele cu deficiențe cognitive ușoare (MCI). Baza de date Cochrane Syst. Rev. 2015; 3 : CD010783.Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
27. Ihl R., Ferris S., Robert P., Winblad B., Gauthier S., Tennigkeit F. Detectarea efectelor tratamentului cu combinații ale articolelor ADAS-cog la pacienții cu boală Alzheimer ușoară și moderată. Int. J. Geriatr.Psihiatrie. 2012; 27 : 15–21. PubMed ] Google Scholar ]
28. Karin A., Hannesdottir K., Jaeger J., Annas P., Segerdahl M., Karlsson P., și colab. Evaluarea psihometrică a ADAS-Cog și NTB pentru măsurarea răspunsului la medicamente. Acta Neurol. Scand.2014; 129 : 114–122. PubMed ] Google Scholar ]
29. Schneider C., Tallman KA, Porter NA, Brash AR Două căi distincte de formare a 4-hidroxynonenalului. Mecanisme de transformare nonenzimatică a 9- și 13-hidroperoxidelor acidului linoleic în 4-hidroxialkenale. J. Biol. Chem. 2001; 276 : 20831–20838. PubMed ] Google Scholar ]
30. Csala M., Kardon T., Legeza B., Lizak B., Mandl J., Margittai E., și colab. Cu privire la rolul 4-hidroxynonenal în sănătate și boli. Biochim. Biophys. Acta. 2015; 1852 : 826–838. PubMed ] Google Scholar ]
31. Endo J., Sano M., Katayama T., Hishiki T., Shinmura K., Morizane S., și colab. Remodelarea metabolică indusă de stresul aldehidelor mitocondriale stimulează toleranța la stresul oxidativ din inimă. Circ. Res. 2009; 105 : 1118–1127. PubMed ] Google Scholar ]
32. Kanamaru T., Kamimura N., Yokota T., Iuchi K., Nishimaki K., Takami S., și colab. Stresul oxidativ accelerează depunerea amiloidului și afectarea memoriei într-un model de mouse dublu transgenic al bolii Alzheimer. Neurosci. Lett. 2015; 587 : 126–131. PubMed ] Google Scholar ]
33. Nakashima Y., Ohsawa I., Konishi F., Hasegawa T., Kumamoto S., Suzuki Y. și colab. Efectele preventive ale Chlorella asupra declinului cognitiv la șoarecii cu model de demență dependentă de vârstă.Neurosci. Lett. 2009; 464 : 193–198. PubMed ] Google Scholar ]
34. De Marco M., Vallelunga A., Meneghello F., Varma S., Frangi AF, Venneri A. ApoE epsilon4 alele modificări ale conectivității hipocampale în boala Alzheimer timpurie susțin performanța memoriei. Curr.Alzheimer Res. 2017; 14 : 766–777. PubMed ] Google Scholar ]
35. Shackleton B., Crawford F., Bachmeier C. Apolipoproteină Modularea mediată de E a ADAM10 în boala Alzheimer. Curr. Alzheimer Res. 2017; 14 : 578–585. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
36. Hanson AJ, Craft S., Banks WA Genotipul APOE: modificarea răspunsurilor terapeutice în boala Alzheimer. Curr. Pharm. Des. 2015; 21 : 114–120. PubMed ] Google Scholar ]
37. Johnson DA, Johnson JA Nrf2-o țintă terapeutică pentru tratamentul bolilor neurodegenerative. Radica gratuită. Biol. Med. 2015; 88 : 253–267. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
38. Ohsawa I., Nishimaki K., Yamagata K., Ishikawa M., Ohta S. Consumul de apă cu hidrogen previne ateroscleroza la șoarecii de apolipoproteină E. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2008; 377 : 1195–1198. PubMed ] Google Scholar ]
39. Maloney B., Ge YW, Petersen RC, Hardy J., Rogers JT, Perez-Tur J., și colab. Caracterizarea funcțională a trei polimorfisme cu un singur nucleotid prezent în secvența promotorului APOE uman: Efecte diferențiale în celulele neuronale și asupra interacțiunilor ADN-proteine. A.m. J. Med. Genet. B. Neuropsihiatrul. Genet. 2010; 153b : 185-201. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
40. Uemura K., Doi T., Shimada H., Makizako H., Yoshida D., Tsutsumimoto K., și colab. Efectele intervenției exercițiului asupra factorilor de risc vascular la adulții vârstnici cu insuficiență cognitivă ușoară: un studiu controlat randomizat. Dement. Geriatr. Cogn. Dizord. Suplimentar. 2012; 2 : 445–455.Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
41. Gates N., Fiatarone Singh MA, Sachdev PS, Valenzuela M. Efectul antrenamentului de exerciții asupra funcției cognitive la adulții vârstnici cu deficiență cognitivă ușoară: o meta-analiză a studiilor controlate randomizate. A.m. J. Geriatr. Psihiatrie. 2013; 21 : 1086–1097. PubMed ] Google Scholar ]
42. Suzuki T., Shimada H., Makizako H., Doi T., Yoshida D., Ito K., și colab. Un studiu controlat randomizat al exercițiului multicomponent la adulți mai în vârstă cu deficiență cognitivă ușoară. Plus unu.2013; 8 : e61483. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
43. NA inteligentă, Steele M. Efectul pregătirii fizice asupra expresiei citochininei proinflamatorii sistemice la pacienții cu insuficiență cardiacă: o revizuire sistematică. Congestiona. Insuficiență cardiacă.2011; 17 : 110–114. PubMed ] Google Scholar ]
44. Cooper C., Li R., Lyketsos C., Livingston G. Tratament pentru tulburări cognitive ușoare: revizuire sistematică. Br. J. Psihiatrie. 2013; 203 : 255–264. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
45. Lavie CJ, Arena R., Swift DL, Johannsen NM, Sui X., Lee DC și colab. Exercitiile si sistemul cardiovascular: stiinta clinica si rezultatele cardiovasculare. Circ. Res. 2015; 117 : 207–219.Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
46. Buchholz BM, Kaczorowski DJ, Sugimoto R., Yang R., Wang Y., Billiar TR, și colab. Inhalarea de hidrogen ameliorează stresul oxidativ în vătămarea grefelor intestinale induse de transplant. A.m. J. Transplant. 2008; 8 : 2015–2024. PubMed ] Google Scholar ]
47. Iuchi K., Imoto A., Kamimura N., Nishimaki K., Ichimiya H., Yokota T., și colab. Hidrogenul molecular reglează expresia genelor prin modificarea generației dependente de reacția în lanț a radicalilor liberi de mediatori fosfolipide oxidate. Sci. Rep. 2016; 6 : 18971. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
48. Abdul HM, Sama MA, Furman JL, Mathis DM, Beckett TL, Weidner AM și colab. Declinul cognitiv al bolii Alzheimer este asociat cu modificări selective în semnalizarea calcineurinei / NFAT. J. Neurosci.2009; 29 : 12957–12969. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
49. Hudry E., Wu HY, Arbel-Ornath M., Hashimoto T., Matsouaka R., Fan Z. și colab. Inhibarea căii NFAT atenuează neurotoxicitatea beta amiloidă la un model de șoarece al bolii Alzheimer. J. Neurosci. 2012; 32 : 3176–3192. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
50. Luo J., Sun L., Lin X., Liu G., Yu J., Parisiadou L., și colab. O cale dependentă de calcineurină și NFAT este implicată în degenerarea indusă de alfa-sinucleină a neuronilor dopaminergici din creierul mijlociu. Zumzet. Mol. Genet. 2014; 23 : 6567–6574. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]
51. Yoritaka A., Takanashi M., Hirayama M., Nakahara T., Ohta S., Hattori N. Studiul pilot al terapiei cu H (2) în boala Parkinson: un studiu randomizat controlat cu placebo dublu-orb. Mov. Dizord. 2013; 28 : 836–839. PubMed ] Google Scholar ]
52. Yoritaka A., Abe T., Ohtsuka C., Maeda T., Hirayama M., Watanabe H., și colab. Un studiu randomizat dublu-orb multi-centru de apă cu hidrogen pentru boala Parkinson: protocol și caracteristici de bază. Neurol BMC. 2016; 16 : 66. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] Google Scholar ]

hidrogen molecular suprima stressul oxidativ din cavitatea peritoneala a bolnavilor DIALIZA PERITONEALA

Abstract

fundal

Se presupune că stresul oxidativ (OS) legat de produsele de degradare a glucozei, cum ar fi metilglyoxal, este asociat cu deteriorarea peritoneală la pacienții tratați cu dializă peritoneală (PD). Cu toate acestea, utilizarea agenților antioxidanți generali este limitată datorită efectelor nocive ale acestora. Acest studiu și-a propus să clarifice influența noului antioxidant  hidrogen molecular (H 2 ) asupra stresului oxidativ OS peritoneal folosind starea redox de albumină ca marker.

metode

Probele de efluent și sânge de 6 pacienți cu dializa peritoneala PD regulat au fost obținute în timpul testului de echilibru peritoneal folosind dializă standard și dializă îmbogățită cu hidrogen molecular. Starea redox de albumină în efluent și sânge a fost determinată folosind cromatografie lichidă de înaltă performanță.

Rezultate

Proporția medie de albumină redusă (ƒ (HMA)) în efluent a fost semnificativ mai mare în dializatul îmbogățit cu hidrogen molecular H2 (62,31 ± 11,10%) decât în ​​dializa standard (54,70 ± 13,08%). De asemenea, serul ƒ (HMA) după administrarea de dializat îmbogățit cu hidrogen (65,75 ± 7,52%) a fost semnificativ mai mare decât cel după dializă standard (62,44 ± 7,66%).

concluzii

Administrarea trans-peritoneală a hidrogenului molecular H 2 reduce stresul oxidativ peritoneal și sistemic.

fundal

Deteriorarea peritoneală este una dintre cele mai grave complicații ale terapiei de dializă peritoneală (PD), ceea ce duce la eșecul ultrafiltrației și la complicația mai severă a încapsulării sclerozei peritoneale (EPS).Pe măsură ce durata PD crește, la fel și riscul de deteriorare a peritoneului [ 1 ]. Mai mult de 40% dintre pacienții din Japonia, care au fost tratati cu PD mai mult de 8 ani, l-au oprit din cauza progresiei daunelor peritoneale [ 2 ]. Mecanismele patologice ale daunelor peritoneale sunt multi-factoriale, dar datele acumulate au relevat rolul critic al produselor finale de degradare a glucozei (PIB), adică a compușilor carbonil reactiv chimic. Metilglyoxal (MG) este unul dintre PIB-urile toxice reprezentative, provocând efecte dăunătoare datorită naturii sale oxidante rapide și nediscriminate [ 3 ], precum și producției sale de specii toxice reactive de oxigen (ROS), cum ar fi radicalul hidroxil, radicalul metil și carbonul nedeterminat. radicali centrați [ 4 ]. Acestea erau prezente în dializa convențională și intră, de asemenea, în dializă din plasma uremică [ 5 ]. Dializatul cu PIB scăzut compatibil bio este în prezent disponibil, dar un studiu japonez multicentric la nivel național, studiul NEXT-PD [ 6 ], a dezvăluit apariția EPS chiar și prin utilizarea de soluții cu PIB scăzut [în curs de transmitere]. Acest lucru indică necesitatea unor noi abordări terapeutice pentru a suprima posibilele insulte din stresul oxidativ sporit (OS) datorat oxidanților uremici din cavitatea peritoneală.

Recent, a fost dezvăluit noul rol al hidrogenului molecular (H2) ca antioxidant. H2 elimină radicalul hidroxil din celulele cultivate și organismele vii [ 7 ]. Interesant este că H2 nu influențează alte ROS, inclusiv superoxidul, peroxidul și oxidul nitric; aceste ROS joacă roluri fiziologice importante în organism8 ]. La om, a fost testată siguranța H 2 , în special în domeniul scufundărilor profunde. Spre deosebire de medicamentele generale, care de obicei au unele efecte nocive, nu s-a găsit toxicitate chiar și la concentrații mari de hidrogen molecular H29 ]. H2 are astfel potențial terapeutic pentru stările patologice legate de ROS [ 10 ].

Studiul de față a testat efectele dializei peritoneale care conțin o concentrație ridicată de hidrogen molecular (dializă îmbogățită cu H2) ca un anti-oxidant nou în rândul pacienților tratați cu PD. Drept urmare, am demonstrat că utilizarea dializei îmbogățite cu hidrogen ar putea reduce nu numai stresul oxidativ peritoneal, ci și sistematic OS în medii clinice.

metode

Prepararea dializatei îmbogățite cu hidrogen molecular

Dializatul îmbogățit cu hidrogen molecular  a fost preparat folosind dizolvantul de hidrogen nedestructiv MiZ (MiZ, Kanagawa, Japonia), așa cum s-a raportat în altă parte [ 11 ]. Când dializatul peritoneal comercial este scufundat în apă îmbogățită cu hidrogen molecular H2(apa hidrogenata) , hidrogenul pătrunde prin recipient, ceea ce duce la creșterea treptată a concentrației de H2 a dializatului (Figura 1 ). Am pregătit dializă îmbogățită cu H2 folosind acest aparat prin scufundarea pungilor de dializat peritoneal comercial pentru mai mult de 2 ore. Apoi s-a aplicat dializa îmbogățită cu hidrogen sub formă de soluție de testare a echilibrului peritoneal.

An external file that holds a picture, illustration, etc. Object name is 2045-9912-3-14-1.jpg

MiZ dizolvator de hidrogen nedistructiv (A) și concentrația de hidrogen a dializatului peritoneal în apă saturată de hidrogen (B). Concentrația de hidrogen a dializei și a apei saturate cu hidrogen în jurul dializatei a fost măsurată folosind un aparat de măsurare H 2 dizolvat DH-35A (DKK-TOA, Tokyo, Japonia).

pacienţii

Au fost studiați șase pacienți cu PD de sex masculin (vârsta medie, 55 de ani; interval, 44–71 ani; lungimea PD, 39 ± 17 luni; greutate, 68,1 ± 16,1 kg; înălțime, 166,2 ± 5,6 cm). Patologia care stă la baza bolii renale în stadiu final a fost următoarea: glomerulonefrită cronică, n = 3; nefropatie diabetică, n = 2; și nefropatie hipertensivă, n = 1. Pacienții cu infecție activă, sângerare, disfuncție hepatică, boală de colagen, vasculită sistemică, accident cardiovascular în termen de 6 luni sau malignitate au fost excluși din acest studiu.Starea de performanță a tuturor pacienților a fost clasa 1 în conformitate cu criteriile American Heart Association [ 12 ]. Toți pacienții primeau zilnic PD ambulatoriu continuu (3-4 saci / zi) folosind soluție neutră de dextroză cu PIB scăzut. Comitetul de etică al Universității Medicale Fukushima a aprobat acest protocol de studiu (Acceptarea nr. 1362) și consimțământul scris în scris a fost obținut de la toți pacienții înainte de înscriere.

Protocol

Pacienții au fost supuși unui test simplificat de echilibrare peritoneală (PET rapid) folosind dializat standard, apoi au fost supuși PET rapid folosind dializat îmbogățit cu hidrogen molecular 2 săptămâni mai târziu.PET-ul rapid a fost realizat în conformitate cu metoda Twardowski [ 13 ]. Pe scurt, dializatul peritoneal (2 L de 2,5% dextroză-dializat) a fost infuzat intraperitoneal cu un cateter Tenckhoff și întregul volum de dializă a fost scurs din corp după 240 de minute. Efluentul scurs a fost amestecat bine și 2 ml s-au colectat ca probă de efluent. Probele de sânge au fost obținute înainte și după PET-ul rapid, apoi s-au extras 2 ml de ser după centrifugare și s-au păstrat la -80 ° C timp de 1-4 săptămâni până la analiză. Probele de ser și efluent colectate pentru a măsura redoxul de albumină au fost păstrate la -80 ° C timp de 1-4 săptămâni până la analiză. În timpul PET rapid, tensiunea arterială, pulsul cardiac și concentrația de hidrogen în respirație au fost măsurate în mod repetat la fiecare 60 de minute. Concentrația de hidrogen a respirației a fost, de asemenea, măsurată în trei cazuri imediat după, 15 min și 30 min după perfuzia de dializă îmbogățită cu H2. Concentrația de hidrogen respirator a fost măsurată folosind un gaz biologic (gaz în cavitatea orală) Aparat de măsurare H 2 BGA-1000D (Aptec, Kyoto, Japonia).

Măsurarea stării redox de albumină

Albumină serică umană (HSA) este o proteină compusă din 585 aminoacizi. Reziduul amino la poziția 34 din terminalul N este o cisteină, care conține o grupă mercapto (grupa SH). Acest grup mercapto deoxidizează alte substanțe în funcție de gradul de OS înconjurător și este în sine oxidat. Din perspectiva reziduurilor de cisteină, HSA este un amestec de mercaptoalbumină umană (HMA) în care grupul mercapto nu este oxidat, non-mercaptoalbumin-1 uman în care formarea legăturii de disulfură este oxidată reversibil în principal de cisteină (HNA-1) și uman care nu este mercaptoalbumină-2, care este puternic oxidat și formează o grupă sulfinică (-SO 2 H) sau sulfonică (-SO 3 H).

Starea redox a HSA a fost determinată folosind cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC), așa cum s-a raportat anterior [ 14 ]. Sistemul HPLC a fost format dintr-un automatizator (AS-8010; Tosoh, Tokyo, Japonia; volumul injecției, 2 µL) și o pompă cu dublu piston (CCPM; Tosoh) în combinație cu un controler de sistem (CO-8011; Tosoh). Cromatografiile au fost obținute folosind un detector de alee pentru fotodiode UV6000LP (zona de detecție, 200-600 nm cu pas de 1 nm; Thermo Electron, Waltham, MA, SUA). În acest studiu a fost utilizată o coloană Shodex-Asahipak ES-502N 7C (10 × 0,76 cm ID, forma DEAE pentru HPLC cu schimb de ioni; Showa Denko, Tokyo, Japonia; temperatura coloanei, 35 ± 0,5 ° C). Eluzia a fost realizată sub formă de eluzie de gradient liniar, cu concentrații de etanol gradate (0 la 1 min, 0%; 1 până la 50 min, 0 → 10%; 50 până la 55 min, 10 → 0%; 55 până la 60 min, 0%) pentru ser în 0,05 M acetat de sodiu și 0,40 M amestec de sulfat de sodiu (pH 4,85) la un debit de 1,0 ml / min. De-aerarea soluției tampon a fost efectuată prin balonarea heliului.

Profilurile HPLC obținute în urma acestor proceduri au fost supuse unei încadrări curbe numerice cu software-ul de simulare PeakFit versiunea 4.05 (SPSS Science, Chicago, IL, SUA) și fiecare formă de vârf a fost aproximată de o funcție gaussiană. Valorile fracțiilor de HMA, HNA-1 și HNA-2 la HSA total au fost apoi calculate (ƒ (HMA), ƒ (HNA-1) și, respectiv, (HNA-2).

analize statistice

Valorile sunt exprimate ca medie ± deviație standard, dacă nu este specificat altfel. Pentru analiza statistică a fost utilizat un software statistic StatView versiunea 5.0 (SAS Institute, Cary, NC, SUA). Semnificația datelor colectate a fost evaluată folosind o analiză de măsurare repetată a t- testului sau un factor repetat cu un factor al variației (ANOVA), urmată de testul Scheffe ca test post-hoc, după caz. Pentru amploarea corelației, a fost utilizat coeficientul de corelație ( R ) al Pearson. Diferențele sau corelațiile au fost considerate semnificative pentru valorile P <0.05.

Rezultate

Tabelul 1 prezintă modificări ale tensiunii arteriale, ritmului cardiac și respirației concentrației de hidrogen în timpul PET-ului rapid. În ceea ce privește tensiunea arterială și ritmul cardiac, nu s-a observat nicio diferență semnificativă între dializatul standard și H2 ( îmbogățit cu testul T ). Nu s-au observat modificări semnificative în timpul PET-ului rapid, nici în dializat standard sau cu H 2 (măsuri repetate cu factor ANOVA).

tabelul 1

Modificările tensiunii arteriale, pulsului cardiac și respirației concentrației H2 în timpul PET-ului rapid

Dializa standard Dializată îmbogățită în H2
Presiunea arterială mmHg




0 min


130 ± 12/79 ± 10


135 ± 13/81 ± 10


60 min


130 ± 11/79 ± 5


131 ± 14/82 ± 12


120 min


125 ± 9/79 ± 7


134 ± 8/80 ± 14


180 min


123 ± 12/75 ± 12


136 ± 5/78 ± 12


240 min


128 ± 9/78 ± 7


132 ± 9/81 ± 13


Puls / min




0 min


81 ± 7


82 ± 12


60 min


76 ± 6


79 ± 12


120 min


74 ± 6


78 ± 14


180 min


77 ± 4


78 ± 17


240 min


78 ± 7


81 ± 15


Respirație H2 ppm




0 min


4,7 ± 6,6


3,2 ± 2,0


60 min


1,8 ± 1,3


8,3 ± 7,5 *


120 min


3,0 ± 1,7


8,5 ± 11,0


180 min


4,2 ± 2,8


5,8 ± 4,8


240 min 5,5 ± 6,7 7,2 ± 4,6

*; p <0,05 comparativ cu dializa standard.

Modificările concentrației de hidrogen în respirație în toate cazurile sunt prezentate în Tabelul 1 și în Figura 2 (A, B). Deși nu s-au observat modificări semnificative în timpul PET-ului rapid, atât în ​​dializatul standard și în cel de H2, concentrația de hidrogen la 60 de minute a fost semnificativ mai mare în dializatul îmbogățit cu H2 decât în ​​dializa standard.

An external file that holds a picture, illustration, etc. Object name is 2045-9912-3-14-2.jpg

Schimbarea concentrației de hidrogen în respirație în timpul PET-ului rapid.

A ) Schimbarea orară în PET folosind dializă standard. Nu s-au observat modificări semnificative.

B ) Schimbare orară în timpul PET-ului folosind dializă îmbogățită cu H2. Concentrația de hidrogen la 60 min a fost semnificativ mai mare în dializatul îmbogățit cu H2 decât în ​​dializa standard. 

C ) Respirați concentrațiile de hidrogen înainte de, imediat după, 15 min și 30 min după administrarea dializei îmbogățite cu H2 în trei cazuri. Concentrațiile de hidrogen imediat după 15 minute după administrare au fost semnificativ mai mari decât cele înainte de administrare.

Concentrațiile de hidrogen din respiratie înainte, imediat după, 15 min după și 30 min după administrarea de dializat îmbogățit cu H2 în trei cazuri sunt prezentate în Figura 2 C. Concentrațiile de hidrogen au fost semnificativ mai mari imediat după 15 minute și după administrare (22,7 ± 5,7 și 15,3 ± 3,5 ppm, respectiv) decât înainte de administrare (4,0 ± 1,7 ppm).

Figura 3 prezintă starea redox a albuminei în fluidul efluent. Proporția medie de HMA (ƒ (HMA)) a fost semnificativ mai mare în dializatul îmbogățit cu H2 (62,31 ± 11,10%) decât în ​​dializa standard (54,70 ± 13,08%). În schimb, ƒ (HNA-1) a fost semnificativ mai scăzut în dializatul îmbogățit cu H2 (34,26 ± 10,24%) decât în ​​dializa standard (41,36 ± 12,04%). La fel ca ƒ (HNA-1), ƒ (HNA-2) a fost semnificativ mai scăzut în dializă îmbogățită cu H2 (3,43 ± 0,92%) decât în ​​dializa standard (3,94 ± 1,13%). Aceste rezultate sugerează că utilizarea de dializat îmbogățit cu H2 a redus stressul  oxidativ peritoneal. În ceea ce privește rezultatul PET-ului rapid (D / P-Cre, volumul scurs) și al creatininei efluente, albuminei, interleukinei 6 și al antigenului de carbohidrați 125, nu au fost evidente diferențe între dializa îmbogățită cu H2 și  cea standard (tabelul 2 ).

An external file that holds a picture, illustration, etc. Object name is 2045-9912-3-14-3.jpg

 starea Redox a albuminei în lichidul efluent. Proporția medie a albuminei reduse (ƒ (HMA)) a fost semnificativ mai mare ( A ), iar cea a albuminei oxidate (ƒ (HNA-1) ( B ) și ƒ (HNA-2)) ( C ) a fost semnificativ mai mică în H 2 -dializat îmbogățit decât în ​​dializă standard.

tabel 2

Rezultatele valorii serice a creatininei, PET-ului rapid și testului efluenților

Dializa standard Dializată îmbogățită în H2
Creatinină mg / dL


10,53 ± 2,27


10,03 ± 2,19


Parametru PET rapid




D / P-Cre


0,71 ± 0,12


0,66 ± 0,11


Volumul scurs mL / 4 ore


470 ± 184


442 ± 130


Test de efluent




Albumin mg / L


408 ± 175


402 ± 145


Interleukina-6 pg / ml


6,0 ± 3,3


5,5 ± 2,3


CA125 U / ml 18,8 ± 8,5 19,5 ± 5,0

Figura 4 prezintă starea redox a albuminei în ser înainte și după PET-ul rapid. Nivelul seric ƒ (HMA) după administrarea de dializat îmbogățit cu H2 (65,75 ± 7,52%) a fost semnificativ mai mare decât cel după dializă standard (62,44 ± 7,66%). În schimb, ƒ (HNA-1) după administrarea de dializat îmbogățit cu H2 (31,12 ± 6,73%) a fost semnificativ mai mic decât cel al dializei standard (34,73 ± 7,02%). Aceste rezultate sugerează că utilizarea dializei îmbogățite cu H 2 a redus nu numai sitressul oxidativ peritoneal, ci și stressul oxidativ sistemic. Nu a fost observată nicio diferență semnificativă între nivelurile de efluent și serul ƒ (HMA) după administrarea dializatului îmbogățit cu H2 (65,31 ± 11,10% și, respectiv, 62,71 ± 7,52%), în timp ce efluentul ƒ (HMA) după administrarea de dializat standard a fost semnificativ mai mic decât serul ƒ (HMA) înainte de administrarea dializatei standard (54,70 ± 13,08% și, respectiv, 62,96 ± 8,34%; P = 0,0339), ceea ce sugerează că oxidarea intraperitoneală a albuminei a fost suprimată prin dializă îmbogățită cu hidrogen molecular H2.

An external file that holds a picture, illustration, etc. Object name is 2045-9912-3-14-4.jpg

 starea Redox a albuminei în ser înainte și după PET rapid. Proporția medie de albumină redusă (ƒ (HMA)) a fost semnificativ mai mare după PET-ul rapid, folosind dializă îmbogățită cu H2 decât după aceea folosind dializă standardA ). În schimb, proporția medie de albumină oxidată reversibil (ƒ (HNA-1)) a fost semnificativ mai mică după PET-ul rapid folosind dializat îmbogățit cu hidrogen molecular H2 decât cea după utilizarea dializei standard ( B ). Nu au fost găsite modificări semnificative în albumina oxidată ireversibil (ƒ (HNA-2)) în ambele grupuri ( C ).

Discuţie

Câteva rapoarte au sugerat că stresul oxidativ participă la deteriorarea peritoneală, cu descoperiri precum colorarea citoplasmatică puternică a 8-hidroxi-2′-deoxiganozinei în probe de biopsie peritoneală la pacienții cu PD pe termen lung [ 15 ], semnalizarea proteinei kinazei C amplificate și expresia fibronectinei datorată la ROS crescut în celulele mezoteliale umane cultivate [ 16 ]. În ceea ce privește rolul central al stresului oxidativ îmbunătățit în afectarea peritoneală a PD, Gunal și colab. 17 ] a arătat că suplimentarea orală cu agentul anti-oxidant trimetazidină a inhibat deteriorarea morfologică și funcțională a peritoneului într-un model de șobolan PD. Cu toate acestea, în ceea ce privește suprimarea stresului oxidativ , până în prezent nu au fost disponibile abordări clinice pentru tratamentul PD.

Studiul de față a urmărit testarea posibilității terapeutice de utilizare a hidrogenului molecular dizolvat în dializă pentru a suprima stresul oxidativ intraperitoneal în mediul clinic. Acest studiu a examinat starea redox a albuminei ca marker al stresului oxidativ. Deoarece modificarea stării redox a albuminei este o reacție fiziologică și directă, este adecvată atunci când se evaluează stresul oxidativ în timp real și / sau se detectează modificări rapide ale stresului oxidativ, în comparație cu alți markeri de stres oxidativ, cum ar fi 8-hidroxi-2 ‘- deoxiganozină lipoproteine ​​oxidate cu densitate joasă și izoprotane F2, toate acestea fiind subproduse in vivo în timpul procesului de oxidare.

Acest studiu pilot efectuat pe 6 pacienți a demonstrat clar că administrarea unică de dializă îmbogățita cu hidrogen molecular H2 a crescut nivelurile atât de peritoneala cât și de plasmă ƒ (HMA) fără efecte dăunătoare.

Administrarea intraperitoneală de H 2 a modificat starea redox locală, ceea ce poate indica potențialul terapeutic de a elibera  hidrigen molecular H 2 direct în cavitatea abdominală în ceea ce privește ameliorarea daunelor peritoneale prin tratamentul PD.Pe de altă parte, interesant, au fost observate creșteri semnificative ale nivelului seric ƒ (HMA) la administrarea intraperitoneală de H2.Modificările rapide ale concentrației de hidrogen a gazului expirat după administrarea de dializat îmbogățit cu H2 pot însemna că hidrogenul molecular din dializat este distribuit rapid în organism pentru a suprima stresul oxidativ sistematic. O altă posibilitate este ca creșterea ƒ (HMA) în cavitate să poată fi recrutată în circulația sistemică prin drenajul limfatic abdominal. Mecanismele exacte care stau la baza unui ser crescut ƒ (HMA) trebuie abordate în viitor.

În plus, mecanismele de creștere ƒ (HMA) și scădere ƒ (HMA1) cu hidrogen molecular H2 au rămas neclare în acest studiu. Cu toate acestea, hidrogenul molecular este cunoscut pentru a reduce direct nivelurile de radical hidroxil citotoxic [ 7 ], prin mai multe mecanisme posibile, cum ar fi reglarea metaloproteinelor particulare prin legare sau interacțiunile metaloproteină-hidrogen [ 18 ]. Dacă H2 reacționează direct cu reziduul de mercapto-albumină, sau H2 îl modifică indirect, ar trebui clarificat în viitor.

Capacitatea anti-oxidativă satisfăcătoare de a bea apă îmbogățită cu hidrogen molecular H2 fără efecte dăunătoare a fost raportată atât în ​​medii experimentale [ 19 – 23 ] cât și în medii clinice, de exemplu, diabet zaharat tip II [ 24], sindrom metabolic [ 25 ], miopatii ( distrofie musculară progresivă și polimiozită / dermatomiozită) [ 26] și artrită reumatoidă27 ]. În plus, am raportat, de asemenea, fezabilitatea clinică a aplicării apei îmbogățite cu H2 sub formă de dializant pentru tratamentul cu hemodializă [ 28 , 29]. Având în vedere aceste rapoarte și concluziile noastre actuale, dializatul peritoneal îmbogățit cu H2 ar putea fi de interes în studiile clinice în ceea ce privește conservarea peritoneală.

Mai mult, efectele terapeutice par plauzibile în ceea ce privește prevenirea evenimentelor cardiovasculare la pacienți, întrucât scăzutul f (HMA) a fost un factor de risc semnificativ pentru mortalitatea cardiovasculară în rândul pacienților tratați cu PD [ 30 ] și HD [ 14 ].

În rezumat, administrarea unică de dializat îmbogățit cu  hidrogen molecular H 2 a redus sistemul stresul oxidativ peritoneal și sistemic fără efecte dăunătoare. Un studiu longitudinal este garantat pentru a asigura efecte benefice din punct de vedere clinic, cum ar fi suprimarea deteriorării peritoneale și a afectării cardiovasculare.

Produse ce creeaza hidrogen molecular in apa pina la nivel saturatie:

purificator aparat apa hidrogenata / ionizator apa AlkaViva Vesta H2  

purificator-ionizator-apa-AlkaViva-Vesta-H2
purificator-ionizator-apa-AlkaViva-Vesta-H2

 
CLICK AICI PENTRU A VEDEA MAI MULTE DESPRE ionizatorul apa ALKAVIVA VESTA H2, cel mai puternic purificator,ionizator si generator de apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen diatomic molecular H2 CounterTop

 

 purificator aparat apa hidrogenata / ionizator apa AlkaViva Delphi  H2 – sub-chiuveta

purificator-ionizator-apa-AlkaViva-Delphi-H2
purificator-ionizator-apa-AlkaViva-Delphi-H2

 

CLICK AICI PENTRU A VEDEA MAI MULTE DESPRE ionizatorul apa  ALKAVIVA Delphi  H2 – Vesta H2 in varianta SUB CHIUVETA

* În funcție de sursa de apă

*DELPHI H2 este Vesta H2 in varianta sub chiuveta

 

 

Logo-ul lui mgr

Link to Publisher's site
Med Gaz Res . 2013; 3: 14.
Publicat online 2013 Iulie 1. doi: 10.1186 / 2045-9912-3-14
PMCID: PMC3734057
PMID: 23816239
Administrarea transperitoneală de hidrogen dizolvat pentru pacienții dializa peritoneala: o abordare nouă pentru a suprima stresul oxidativ în cavitatea peritoneală

Interesele concurente

Autorii declară că nu au interese concurente.

Contribuțiile autorilor

HT, YH și WJZ au efectuat selecțiile de pacienți și colecțiile de probe. HT a redactat manuscrisul. YM, TT și SE au efectuat măsurătorile probelor. SK, și TW au contribuit la studiu în calitate de consilieri seniori.BS a efectuat instalarea sistemului de echipamente pentru studiu. MN a organizat proiectul de studiu și a elaborat manuscrisul final. Toți autorii au citit și au aprobat manuscrisul final.

Referințe

  • Yamamoto R, Otsuka Y, Nakayama M, Maruyama Y, Katoh N, Ikeda M, Yamamoto H, Yokoyama K, Kawaguchi Y, Matsushima M. Factorii de risc pentru încapsularea sclerozei peritoneale la pacienții care au prezentat tratament de dializă peritoneală. Clin Exp Nephrol. 2005; 9 : 148–152.doi: 10.1007 / s10157-005-0349-8. PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Kawaguchi Y, Ishizaki T, Imada A, Oohira S, Kuriyama S, Nakamoto H, Nakamoto M, Hiramatsu M, Maeda K, Ota K. Grup de studiu pentru retragerea din PD în Japonia: Căutarea motivelor abandonului din dializa peritoneală : un sondaj la nivel național în Japonia. Perit Dial Int. 2003; 23(supliment 2): S175–177. PubMed ] Google Scholar ]
  • Glomb MA, Monnier VM. Mecanismul modificării proteinelor prin glicoxal și glicolaldehidă, intermediari reactivi ai reacției Maillard. J Biol Cham. 1995; 270 : 10017–10026. doi: 10.1074 / jbc.270.17.10017. PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Nakayama M, Saito K, Sato E, Nakayama K, Terawaki H, Ito S, Kohno M. Generarea radicală prin reacția non-enzimatică a metilgloxalului și a peroxidului de hidrogen. Redox Rep. 2007; 12 : 125–133. doi: 10.1179 / 135100007X200182. PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Terawaki H, Nakao M, Nakayama K, Nakayama M, Kimura A, Takane K, Mitome J, Hamaguchi A, Ogura M, Yokoyama K, Ito S, Hosoya T. Distrugere peritoneală și transport de metilglioxal.Transplant Dialog Nephrol. 2011; 26 : 753–754. doi: 10.1093 / ndt / gfq698. PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Kawanishi H, Nakayama M, Miyazaki M, Honda K, Tomo T, Kasai K, Nakamoto H. NEXT-PD Grup de studiu: Studiu prospectiv multicentric observativ al sclerozei peritoneale încapsulare cu soluție de dializă neutră – studiul NEXT-PD. Cadran de avans. 2010; 26 : 71–74. PubMed ] Google Scholar ]
  • Ohsawa I, Ishikawa M, Takahashi K, Watanabe M, Nishimaki K, Yamagata K, Katsura K, Katayama Y, Asoh S, Ohta S. Hidrogenul acționează ca un antioxidant terapeutic prin reducerea selectivă a radicalilor de oxigen citotoxici. Nat Med. 2007; 13 : 688–94. doi: 10.1038 / nm1577. PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Abraini JH, Gardette-Chauffour MC, Martinez E, Rostain JC, Lemaire C. Reacții psihofiziologice la om în timpul unei scufundări la mare deschis la 500 m cu un amestec hidrogen-heliu-oxigen. J Appl Physiol. 1994; 76 : 1113–1118. PubMed ] Google Scholar ]
  • Fontanari P, Badier M, Guillot C, Tomei C, Burnet H, Gardette B, Jammes Y. Modificări ale performanțelor maxime ale mușchilor de inspirație și schelet în timpul și după 7,1-MPa Hydra 10 scufundări umane. Eur J Appl Physiol. 2000; 81 : 325–328. doi: 10.1007 / s004210050050. PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Ohta S. Progresele recente către medicamentul cu hidrogen: potențialul hidrogenului molecular pentru aplicații preventive și terapeutice. Curr Pharm Des. 2011; 17 : 2241–52. doi: 10.2174 / 138161211797052664. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Abe T, Li XK, Yazawa K, Hatayama N, Xie L, Sato B, Kakuta Y, Tsutahara K, Okumi M, Tsuda H, Kaimori JY, Isaka Y, Natori M, Takahara S, Nonomura N. Universitatea bogată în hidrogen din Soluția din Wisconsin atenuează leziunea de ischemie-reperfuzie la rece. Transplantul de organe.2012; 94 : 14–21. PubMed ] Google Scholar ]
  • American Heart Association: Criterii pentru evaluarea gravității bolii renale consacrate. Raportul consiliului cu privire la rinichi în boli cardiovasculare. Circulaţie. 1971; 44 : 306–307. PubMed ] Google Scholar ]
  • Twardowski ZJ. PET-o abordare mai simplă pentru determinarea rețetelor pentru terapia de dializă adecvată. Cadran de avans. 1990; 6 : 186–191. PubMed ] Google Scholar ]
  • Terawaki H, Takada Y, Era S, Funakoshi Y, Nakayama K, Nakayama M, Ogura M, Ito S, Hosoya T. Starea redox a albuminei și incidența cardiovasculară gravă la pacienții cu hemodializă. Dialogul lui Apher. 2010; 14 : 465–471. doi: 10.1111 / j.1744-9987.2010.00841.x. PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Ishibashi Y, Sugimoto T, Ichikawa Y, Akatsuka A, Miyata T, Nangaku M, Tagawa H, Kurokawa K. Dializatul de glucoză induce leziuni ale ADN mitocondrial în celulele mezoteliale peritoneale. Perit Dial Int. 2002; 22 : 11–21. PubMed ] Google Scholar ]
  • Lee HB, Yu MR, Song JS, Ha H. Speciile de oxigen reactiv amplifică semnalizarea proteinei kinazei C în expresia înaltă a fibronectinei indusă de glucoză de către celulele mesoteliale umane peritoneale. Rinichi int. 2004; 65 : 1170–1179. doi: 10.1111 / j.1523-1755.2004.00491.x. PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Gunal AI, Celiker H, Ustundag B, Akpolat N, Dogukan A, Akcicek F. Efectul inhibării stresului oxidativ cu trimetazidină asupra modificărilor peritoneale induse de soluția de dializă peritoneală hipertonică. J Nephrol. 2003; 16 : 225–230. PubMed ] Google Scholar ]
  • Shi P, Sun W, Shi P. O ipoteză asupra mecanismului chimic al efectului hidrogenului. Med Gaz Res.2012; 2 : 17. doi: 10.1186 / 2045-9912-2-17. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Ohsawa I, Nishimaki K, Yamagata K, Ishikawa M, Ohta S. Consumul de apă cu hidrogen previne ateroscleroza la șoarecii de apolipoproteină E. Biochem Biophys Res Comun. 2008; 377 : 1195–1198. doi: 10.1016 / j.bbrc.2008.10.156. PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Sato Y, Kajiyama S, Amano A, Kondo Y, Sasaki T, Handa S, Takahashi R, Fukui M, Hasegawa G, Nakamura N, Fujinawa H, Mori T, Ohta M, Obayashi H, Maruyama N, Ishigami A. Hidrogen- apa pură bogată previne formarea de superoxizi în felii de creier de șoareci knockout SMP30 / GNL epuizați de vitamina C. Biochem Biophys Res Comun. 2008; 375 : 346–350. doi: 10.1016 / j.bbrc.2008.08.020. PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Nakashima-Kamimura N, Mori T, Ohsawa I, Asoh S, Ohta S. Hidrogenul molecular atenuează nefrotoxicitatea indusă de medicamentul anti-cancer cisplatin fără a compromite activitatea anti-tumorii la șoareci. Cancer Chemother Pharmacol. 2009; 64 : 753–761. doi: 10.1007 / s00280-008-0924-2. PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Cardinalul JS, Zhan J, Wang Y, Sugimoto R, Tsung A, McCurry KR, Billar TR, Nakao A. Apa cu hidrogen oral previne nefropatia cronică a alogrefelor la șobolani. Rinichi int. 2010; 77 : 101–109.doi: 10.1038 / ki.2009.421. PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Zhu WJ, Nakayama M, Mori T, Nakayama K, Katoh J, Murata Y, Sato T, Kabayama S, Ito S. Aportul de apă cu niveluri ridicate de hidrogen dizolvat (H 2 ) suprimă leziuni cardio-renale induse de ischemie în Dahl șobolani sensibili la sare. Transplant Dialog Nephrol. 2011; 26 : 2112–2118. doi: 10.1093 / ndt / gfq727. PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Kajiyama S, Hasegawa G, Asano M, Hosoda H, Fukui M, Nakamura N, Kitawaki J, Imai S, Nakano K, Ohta M, Adachi T, Obayashi H, Yoshikawa T. Suplimentarea apei bogate în hidrogen îmbunătățește metabolismul lipidelor și al glucozei la pacienții cu diabet zaharat tip 2 sau toleranță la glucoză afectată. Nutr Res. 2008; 28 : 137–143. doi: 10.1016 / j.nutres.2008.01.008. PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Nakao A, Toyoda Y, Sharma P, Evans M, Guthrie N. Eficacitatea apei bogate în hidrogen asupra stării antioxidante a subiecților cu potențial sindrom metabolic – un studiu pilot cu etichetă deschisă.J Clin Biochem Nutr. 2010; 46 : 140–149. doi: 10.3164 / jcbn.09-100. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Ito M, Ibi T, Sahashi K, Ichihara M, Ito M, Ohno K. Încercare open-label și studiu randomizat, dublu orb, controlat cu placebo, încrucișat cu apă îmbogățită cu hidrogen pentru miopatii mitocondriale și inflamatorii. Med Gaz Res. 2011; 1 : 24. doi: 10.1186 / 2045-9912-1-24. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Ishibashi T, Sato B, Rikitake M, Seo T, Kurokawa R, Hara Y, Naritomi Y, Hara H, Nagao T. Consumul de apă care conține o concentrație mare de hidrogen molecular reduce stresul oxidativ și activitatea bolii la pacienții cu artrită reumatoidă: studiu de tip pilot deschis. Med Gaz Res. 2012; 2 : 27. doi: 10.1186 / 2045-9912-2-27. Articol gratuit PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Nakayama M, Kabayama S, Nakano H, Zhu WJ, Terawaki H, Nakayama K, Katoh K, Satoh T, Ito S. Efectul biologic al apei electrolizate în hemodializă. Clinica Nephron. 2009; 112 : c9–15. doi: 10.1159 / 000210569. PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Nakayama M, Nakano H, Hamada H, Itami N, Nakazawa R, Ito S. Un nou sistem bioactiv de hemodializă folosind dihidrogen dizolvat (H 2 ) produs prin electroliza apei: un studiu clinic.Transplant Dialog Nephrol. 2010; 25 : 3026–3033. doi: 10.1093 / ndt / gfq196. PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]
  • Terawaki H, Matsuyama Y, Matsuo N, Ogura M, Mitome J, Hamaguchi A, Terada T, Era S, Hosoya T. Un nivel inferior de albumină redusă induce o incidență cardiovasculară gravă în rândul pacienților cu dializă peritoneală. Clin Exp Nephrol. 2012; 16 : 629–635. doi: 10.1007 / s10157-012-0610-x. PubMed ] [ CrossRef ] Google Scholar ]

Articole din Medical Gas Research sunt oferite aici, prin autoritatea Wolters Kluwer – Medknow Publications

apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular ARTRITA REUMATOIDA – studiu clinic uman

Recent, s-a demonstrat că hidrogenul molecular (H2) este un agent de neutralizare selectiv pentru radicalul liber hidroxil.

Deși etiologia sa este necunoscută, radicalii hidroxilici au fost sugerați a fi implicați în patogeneza artritei reumatoide (o boală inflamatorie cronică caracterizată prin distrugerea osului și a cartilajului ..).

Am emis ipoteza că hidrogenul olecular H2 dizolvat  în apă ar putea completa terapia convențională prin reducerea stresului oxidativ în artrita reumatoidă

A fost elaborată metoda de preparare a apei care conține o concentrație extrem de ridicată de hidrogen molecular H2.

20 de pacienți cu poliartrită reumatoidă (RA) au consumat zilnic timp de 4 săptămâni 530 ml de apă conținând apă de 4 până la 5 ppm hidrogen molecular (apă cu grad înalt de hidrogen molecular). După o perioadă de spălare de 4 săptămâni, pacienții au baut apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular H2 , nivel ridicat timp de încă 4 săptămâni.

8-hidroxideoxiganina urinară (8-OHdG) și activitatea bolii (DAS28, utilizând nivele de proteină C-reactivă [CRP]) a fost estimată la sfârșitul fiecărei perioade de 4 săptămâni.

Rezultate:

Consumul de apă cu hidrogen molecular/ nivel ridicat de H2 pare să crească concentrația H2 – hidrogen molecular mai mult decât apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular  H2  saturat (1,6 ppm) in vivo.

Urina 8-OHdG a fost semnificativ redusă cu 14,3% (p <0,01) în medie. De asemenea, DAS28 a scăzut de la 3,83 până la 3,02 (p <0,01) în aceeași perioadă.

După perioada de spălare, atât 8-OHdG urinară, cât și media
DAS28 a scăzut, comparativ cu sfârșitul perioadei de consum.

În cea de-a doua perioadă de băut, DAS28 medie a fost redusă de la 2,83 până la 2,26 (p <0,01). Urina 8-OHdG nu a fost redusă în continuare, dar a rămas sub valoarea inițială.

Toți cei 5 pacienți cu artrita reumatoida precoce (cu durată <12 luni) care nu au prezentat anticorpi împotriva peptidelor ciclică citrullinată (ACPA) au obținut remisie și 4 dintre aceștia au devenit fără simptome la sfârșitul studiului.

Concluzii: Rezultatele sugerează că agentul de colectare a radicalilor hidroxil – H2 hidrogen molecular (dizolvat în apă) reduce efectiv stresul oxidativ la pacienții cu artrită reumatoidă. Simptomele artritei reumatoide au fost îmbunătățite în mod semnificativ cu apa cu H2 hidrogen molecular – nivel ridicat.

produse ce creeaza H2 – hidrogen diatomic molecular in apa:

purificator-ionizator-apa-AlkaViva-Vesta-H2

purificator-ionizator-apa-AlkaViva-Vesta-H2

purificator-ionizator-apa-AlkaViva-Athena-H21
purificator-ionizator-apa-AlkaViva-Athena

Consumption of water containing a high
concentration of molecular hydrogen reduces
oxidative stress and disease activity in patients
with rheumatoid arthritis: an open-label pilot
study
Toru Ishibashi1*, Bunpei Sato2
, Mariko Rikitake1
, Tomoki Seo2
, Ryosuke Kurokawa2
, Yuichi Hara1
, Yuji Naritomi1
,
Hiroshi Hara1 and Tetsuhiko Nagao3

* Correspondence: toruishi@haradoi-hospital.com 1
Haradoi Hospital, Department of Rheumatology and Orthopaedic Surgery,
6-40-8 Aoba, Higashi-ku, Fukuoka 813-8588, Japan
Full list of author information is available at the end of the article
MEDICAL GAS
RESEARCH
© 2012 Ishibashi et al.; licensee BioMed Central Ltd. This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative
Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/by/2.0), which permits unrestricted use, distribution, and
reproduction in any medium, provided the original work is properly cited.

doi:10.1186/2045-9912-2-27
Cite this article as: Ishibashi et al.: Consumption of water containing a high concentration of molecular hydrogen reduces oxidative stress and disease activity in patients with rheumatoid arthritis: an open-label pilot study. Medical Gas Research 2012 2:27.

 

apa hidrogenata/apa hidrogenizata/apa cu hidrogen molecular tratament PARODONTITA

Stresul oxidativ este implicat în patogeneza parodontitei. O reducere a stresului oxidativ prin utilizarea apei bogate în hidrogen molecular (HW) ar putea fi benefică sănătății parodontale.

În acest studiu pilot, am comparat efectele tratamentului parodontal non-chirurgical cu sau fără consum de apa HW bogata în hidrogen molecular pe parodontită.

13 pacienți (3 femei, 10 bărbați) cu parodontită au fost împărțiți în două grupuri: grupul martor (n = 6) sau grupul apa HW bogata în hidrogen molecular (n = 7). În grupul de apa HW bogata în hidrogen molecular, participanții au consumat apa HW bogata în hidrogen molecular de 4-5 ori / zi timp de opt săptămâni. La două până la patru săptămâni, toți participanții au primit tratament parodontal non-chirurgical. Au fost efectuate examinări orale la momentul inițial, două, patru și opt săptămâni, iar la aceste momente de timp s-a obținut ser pentru a evalua stresul oxidativ.

La momentul inițial, nu au existat diferențe semnificative în statusul parodontal între grupurile controlate și grupurile apa HW bogata în hidrogen molecular Grupul de apă HW bogata în hidrogen molecular a arătat îmbunătățiri mai mari în ceea ce privește adâncimea de buzunar și nivelul clinic de atașare decât grupul martor la două, patru și opt săptămâni (p <0,05). Grupul HW de apă bogata în hidrogen molecular, de asemenea, a prezentat un nivel crescut al serului de capacitate totală antioxidantă la patru săptămâni, comparativ cu valoarea inițială (p <0,05). Consumul de apa HW bogata în hidrogen molecular  a îmbunătățit efectele tratamentului parodontal non-chirurgical, îmbunătățind astfel parodontita.

PMID:26783840
PMCID:PMC4665424
DOI:10.3390/antiox4030513
 2015 Jul 9;4(3):513-22. doi: 10.3390/antiox4030513.
Drinking Hydrogen-Rich Water Has Additive Effects on Non-Surgical Periodontal Treatment of Improving Periodontitis: A Pilot Study.

Author information

1
Departments of Preventive Dentistry, Okayama University Graduate School of Medicine, Dentistry and Pharmaceutical Sciences, 2-5-1 Shikata-cho, Kita-ku, Okayama 700-8558, Japan. tetsuji@md.okayama-u.ac.jp.
2
Departments of Preventive Dentistry, Okayama University Graduate School of Medicine, Dentistry and Pharmaceutical Sciences, 2-5-1 Shikata-cho, Kita-ku, Okayama 700-8558, Japan. de18053@s.okayama-u.ac.jp.
3
Departments of Preventive Dentistry, Okayama University Graduate School of Medicine, Dentistry and Pharmaceutical Sciences, 2-5-1 Shikata-cho, Kita-ku, Okayama 700-8558, Japan. dekuni7@md.okayama-u.ac.jp.
4
Departments of Preventive Dentistry, Okayama University Graduate School of Medicine, Dentistry and Pharmaceutical Sciences, 2-5-1 Shikata-cho, Kita-ku, Okayama 700-8558, Japan. de18019@s.okayama-u.ac.jp.
5
Departments of Preventive Dentistry, Okayama University Graduate School of Medicine, Dentistry and Pharmaceutical Sciences, 2-5-1 Shikata-cho, Kita-ku, Okayama 700-8558, Japan. de18017@s.okayama-u.ac.jp.
6
Center for Innovative Clinical Medicine, Okayama University Hospital, 2-5-1 Shikata-cho, Kita-ku, Okayama 700-8558, Japan. t-maru@md.okayama-u.ac.jp.
7
Departments of Preventive Dentistry, Okayama University Graduate School of Medicine, Dentistry and Pharmaceutical Sciences, 2-5-1 Shikata-cho, Kita-ku, Okayama 700-8558, Japan. tomofu@md.okayama-u.ac.jp.
8
Departments of Preventive Dentistry, Okayama University Graduate School of Medicine, Dentistry and Pharmaceutical Sciences, 2-5-1 Shikata-cho, Kita-ku, Okayama 700-8558, Japan. mmorita@md.okayama-u.ac.jp.